ASIGNATURA:

MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA

TEMA:

PLASMODIUM

ALUMNA:

FLOR TORRES

DOCENTE:

DRA.THAYLANDIA RODRIGUEZ VILLAMAR

CURSO: 2-3

AÑO LECTIVO: 2021-2022 CI

 PRUEBAS DIAGNOSTICA

El diagnóstico puede considerarse como el más importante resultado de la

práctica médica, ya que su establecimiento conduce al tratamiento y al
pronóstico del padecimiento, mismo que resulta un problema complejo en ese
ejercicio de la clínica.

El diagnóstico se puede definir como una hipótesis acerca de la naturaleza de

la enfermedad de un paciente, que se deriva de observaciones a través del uso
de la inferencia. Varios autores reconocen que la presencia de una enfermedad
en un individuo a menudo no puede determinarse con certeza, agregan,
además, que el objetivo del médico no es alcanzar la certeza sino reducir el
nivel de incertidumbre lo suficiente como para tomar la decisión terapéutica.

El proceso general que da lugar al diagnóstico se realiza en dos etapas; en la

primera se establece una presuposición, sospecha o hipótesis de existencia de
la enfermedad. La segunda se dirige al seguimiento de la sospecha clínica y a
verificar si ésta corresponde a la realidad.

En este proceso, de enorme complejidad, existe un gran número de fuentes de

incertidumbre que transitan por una amplia gama de cuestiones, como son: que
el conjunto de síntomas y signos en un paciente puede ser compatible con más
de una enfermedad, que existen variaciones biológicas a veces importantes
entre un enfermo y otro, que los instrumentos suelen ser imprecisos, factores
inherentes a la experiencia, formación y la acuciosidad del médico, y que los
pacientes son inexactos para recordar sucesos pasados, entre otros.

Si bien la historia clínica dentro del acto médico es un elemento insustituible y

la base fundamental para instituir o descartar el diagnóstico de las
enfermedades y constituye el sustento principal para establecer su pronóstico y
tratamiento, es innegable que las pruebas de laboratorio y gabinete deben
considerarse como excelentes recursos de apoyo para el médico.

No obstante, es importante tener en mente que, si bien las diferentes fases por
las que pasa la relación entre médico y paciente, según el momento de la
atención, requieren de distintos matices durante el acto médico, el paciente
acude al médico solicitando remedio para su padecer, y muchas veces el
interés del médico se centra en el examen científico del proceso patológico, por
lo que la interacción y el vínculo pasan a un segundo plano, estableciendo una
relación con el paciente más como un “objeto de estudio” que como un ser
humano, lo cual distorsiona el verdadero sentido de esta relación.

RECOLECCION DE MUESTRAS

El primer paso para un excelente diagnóstico de la tuberculosis es la adecuada

recolección de las muestras biológicas a analizar. Obviamente "sin una buena
recolección no existirá un buen diagnóstico. "

Mycobacterium tuberculosis, puede ser aislada e identificada a partir de

cualquier órgano del humano. La muestra a utilizar va a depender del estado
patológico o del grado de tuberculosis que este presentando el paciente
durante la enfermedad. Por ejemplo, si un paciente con tuberculosis primaria
acude al laboratorio es lógico pensar en una muestra proveniente de las vías
respiratorias bajas, pero si acude un paciente con VIH, además se sospecha de
una septicemia, el hemocultivo es la muestra ideal para el aislamiento.

A menudo muchas de estas muestras vienen acompañadas de flora bacteriana,

y es preciso realizar un procedimiento de digestión-descontaminación previo al
cultivo microbiológico.

Las muestras mas comúnmente utilizadas dentro de un laboratorio clínico son:

 MUESTRAS RESPIRATORIAS.

a) Expectoración natural.

b) Expectoración inducida.

 HEMOCULTIVOS.
 MUESTRAS ESTERILES.

a) Muestras de líquido cefalorraquídeo (LCR).

b) Biopsias

 MUESTRAS DE ORINA
 MUESTRAS DE MATERIA FECAL.

