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Muestras del aparato respiratorio

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Recogida, preparación y conservación de muestras del aparato respiratorio
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Recogida, preparación y conservación de muestras biológicas humanas

1 Exploración de la función respiratoria: 1.1 Espirometría forzada: Es una técnica de exploración que se basa en realizar una espiración con máximo esfuerzo y rapidez, partiendo de una situación de máxima inspiración. Hay que medir una serie de parámetros, los más destacados son: • FVC, capacidad vital forzada, es el volumen total espirado • FCE o VENS, volumen espirado en el primer segundo Con los dos parámetros se establece un cociente FVC/FVE, se le llama índice de Tifenall. Esta prueba orienta sobre el tipo de patología del aparato respiratorio, es un aprueba frecuente en el chequeo del aparato respiratorio, permite diferenciar entre una patología obstructiva o restrictiva. La obstructiva se reduce el FVC y el FVE, por tanto se encuentra disminuido el índice de Tifenall, en la restrictiva se encuentra reducido el FVC, pero el FVE no tiene porque estar disminuido, así el índice de Tifenall puede estar normal o elevado. 1.2 Gasometría arterial: Indicaciones de la gasometría: La finalidad es determinar la presión parcial de O2, CO2 y el pH, es fundamental para realizar estudios y controles de enfermedades respiratorias. Hay 4 indicaciones básicas para hacer la gasometría: 1. En toda persona que se sospeche que tenga una insuficiencia respiratoria 2. Para controlar a pacientes que tengan alteraciones restrictivas 3. En caso de que haya alteraciones obstructivas graves 4. En los estudios preoperatorios de pacientes del aparato respiratorio

Se suele hacer la punción en las arterias cubitales, media, humeral y también en la femoral. Los pasos son los siguientes: 1. Se identifica la arteria por palpación 2. Se desinfecta la zona de punción 3. Se introduce la aguja en vertical, montada sobre una jeringa de cristal, tiene que llevar heparina 4. Una vez dentro de la arteria el émbolo de la jeringa sube, y sale la sangre debido a la presión que tiene la arteria. 5. Se retira todo el mecanismo montado y se le coloca un corcho 6. Puede ocurrir que entre aire, hay que quitarla inmediatamente 7. Este examen hay que realizarlo inmediatamente, en 10- 15 min., y se aconseja que desde el punto de extracción al laboratorio se lleve la muestra en un baño de hielo. 8. Cuando se retira la aguja hay que hacer una presión sobre la zona durante unos 5 min., para evitar que se formen hematomas serios. A veces se coloca un saquito con arena para provocar presión. Los valores normales que se deben conseguir de pO2, va a variar si es una persona joven o mayor, en personas jóvenes la pO2 es mayor que en personas mayores y varones. 2 Estudio de esputo: 2.1 Técnica de obtención: El esputo es una secreción del árbol bronquial y de las vías aéreas altas, se define como una mezcla de secreciones del árbol respiratorio. Básicamente se compone de secreciones formadas por plasma, agua, electrolitos y moco. También forman parte del esputo secreciones nasales y salivares, células exfoliadas del árbol traqueobronquial, la faringe y boca, también forman parte de eso moco microorganismos saprofitos (que normalmente no causan secreción) que suelen proceder de la boca. En condiciones normales el árbol traqueobronquial segrega aproximadamente 100 ml. diarios de secreción. La recogida se hará preferiblemente por la mañana, se procurará que la persona este en
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ayunas desde la noche anterior, se hace por la mañana porque el cambio de postura favorece la movilización de la secreción. Antes de expectorar se deben seguir estas pautas: 1. Cepillado de encías, boca y lengua con un cepillo de dientes y agua para eliminar residuos de la boca. 2. Se aconseja realizar gargarismos y enjuagues de la boca para eliminar residuos que están en la rinofaringe. 3. Una vez hecho lo anterior, el paciente realizará inhalaciones profundas y toserá enérgicamente intentando traer el esputo de la traquea y de los bronquios. Para recoger la muestra tiene que ser recogida en un frasco estéril, a veces es necesario recoger varias muestras a distintas horas, cada una de ellas en recipientes distintos. Si no va a ser analizado inmediatamente hay que conservarlo en frigorífico Para algunos estudios como hongos y mycobacterias (bacterias ácido- alcohol resistentes), es preciso una muestra de 3 días consecutivos. Si se quiere hacer el estudio citológico, si la muestra no se puede enviar directamente al laboratorio necesitamos fijar la muestra, se fija utilizando alcohol de 50º. En muchas ocasiones los pacientes tienen dificultad para expectorar, en esos casos se puede proceder a estimular la salida de esputo, puede ser por medios físicos, aplicando técnicas de percusión porque se hace vibrar la pared torácica. Otra forma es por medios químicos, consiste en la aplicación a nivel de la traquea o el árbol bronquial de partículas salinas mediante nebulización, consiste en combinar la solución de agua con sal con aire para crear partículas muy pequeñas, esto provoca un aumento de la secreción bronquial y una mayor facilidad para que aparezca el esputo. 2.2 Procesamiento: Al laboratorio llega la muestra y se siguen las siguientes pautas: 1. Se hace el registro e identificación de la muestra. 2. Se deposita la muestra en una caja de Petri, se realiza un análisis macroscópico. Se registran las características organolépticas para distinguir los distintos tipos de esputos: mucoso, purulento, mucopurulento, herrumbroso

