ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DE

CHIMBORAZO FACULTAD DE CIENCIAS

CARRERA: INGENIERÍA AMBIENTAL

INFORME DE LABORATORIO DE BIOQUÍMICA AMBIENTAL

PRÁCTICA N.ª 4

TEMA: ACTIVIDAD ENZIMÁTICA DE LA CATALASA

DATOS GENERALES

NOMBRES: CÓDIGOS:
Valeria Alexandra Vallejos Tapia 149
Diana Guevara Meza 456
Ramirez Quiñonez Jefferson Elian 309
Naveda Vimos Mauro Ismael 411

FECHA DE REALIZACIÓN
5-06-2022

FECHA DE ENTREGA
8-06-2022

Riobamba- Ecuador
 OBJETIVOS

Objetivo General

• Verificar la actividad enzimática de la catalasa presente en el hígado de pollo.

Objetivos Específicos

• Conocer la reacción de la actividad enzimática de la catalasa.

• Comprobar que pasa con la enzima catalasa cuando sufre alguna alteración.
• Familiarizarse con las propiedades de los enzimas y observar la actividad de la catalasa.

MARCO TEÓRICO

Por definición, una enzima es una proteína que cataliza una reacción química específica y

usualmente dichas reacciones se encuentran formando parte de una cadena de otras dando lugar a lo

que se conoce como Ruta Metabólica, de manera que el producto de una reacción se convierte en el

sustrato de la siguiente

La acción de las enzimas comienza cuando éstas se unen a un ligando o proteína blanco llamado

sustrato y una vez en contacto con éste disminuyen su energía de activación aumentando la tasa de

reacción en aproximadamente un rango de 106-1012veces. Las regiones responsables de la

especificidad y del poder catalítico de las enzimas reciben el nombre de sitio activo. Dichas cadenas

constan de dos regiones funcionalmente importantes; la que reconoce el sustrato y se une a él y la

que cataliza la reacción.

La acción catalítica de cualquier enzima puede medirse por dos criterios:

-Constante de Michaelis-Menten (km) que es una medida de la afinidad de una enzima por su

sustrato.

-Velocidad Máxima (V máx.) de reacción a una concentración de saturación de la enzima.

Las enzimas se clasificaron en primer lugar por las reacciones que catalizaban, ya que era lógico

suponer que aquellas enzimas responsables de la misma reacción básica pudieran estar relacionadas

estructuralmente (y por lo tanto filogenéticamente) y diferir en especificidad de sustrato. Alrededor

de 1955 se creó la comisión internacional de enzimas (EC) que las dividió en 6 clases diferentes:

 Oxidorreductasas
  Transferasas

 Hidrolasas

 Liasas

 Isomerasas  Ligasas.

Sin embargo, esta clasificación más bien práctica no concuerda necesariamente con las relaciones

naturales que guardan entre sí, por ejemplo: de 190 familias homólogas contenidas en el Protein

Data Bank (PDB) existen aproximadamente 91 que tienen miembros de diferentes clasificaciones

EC y de éstas, 28 presentan ejemplos de proteínas no catalíticas. Esto es evidencia clara de que las

propiedades de las enzimas pueden cambiar drásticamente durante la evolución de sus familias y

que la estructura de éstas no necesariamente debe predecir su función. (Catarina, 2016)

Actividad Enzimática

Las enzimas son moléculas de naturaleza proteica que actúan como catalizadores en todas las

reacciones del metabolismo. Para que ocurran estas reacciones es generalmente necesaria la

presencia de un catalizador que debe ser específico para determinada reacción (de lo contrario

podría ocurrir reacciones no deseadas). En estas reacciones, las enzimas actúan sobre unas

moléculas denominadas sustratos, las cuales se convierten en moléculas diferentes denominadas

productos. Casi todos los procesos en las células necesitan enzimas para que ocurran a unas tasas

significativas. A las reacciones mediadas por enzimas se las denomina reacciones enzimáticas.