MUESTRAS RESPIRATORIAS.
 Comúnmente en la mayoría de los laboratorios clínicos, las
m u e s t r a s r e c o l e c t a d a s d e l a s ví a s r e s p i r a t o r i a s s o n l a s m u e st r a s
de esputo por expectoración. Este tipo de muestra es la más
común y la más efectiva para las baciloscopias. La mejor
o b t e n c i ó n p a r a e st e t i p o m u e s t r a s s o n a q u e l l a s e n l a s q u e e l
paciente deposita la primera expectoración inmediatamente
después de levantarse, la muestra debe provenir del árbol
bronquial obtenida inmediatamente después de un esfuerzo de tos
y no la obtenida por aspiración y secreciones nasales y de saliva.
Se sabe que es en la mañana cuando las micobacterias están en
su más alta concentración en el esputo.

EXPECTORACIÓN NATURAL.

Indicaciones.

1 . E l e n v a s e e n d o n d e s e d e p o s i t a r a l a m u e st r a d e b e s e r : d e
plástico de boca ancha, tapa de rosca, con una capacidad de 50 a
6 0 m L , d e p a r e d l i s a y t r a n s p a r e n t e.

2. Etiquetar el envase con el nombre del paciente, fecha de

r e c o l e c c i ó n , d i a g n o s t i c o o c o nt r o l d e t r at a m i e n t o y e l n u m e r o d e l a
m u e s t r a.

3. Indicar al paciente que se enjuague la boca con agua para

eliminar residuos de comida.

4 . I n d i c a r l e a l p a c i e n t e q u e n o e s c u p a s u s s e cr e c i o n e s s a l i v a l e s
en el envase, y dejar claro que la muestra de esputo debe
p r o v e n i r d e l a s p r of u n d i d a d e s d e l p e c h o : , i n d i c a r l e l o s s i g u i e n t e s
pasos para la expectoración:
1)Respirar p r of u n d a m e n t e
2)Retener el aire
3) Lanzar violentamente el esputo al envase.

* NOTA. La liberación irregular e intermitente de micobacterias

e n l a l u z b r o n q u i a l pr o v e n i e n t e s d e l a s u l c e r a s d e l a m u c o s a o d e
las cavidades loculadas a menudo da como resultado un patrón
v a r i a b l e d e r e c u p e r a c i ó n a p a r t i r d e l a s s e cr e c i o n e s r e s p i r a t o r i a s ,
p o r e l l o , c o m o a c o nt i n u a c i ó n d e d e s c r i b e , e s p r e c i s o i n d i c a r l e a l
paciente que repita la operación anterior tres veces
 inmediatamente después de haber expectorado las primera
muestra de esputo en el envase.

5. Ya obtenida la expectoración, esta debe ser muco purulenta

para asegurar que la recolección fue exitosa. Si en la muestra, se
o b s e r v a p r i n c i p a l m e n t e s a l i v a o s e cr e c i ó n n a s a l , l a m u e st r a n o s e
procesa, y se solicita una nueva recolección de muestra de esputo
al paciente. Preferentemente la muestra obtenida deberá ser de 3
a 5 m l.

   

   

   

6. Inmediatamente después de haber obtenido la primera

m u e s t r a, s e d e b e e n t r e g a r a l p a c i e n t e d o s r e c i p i e n t e s m a s
mencionándole las anteriores indicaciones, para que realicé una
segunda y tercera recolección.

* NOTA. Es preciso realizar

l a s t r e s t o m a s d e m u e s t r a c om o s e i n d i c o a n t e r i o r m e n t e , d e e st a
manera la probabilidad de realizar un buen diagnostico por
b a s i l o s c o p i a s er á m a y or . N o h a y q u e c o n f u n d i r l a t om a d e m u e s t r a
d e e s p u t o e n : " 3 t o m a s " c o n e l m u e st r e o a n t i g u o d e 2 4 h o r a s , y a
que el muestreo durante 24 horas se trataba de una recolección
continua.

EXPECTORACIÓN INDUCIDA.

