TÉCNICAS PARA EL ESTUDIO DE

CÉLULAS: TINCIÓN CELULAR.

Ana Sofía Gómez Vergara
Cristina Galván Cohen
Sebastián Benedetty Huertas
María Edilma Tovio
Facultad de ciencias básicas, programa de Biología
Montería – Córdoba
24 de marzo del 2023

1. INTRODUCCIÓN:
Las células son pequeñas y
complejas, lo que dificulta la
observación de su estructura o
composición molecular.
Nuestra capacidad de ver los
detalles estructurales de las
mismas depende de los
instrumentos que
dispongamos.
La tinción es un método
sencillo para incrementar el
contraste entre la célula, su
entorno y por lo tanto
contribuye a mejorar la
imagen observada. Las
técnicas de tinción con
diversos colorantes facilitan la
observación al aumentar
notablemente el contraste; la
mayoría de los tejidos sobre
todo los de los animales son
incoloros y por eso, se
necesita teñirlos para observar
sus características
morfológicas con el
microscopio óptico ya que
aportan color a la estructura.
Por otra parte, un colorante se
define como una sustancia
capaz de dar color a las
células, tejidos y fibras. De
acuerdo con su origen se
pueden dividir en colorantes
naturales los cuales son
extraídos de plantas o
animales y colorantes
artificiales, que son aquellos
de minerales procesados y
manipulados dentro del
laboratorio, estos son los
elementos principales de las
tinciones generales
 atendiendo a los objetivos que -Observar, diferenciar y
se quieren obtener, los analizar detalles de la
métodos de coloraciones de estructura de las células.
clasifican en: tinción simple,
-Conocer los diferentes tipos
tinción compuesta y tinción
de células.
especial.
También hay muestras que no
son coloreadas conocidas 3. MATERIALES Y
como examen fresco, método MÉTODOS.
en el que no se utiliza ningún
tipo de colorante. Las -Microscopio.
muestras se extienden -8 portaobjetos y
directamente sobre la cubreobjetos.
superficie de un portaobjetos -Puente de coloración.
para su observación. Si el -1 beaker.
material que es demasiado -Frasco lavador con agua
espeso para permitir la destilada.
diferenciación de sus -1 papel filtro.
elementos puede diluirse con -Algodón.
solución salina fisiológica -Hoja de elodea.
estéril. Se deposita -Plátano.
suavemente un cubreobjetos -Cultivo de hongos.
sobre la superficie del -Guantes.
material. Por ejemplo, estos -Solución de lugol.
tipos de preparación se -Solución azul de metileno.
emplean para detectar -Sudan III o IV.
trofozoítos móviles de -Solución verde jano.
parásitos intestinales, huevos -Aceite de inmersión
y quistes de otros parásitos, -Solución de levadura al 10%
hifas y levaduras de hongos -Solución salina al 0.9%
entre otros. -Agua destilada.

2. OBJETIVOS.
-Reconocer los diferentes
tipos de tinción celular.

4. PROCEDIMIENTOS.
PROCEDIMIENTO 1.
OBSERVACIÓN DE
CÉLULAS FÚNGICAS:
- HIFAS DE HONGOS
Con el asa bacteriológica
tomar una muestra de hifas
del hongo cultivado y colocar
sobre el portaobjeto. Agregar
una gota de solución salina
isotónica y observar al
microscopio.
- LEVADURAS
Tomar una muestra de la
solución de levadura, colocar
sobre un portaobjeto y
colorear con azul de metileno,
luego coloque un
cubreobjetos. Observar al
microscopio
PROCEDIMIENTO 2.
OBSERVACIÓN DE
CÉLULAS EPITELIALES
HUMANAS
Obtener una muestra del
epitelio bucal y hacer un
extendido de la muestra sobre
un portaobjeto, agregar sobre
el extendido una gota de
Verde Jano y dejar actuar el
colorante por 10 minutos;
luego colocar un cubreobjetos
sobre el preparado y observar
al microscopio con 400
aumentos. Las mitocondrias
se tiñen como minúsculos
puntitos verdes.
PROCEDIMIENTO 3.
OBSERVACIÓN DE
CÉLULAS VEGETALES
- LEUCOPLASTOS EN
PLÁTANO
Obtener una muestra de
leucoplastos en plátano verde,
para lo cual, cortar una rodaja
de plátano y con una cuchilla
realizar un raspado fino sobre
el corte recién hecho, colocar
la muestra obtenida sobre un
portaobjeto, agregar una gota
de agua y cubrir con un
cubreobjetos. Observar al
microscopio. Ahora, por el
borde del cubreobjetos
agregar una gota de solución
diluida de lugol (si la solución
de lugol está muy concentrada
la reacción será de color negro
impidiendo la observación).
Observar nuevamente.
- CLOROPLASTOS EN
HOJAS DE ELODEA
(Anachoris
canadienses)
Tomar una hoja de elodea,
colocar sobre un portaobjetos
y agregar una gota de agua
destilada, cubrir con un
 cubreobjetos. Observar al ayuda de un gotero, colocar
microscopio con mayor y una gota de solución diluida
menor aumento. de lugol en el borde del cubre
objetos, dejando que la
- NÚCLEOS EN solución entre al preparado
CÉLULAS DE por capilaridad.
CEBOLLA