Debido a que las enzimas son extremadamente selectivas con sus sustratos y su velocidad crece

solo con algunas reacciones, el conjunto (set) de enzimas sintetizadas en una célula determina el

tipo de metabolismo que tendrá cada célula. A su vez, esta síntesis depende de la regulación de

la expresión génica. Como todos los catalizadores, las enzimas funcionan disminuyendo la

energía de activación (ΔG‡) de una reacción, de forma que se acelera sustancialmente la tasa de

reacción. Las enzimas no alteran el balance energético de las reacciones en que intervienen, ni

modifican, por lo tanto, el equilibrio de la reacción, pero consiguen acelerar el proceso incluso

millones de veces. Una reacción que se produce bajo el control de una enzima, o de un

catalizador en general, alcanza el equilibrio mucho más deprisa que la correspondiente reacción
 no catalizada. Al igual que ocurre con otros catalizadores, las enzimas no son consumidas por

las reacciones que catalizan, ni alteran su equilibrio químico. Sin embargo, difieren de otros

catalizadores por ser más específicas. Las enzimas catalizan alrededor de 4.000 reacciones

bioquímicas distintas. No todos los catalizadores bioquímicos son proteínas, pues algunas

moléculas de ARN son capaces de catalizar reacciones (como la subunidad 16S de los ribosomas

en la que reside la actividad peptidil transferasa). También cabe nombrar unas moléculas

sintéticas denominadas enzimas artificiales capaces de catalizar reacciones químicas como las

enzimas clásicas. (Lopez, 2019)

Catalasa

El cuerpo tiene un sistema de defensa antioxidante que consiste en enzimas y Compuestos de bajo

peso molecular. Una de las enzimas implicadas en la defensa. El mantenimiento del equilibrio

oxidativo es catalasa, la catalasa Se encuentra en células de tejidos animales y vegetales.

Según Conn (1996) El hígado contiene varias oxidasas, enzimas que pueden oxidar H de

diversas sustancias orgánicas. Los aminoácidos y los ácidos grasos pueden ser oxidados

en los peroxisomas en el metabolismo natural. Además, las enzimas de los peroxisomas

oxidan sustancias tóxicas como el alcohol. Por ello, son muy abundantes en el hígado,

donde se tiene que detoxificar del alcohol y otras sustancias nocivas. Un producto

intermedio de las reacciones de oxidación del metabolismo es el H2O2, un compuesto

potencialmente tóxico. Sin embargo, los peroxisomas contienen catalasa que descompone

el H2O2 en compuestos menos peligrosos.

La reacción de la catalasa sobre el H2O2, es la siguiente:

MATERIALES Y REACTIVOS
MATERIALES
Vaso de precipitación de 250 ml Gradilla para tubos, Pinza
Pipeta de 10 ml Reverbero
Tubos de ensayo Termómetro

REACTIVOS
Peróxido de hidrogeno Solución de almidón
Reactivo de Lugol Reactivo de Fehling.

• La reacción que se lleva a cabo es: H2O2 H2O + O2. En contexto, el hígado cocido

tiene un aspecto un poco rosa-grisáceo y con un tamaño reducido al que tenía en primera

instancia. También esta se encontró por un momento en un rango de temperatura mayor -

recordemos que las enzimas son proteínas y son termolábiles-.

• Se verifico que en él hígado se está dando una reacción enzimática por la proteína

catalasa, observando cómo se liberaba una gran cantidad de burbujeo y se decoloraba el hígado,

esto como producto de la reacción entre el sitio activo del sustrato y la catalasa la cual se encarga

de descomponer el peróxido de hidrogeno en agua y oxígeno.

• Sabiendo que en el primer tubo se dio una reacción natural

GRÁFICO

• En este caso se usó el baño maría para la realización pero es un grafico representativo
de como se puede realizar la práctica.
PROCEDIMIENTO

RESULTADOS
 OBSERVACIONES
• En el experimento pudimos observar lo que acurre con la enzima catalasa en diferentes muestra,

como el en contacto del peróxido de hidrogeno, el hígado en contacto con el alcohol y luego con el

peróxido de hidrogeno y por el ultimo el hígado en contacto con el ácido clorhídrico y después con el

peróxido de hidrogeno, al reaccionar con peróxido de hidrogeno existe un burbujeo pero que al estar

en contacto con otras sustancias el burbujeo pierde su intensidad

• En determinación de la catalasa la presencia de peroxisomas que reaccionan al someterlos al

peróxido de hidrogeno (agua oxigenada), el cual es altamente reactivo y tóxico para las células del

hígado, por lo que la función de los peroxisomas es proteger a las células del hígado del agua

oxigenada.