Este tipo de muestra clínica generalmente se obtiene cuando el

p a c i e n t e n o p u e d e e x p e c t or a r d e f or m a n a t u r a l . E s t a e s r e a l i z a d a
por el médico en el consultorio, y no en el laboratorio

OBTENCIÓN POSTURAL.

1. Se acuesta al paciente boca abajo sobre una camilla,

haciendo que su cabeza rebase el borde.

2. Se coloca una almohada debajo de su tórax, logrando un

plano inclinado facilitando el descenso de la secreción.
 3 . I n d i c a r l e a l p a c i e n t e q u e i n s p i r e p r o f u n d a m e n t e , r et e n g a e l
a i r e y d e s p u é s l o e x p u l s e v i o l e n t a m e n t e h a st a c o n s e g u i r l a
expectoración.

   

NEBULIZACION.

La nebulización es el método de administración de

medicamentos suministrados al paciente a través de vapores
inhalados.

  L a n e b u l i z a c i ó n e s u n o d e l o s pr o c e d i m i e n t o s m á s ef i c a c e s p a r a
administrar sustancias broncodilatadoras. Todas las soluciones
broncodilatadoras son concentradas, de alto peso molecular con
elevado contenido de solutos. Al diluirlos en solución isotónica
disminuye su concentración y así se obtienen partículas de muy
p e q u e ñ o t am a ñ o q u e l l e g a n a l o m á s p r o f u n d o d e l p u l m ó n .

Procedimiento Para los pacientes que no puedan expectorar

de manera natural:

1. Se nebuliza en la garganta con vapores de agua simple

2. Los vapores de agua, provocan la expectoración de esputo

p r o v e n i e n t e d e l a s ví a s r e s p i r a t o r i a s i n f e r i o r e s .

3. Se recoge la primera expectoración producida después de la

nebulización, y se entriegan al paciente 2 recipientes para recoger
otra muestra de esputo por nebulización en las 24 horas
siguientes o bien por expectoración natural.

  LAVADO BRONQUIAL.

El lavado bronquial es realizado solamente por un médico, y

puede realizarse por medio de una sonda o broncoscopio. Al
o b t e n e r l a m u e s t r a , e st a e s p r o c e s a d a e n e l l a b o r a t o r i o .

HEMOCULTIVOS.

En general en los hemocultivos es mas común el aislamiento

de Mycobacterium avium-intracelullare  que el Mycobacterium
tuberculosis, ya que este cursa con cortos períodos de septicemia
a ú n e n p a c i e n t e s c o n S I D A . A u n a sí l a p o s i b l e s e p t i c e m i a
por Mycobacterium tuberculosis  es posible.

 
RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA.

1 .   M ét o d o d e o b t e n c i ó n

 L a m u e st r a d e b e o b t e n e r s e p o r p u n c i ó n p e r i f é r i c a
(Venosa o arterial).
 Una aguja por punción.
 S i e x i s t e i n d i c a c i ó n d e ot r o s e x á m e n e s , l a t o m a d e l
h e m o c u l t i v o d e b e s e r l a pr i m e r a e n r e c o l e c t a r s e .

Volumen de la muestra.

 L ó g i c a m e n t e e l v o l u m e n d e l a m u e st r a o b t e n i d a p o r
hemocultivo, es considerablemente importante para tener
una mayor sensibilidad de aislamiento.

 La cantidad obtenida deberá de ser de 1:4 a 1:10 entre

la muestra y el volumén de medio de cultivo.

 U n p a r á m e t r o u t i l i z a d o e n l o s h e m o c u l t i v o s d e f or m a
automatizada, es un volumen mínimo de: 10 ml para adultos,
1 a 2 ml en niños recién nacidos, 2 a 3 ml para lactantes de
1 mes a dos años, 3 a 5 ml para niños mayores de 2 años y
10 ml para adolescentes.

SISTEMAS DE HEMOCULTIVOS.

P a r a l a o b t e n c i ó n d e u n a m u e s t r a p o r h e m o c u l t i v o , e st a s s e
p u e d e n c l a s i f i c a r e n t r e s s i s t e m a s d i f e r e n t e s:

A) Sistemas de hemocultivos manuales

B) Sistema de hemocultivos semi automatizados

C) Sistema de hemocultivos automatizados.