Tomar una cascara de cebolla,

y con ayuda de un alfiler, PROCEDIMIENTO 4.
desprenda la epidermis de la OBSERVACIÓN DE
cara interna. Colocar este TEJIDO ADIPOSO
tejido epidérmico transparente
Tome una muestra delgada de
sobre un portaobjetos,
tejido graso animal, colóquela
extender evitando que se
sobre un portaobjetos y
formen arrugas, agregar una
observe al microscopio.
gota de agua y cubrir el
Luego agregue una gota del
preparado con una laminilla.
colorante sudan III, y observe
Observar al microscopio
al microscopio con 400
primero con menor aumento y
aumentos, luego observe con
luego con mayor aumento.
el objetivo de inmersión.
Esquematice sus
observaciones. Ahora con

5. RESULTADOS.

MUESTRA:
TECNICA DE COLORACION:
AUMENTO EMPLEADO: X =
(ocular) (objetivo) (total)
DESCRIPCION:

MUESTRA:
TECNICA DE COLORACION:
AUMENTO EMPLEADO: X =
(ocular) (objetivo) (total)
DESCRIPCION:
MUESTRA:
TECNICA DE COLORACION:
AUMENTO EMPLEADO: X =
(ocular) (objetivo) (total)
DESCRIPCION:

MUESTRA:
TECNICA DE COLORACION:
AUMENTO EMPLEADO: X =
(ocular) (objetivo) (total)
DESCRIPCION:

MUESTRA:
TECNICA DE COLORACION:
AUMENTO EMPLEADO: X =
(ocular) (objetivo) (total)
DESCRIPCION:
6. REGUNTAS DE ACTIVIDAD COMPLEMENTARIA

1. ¿Para qué son utilizados los colorantes vitales?

R/ Los colorantes vitales permiten observar movilidad, así como

algunos de sus orgánulos o inclusiones teñidas, sin daño aparente; estos
se preparan en soluciones acuosas o alcohólicas muy diluida

2. ¿Qué colorantes se emplean para hacer coloraciones simples?

R/ Los colorantes más utilizados son Azul de metileno, fuchsina, verde

malaquita, violeta de genciana, cristal violeta, verde janús y rojo fenol

3. ¿A qué se refiere una tinción negativa?

R/ La tinción negativa es un método de coloración especial para

destacar la presencia de la cápsula en algunos microorganismos —
principalmente Streptococcus pneumoniae, Klebsiella pneumoniae y
Cryptococcus

4. ¿Cómo actúa un colorante ácido y un colorante básico?

R/ son sales con el anión coloreado y la base incolora. Son derivados de

grupos sulfónicos, carboxilos o hidroxilos fenólicos. Tienen apetencia
por sustancias básicas, sobre todo estructuras proteicas localizadas en el
citoplasma celular y también por el colágeno de la matriz extracelular.
La unión es por atracción eléctrica. Son sales en las que la base,
normalmente una amina, aporta el color, mientras que la parte ácida es
incolora. Es decir, son colorantes catiónicos. Tienen apetencia por
sustancias ácidas del tejido como el ADN o ciertos componentes de la
matriz extracelular como los glucosaminoglucanos. La unión es por
atracción eléctrica. Así, ponen de manifiesto el núcleo y el ARN, sobre
todo el ARNr presente en los ribosomas por ser muy abundante, así
como ciertas matrices extracelulares ricas en componentes ácidos

5. De los colorantes empleados, ¿cuáles son ácidos y cuáles son

básicos?

R/ Ejemplos de colorantes básicos son el azul de metileno

6. ¿Cómo es la reacción de un colorante ácido y un colorante básico en
el proceso de tinción de las células?

R/ Colorantes básicos: la acción colorante está a cargo del catión,

mientras que el
anión no tiene esa propiedad.
La sustancia colorante está a cargo del anión, mientras que el catión no
tiene esa
propiedad.