• Las moléculas de agua oxigenada se rompen de manera rápida por la enzima catalasa, En

contexto, el hígado cocido tiene un aspecto de otro color y sea más fuerte o menos intenso dependiendo

con que sustancia estuvo en contacto antes y con un tamaño reducido al que tenía en primera instancia.

CONCLUSIONES

• Se conoció la reacción de la actividad enzimática de la catalasa cuando se aplicó peróxido de

hidrogeno al hígado de pollo y se obtuvo agua y oxígeno.

• Se comprobó que al aplicar etanol al hígado de pollo esto causo una alteración en menor

grado a la actividad enzimática de la catalasa, mientras que el ácido clorhídrico afecto mucho más a

la catalasa ya que menoro su actividad enzimática haciendo que la liberación de oxígeno sea muy

escasa.

• Se identifico que la posible razón de las alteraciones que tuvo la catalasa fue debida al pH de las

sustancias aplicadas en la práctica, ya que este pudo afectar su actividad enzimática.

RECOMENDACIONES
• Tener cuidado en el momento de realizar la prueba con el fosforo (combustión) así

evitaremos quemaduras o algún tipo de aaccidente.

• Es necesario esperar el tiempo indicado en la guía de practica para que la reacción que

se debe producir sea la estimada

• Utilizar el equipo de seguridad necesario dentro del laboratorio para evitar accidentes.

PREGUNTAS

1. Defina desnaturalización de enzimas

Se le denomina desnaturalización de enzimas a la pérdida de la estructura del

compuesto de un orden superior, quedando reducida la cadena polipeptídica a un

polímero básico. Provoca ciertos cambios como: en las propiedades hidrodinámicas,

la disminución de la solubilidad y pérdida de las propiedades biológicas (Serrate,

2020). La enzima desnaturalizada solo cuenta con su estructura primaria.

2. Describa a la catalasa presente en el hígado de pollo y a la amilasa o

ptialina presente en la saliva.

Catalasa

Es una proteína presente en el hígado del pollo, su principal función es la de romper

la molécula del agua para separar el oxígeno, formando gas-oxígeno. Actúa como un

catalizador para destruir a la molécula del H2O2 lo cual es tóxico para muchos seres

vivos (Villalobos, et. al, 2016).

Amilasa

Es una enzima que permite digerir los carbohidratos, esta se produce dentro de la

saliva la cual permite depurar los alimentos en la ingesta de los mismos. La amilasa

se encuentra en niveles bajos en el cuerpo.

Bibliografía

• Gonzales, M., & Roman, D. (20 de diciembre de 2019). Lifeder. Obtenido de

https://www.lifeder.com/hidrolasas/

• Gonzalez, M. (25 de octubre de 2010). La Guía . Obtenido de Enzima catalasa:

https://quimica.laguia2000.com/conceptos-basicos/enzima-catalasa

• Khan Academy. (s.f.). Obtenido de https://es.khanacademy.org/science/high-

schoolbiology/hs-energy-and-transport/hs-enzymes/a/hs-

enzymesreview#:~:text=La%20actividad%20enzim%C3%A1tica%20puede%20v

erse,de%20unirse% 20a%20un%20sustrato.

• Serrate, C. (2020). Las enzimas. Introducción a la enzimología [Artículo

universitario]. https://riunet.upv.es/handle/10251/146362

• Villalobos, A., Espinosa, P. y Ramírez, S. (2016). Practicidad de las enzimas

en las bio-necesidades de la sociedad contemporánea.

https://vinculacion.dgire.unam.mx/vinculacion-1/Memoria-Congreso-

2016/trabajos-ciencias-biologicas/biologia/6.pdf