A ) . Si s t e m a d e h e m o c u l t i v o s m a n u a l e s .

 E l m e d i o d e c u l t i v o c o n v e n c i o n a l c o n t i e n e 0, 0 2 5 a 0 , 0 5
% de polianetol sulfonato de sodio como anticoagulante,
p a r a l a i n h i b i c i ó n b a c t e r i c i d a d e l s u e r o a n t e l a b a c t er i a , e s
también: inactivador del complemento, y de la fagocitosis.
ESTE TI P O D E H E M O C U L T I V O S N O S O N E M P L E A D O S
PARA EL CULTIVO DE MICOBACTERIAS.
B). Si s t e m a s de hemocultivos semiautomatizados ( L i si s -
Centrifugación).

• Este sistema consiste en un tubo de lisis. El cual, además de

c o n t e n e r p o l i a n e t o l c o m o a n t i c o a g u l a n t e , c o n t i e n e s a p o n i n a c om o
a g e n t e l í t i c o d e e r i t r o c i t o s , l e u c o c i t o s y m a cr ó f a g o s .

• Al someter el tubo a una centrifugación a alta velocidad,

provoca la concentración de micobacterias en el sedimento.

• E l s e d i m e n t o e s s e m b r a d o e n c u l t i v o s e s p e c í f i c o s c o m o:
L o w e n s t a i n j e n s e n , M i d d l e b r o o k 7 H 1 1 , e t c. .

• Este sistema es el de elección para el cultivo de

m i c o b a c t e r i a s , s i n e m b a r g o, p u e d e u t i l i z a r s e p a r a e l d i a g n o s t i c o d e
otras bacterias patógenas.

* NOTA. Para el cultivo de micobacterias, es lógico diferenciar entre

un sistema de hemocultivo convencional al de un sistema de
hemocultivo de lisis-centrifugación, ya que este ultimo posee la
capacidad de r e v e nt a r o lisar a las células y dejar que la
m i c o b a c t e r i a i n t r a c e l u l a r q u e d e l i b e r a d a , y a sí , o b t e n e r u n m a y o r
porcentaje de cultivos positivos.

TRANSPORTE

El transporte de muestras de material biológico dentro de un

hospital o centro, de un centro de salud a un hospital, de un
laboratorio a otro, de un hospital a otro dentro de la misma ciudad o
a otra ciudad se deben gestionar por el propio hospital, por el
servicio de salud o por cualquier organización de transportes o
agencia que haya sido autorizada. España ha adoptado las
r e c om e n d a c i o n e s d e s c r i t a s p o r N a c i o n e s U n i d a s e n l o r e l a t i v o a l
t r a n s p o r t e d e s u st a n c i a s i n f e c c i o s a s . L a m a l a r i a o p a l u d i s m o af e c t a
cada año a unas 200 millones de personas. A día de hoy, más de la
m it a d d e l a p o b l a c i ó n m u n d i a l e st á e x p u e s t a a e s t a d e v a s t a d o r a
enfermedad que cada año cuesta la vida a más de medio millón de
personas. Según datos de la OMS, es la séptima causa de muerte
en los países de bajos ingresos y supone el 15% de las muertes de
niños menores de 5 años.

CONSERVACIÓN DE LA MUESTRA HASTA SU PROCESAMIENTO

M e di o s d i s p o n i b l e s , t e m p e r a t u r a y t i e m p o
De f or m a general, las muestras recogidas para estudios
microbiológicos deben enviarse lo más rápidamente posible al
l a b o r a t o r i o d e M i c r o b i o l o g í a . S e p o d r á n t r a n s p o r t a r a t e m p e r a t ur a
a m b i e n t e s i n o s e d e m or a s u e n v í o t r a s s u o b t e n c i ó n , a u n q u e
a l g u n a s r e q u e r i r á n h i e l o p a r a s u t r a n s p o r t e. E n e l c a s o d e q u e n o
puedan transportarse inmediatamente, se podrán seguir las
siguientes recomendaciones generales, aunque con excepciones:
p a r a e st u d i o s d e m i cr o b i o l o g í a m o l e c u l a r , v i r u s o m i c o b a c t e r i a s ,
r ef r i g e r a r las m u e st r a s ( 2- 8 ° C ) las muestras con solicitud de
p a r á s i t o s s e m a n t e n d r á n a t em p e r a t u r a am b i e n t e , e x c e p t o e l t u b o
de sangre con EDTA que si no se procesa en 1h se mantendrá en
n e v e r a p a r a e l r e s t o d e e st u d i o s s e m a nt e n d r á n r e f r i g e r a d a s l a s
m u e st r a s de orina, heces, c a t é t er e s , abscesos, heridas,
quemaduras, biopsias, tejidos, exudado vagino-rectal de las
e m b a r a z a d a s , a s p i r a d o g á s t r i c o , o í d o e x t e r n o, m u e s t r a s d e o r i g e n
r e s p i r a t or i o y a l g u n o s t i p o s d e e x u d a d o s y l í q u i d o s b i o l ó g i c o s
(según la petición) si el procesamiento no se realiza en las primeras
2 h y s e c o n s e r v a r á n a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e l a s m u e st r a s d e
sangre, médula ósea, LCR, muestras genitales con sospecha de
i n f e c c i ó n b a c t e r i a n a d e t r a n sm i s i ó n s e x u a l , e x u d a d o c o n j u n t i v a l y
f ar í n g e o , r a s p a d o c o r n e a l , h u m or v í t r e o , o í d o i n t e r n o , a s p i r a d o
nasofaríngeo, piel, pelo y uñas.

Existen b a ct e r i a s que son especialmente sensibles a las

condiciones ambientales: Shigella spp, N. gonorrhoeae, Neisseria
meningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pneumoniae y
las bacterias anaerobias; la detección fiable de estas especies
requiere un procesamiento inmediato.

PROCESAMIENTO DE LAS MUESTRAS

El laboratorio debe establecer un sistema de priorización en el

p r o c e s a m i e n t o d e l a s m u e s t r a s , e n f u n c i ó n d e cr i t e r i o s p r e v i a m e n t e
definidos (demanda del clínico, carga asistencial y asistencia
continuada), aunque es obvio decir que cualquier muestra requerida
d e f o r m a ur g e n t e t i e n e q u e t e n e r u n p r o c e s a m i e n t o i n m e d i a t o y q u e
todas las muestras deben procesarse en cabinas de bioseguridad.

D e m a n e r a g e n e r a l , s i e m p r e s e d e b e n pr o c e s a r p r i m er o ( e n 2 0 m i n
tras su recepción) los LCR, las muestras de líquidos y cavidades
e s t ér i l e s , las m u e st r a s quirúrgicas y las pruebas rápidas de
detección antigénica, en e st e orden. A e st e grupo le siguen
m u e st r a s c o n u n t i e m p o l i m i t a d o d e p r o c e s a m i e n t o , c o m o s o n e l
c u l t i v o d e m i c o b a c t e r i a s o l a s pr u e b a s p a r a d e t e c c i ó n d e á c i d o s
nucleicos, las muestras de tejidos o aspirados recientes (en una
hora tras su recepción) y las muestras respiratorias (pueden
permanecer 1 h a temperatura ambiente y 2 h si se conservan a 4°C
sin que pierdan viabilidad los microorganismos, excepto el lavado
b r o n c o a l v e o l a r , q u e s e d e b e pr o c e s a r e n l o s p r i m e r o s 2 0 m i n t r a s
s u r e c e p c i ó n ) . L a s m u e st r a s d e h e c e s d e b e n e n v i a r s e e n m e d i o d e
transporte si el procesamiento no puede realizarse en un periodo de
t i e m p o e nt r e 3 0 m i n y 1 h . P o r ú l t i m o , s e s e m b r a r á n l a s o r i n a s
(pueden conservarse hasta 8h a 4°C) y las torundas con medio de
transporte. Los hemocultivos pueden mantenerse a temperatura
ambiente hasta 4 h tras su recepción.

Procesamiento convencional: cultivo

Dentro del procesamiento convencional de las muestras que llegan

a l l a b o r a t o r i o d e M i cr o b i o l o g í a , s e p u e d e n e s t a b l e c e r 4 f a s e s b i e n
diferenciadas que deben realizarse siguiendo este orden:

Fase de p r et r a t a m i e n t o : cuando e st a sea necesaria, existen

d i s t i n t a s t é c n i c a s c o m o l a c e n t r i f u g a c i ó n ( lí q u i d o s e s t é r i l e s ) , l a
h o m o g e n i z a c i ó n ( b i o p s i a s y t e j i d o s ) o l a s o n i c a c i ó n ( p r ót e s i s ) , q u e
se aplicarán dependiendo del tipo de muestra y de la solicitud
realizada.

Inoculación de los medios de cultivo: la siembra manual se realizará

utilizando la técnica de aislamiento para la mayoría de las muestras
y la técnica de recuento para aquellas que necesitan un recuento de
c o l o n i a s ( p . e j . , o r i n a ) . E s n e c e s a r i o p r o c e s a r p r i m e r o l a s m u e st r a s
para anaerobios y se aconseja inocular primero los medios menos
selectivos para evitar que se arrastre alguna sustancia inhibitoria a
otro medio. Los medios se seleccionarán según el tipo de muestra y
la sospecha diagnóstica del posible agente causal a detectar1
( b a ct e r i a s , a n a e r o b i o s , h o n g o s , e t c . ) .

P r e p a r a c i ó n d e l a s e x t e n s i o n e s : e s n e c e s a r i o r e a l i z a r e xt e n s i o n e s
p a r a t i n c i ó n d e G r a m d e l a m a y or í a d e l a s m u e s t r a s, i n c l u y e n d o
m u e st r a s r e s p i r a t or i a s , e x u d a d o s d e h e r i d a s , a b s c e s o s , m u e s t r a s
de orígenes normalmente estériles y según petición, muestras de
o r i n a y g e n i t a l e s . E n e l c a s o d e l í q u i d o s e st é r i l e s , e n e s p e c i a l e l
L C R , s e r e c om i e n d a c i t o c e n t r i f u g a r l a m u e st r a p a r a p r e p a r a r l a s
e x t e n s i o n e s ; e n c a s o d e m u e st r a i n s u f i c i e n t e , s e p r i o r i z a r á e l
cultivo sobre la tinción

Finalmente, la incubación que se puede realizar en distintas

atmósferas: aerobiosis, para la mayoría de los microorganismos y
medios de Agar sangre y MacConkey, enriquecida con un 5-7% de
CO2 para los medios de agar chocolate y Thayer-Martin,
m i c r o a e r of í l i c a p a r a e l a i s l a m i e n t o d e C a m p y l o b a c t e r s p p . y H .
pylori y anaerobiosis para búsqueda de anaerobios y medios agar
Brucella, agar lacada vancomicina kanamicina (ASKVL) y agar
bacteroides bilis esculina (BBE).

E n c u a n t o a l a s t e m p e r a t u r a s, a u n q u e l a m a y o r í a d e l o s c u l t i v o s
b a c t e r i a n o s s e i n c u b a n a 3 5 ° C - 3 7 ° C ( t e m p e r at u r a e st a b l e c i d a e n l o s
e q u i p o s a u t om a t i z a d o s ) . A l g u n a s e x c e p c i o n e s l a s c o n s t i t u y e n l a s
m u e st r a s en las que se sospecha Mycobacterium marinum,
Mycobacterium ulcerans, Mycobacterium chelonae y Mycobacterium
haemophilum, que crecen entre 35° y 33°C. Para el aislamiento de
Campylobacter spp. se requiere una incubación de 42°C y 35°C
( C a m p y l o b a c t e r f e t u s) , y l o s h o n g o s h a b i t u a l m e n t e s e i n c u b a n a
30°C10.