(color ferroso), etc. En la observación macroscópica se pueden detectar fragmentos, coágulos de sangre… 3. Realización de extensiones y fijaciones, se coge una cantidad pequeña, se deposita en un porta y se extiende con otro porta para obtener una peliculita. Una vez realizada la extensión se introduce en alcohol 96º durante mínimo 30 min. 4. Tinción y montaje de las extensiones, una vez fijadas se hace la tinción, una de las más utilizadas es la tinción de papanicolau, es una tinción especial para citología. Para bacterias se utiliza la tinción de Baar. Hecha la tinción se coloca un cubre, evitando que queden burbujas y se observa. 2.3 Examen físico y características organolépticas: En condiciones normales el esputo está compuesto por las siguientes sustancias químicas: • 95 % H2O • 5% de hidratos de carbono, lípidos y ácidos nucleicos, y sobre todo ADN. La consistencia que tenga depende de la cantidad de agua (%) y también del % de glicoproteínas. Además en el esputo aparecen células como leucocitos, macrófagos y células epiteliales. Cantidad de esputo: • La secreción traqueotomial tiene que aumentar en más de 100 ml. para producir expectoración • Se considera que hay una expectoración escasa cuando la secreción no es superior a 400 ml. • La expectoración se considera abundante cuando es mayor de 500 ml. las 24 horas. • Se considera crónica cuando se expectoran cantidades excesivas, abundantes y suelen ser una expectoración purulenta. Color: • Incoloro, tipo saliva, aparece en procesos inflamatorios leves pero no infecciosos y suele producirse por un trasudado bronquial. • Blanco, tiene gran cantidad de moco y suele aparecer en procesos catarrales. • Amarillo- verdoso, es indicativo de pus, indica la presencia de infecciones bacterianas.
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Grisáceo, típico de abscesos pulmonares y tiende a tener muy mal olor. • Herrumbroso, con un color parecido al óxido, aparece en algunas patologías como por ejemplo en neumonías neumocócicas o en casos de infarto pulmonar. • Polvo de ladrillo, es indicativo de un tipo de bacilo determinado llamado “Fried Lander” • Hemático, hay presencia de sangre en el esputo y puede tener distintas características: 1. Rojo puro: presencias de sangrado “hemoptisis” 2. Rojo, color mermelada: puede indicar cáncer broncopulmonar 3. Rosado con espuma: tiene aire, indica edema de pulmón 4. Achocolatado, muy marrón: aparece en los casos de absceso pulmonar por una complicación hepática Sabor: • Sabor salado: en casos de bronquitis aguda • Sabor amargo: en casos en los que hay procesos hepáticos 2.4 Examen microscópico en fresco: En este examen se pueden observar unas fibrillas incoloras con doble contorno, sus extremos aparecen como doblados. Si aparece esto es indicativo de que puede haber un proceso que destruye el tejido pulmonar. También pueden aparecer cristales, por ejemplo de oxalato cálcico, fosfato amónico, Charcot- Leyden (son los cristales más característicos, tienen forma alargada y se originan cuando se degradan las granulaciones de los leucocitos al haber infecciones). 2.5 Estudio citológico: Para poder observar bien las células se necesita que antes se tomase bien la muestra y que esta sea fresca, sino las células se rompen. En estos casos es preferible obtener la muestra por una técnica determinada llamada broncoscopia La técnica sería la siguiente: 1. Dilución con solución salina fisiológica 2. Centrifugar 3. Cogemos el sedimento (unas gotas) 4. Colocamos esas gotas en un porta obteniendo una gota fina muy uniforme

5. La fijamos con alcohol 95º más éter 6. Procedemos a su Juan Carlos Vázquez Ucha 1º LAC Ánxel Casal A Coruña coloración 7. Observamos al microscopio en lo que podemos encontrar lo siguiente • Células faríngeas: Son grandes, ovaladas o poliédricas, con un núcleo muy pequeño que se tiñe de violeta claro. • Células bronquiales: son células alargadas, en uno de los extremos aparecen como unos cilios que vibran, núcleos grandes los cuales se tiñen de violeta rojizo y el citoplasma de violeta claro. • Macrófagos: son células grandes y redondas que a veces se colorean de violeta. • Neutrófilos: suelen ser de origen alveolar, y sobre todo si es purulento. • Linfocitos: aparecen muchos en la fase precoz de la tuberculosis. • Eosinófilos: cuando hay cuadros alérgicos de tipo asmático. • Células neoplásicas: son células tumorales, de tamaño más grande, tienen varios núcleos, muchas células, se agrupan demasiado, cuanto más raras son más grave es el cáncer. 2.6 Estudio bacteriológico: Para el diagnóstico de infecciones del aparato respiratorio se utiliza sobre todo dos tipos de tinción: Gram y Baar (ácido- alcohol resistente) 2.7 Estudio bioquímico e inmunológico: En condiciones normales en el esputo hay H2O, sales y enzimas, estos aparecen como consecuencia de la degradación de leucocitos. Aparecen las proteínas pero no aparece la albúmina y tampoco el fibrinógeno a no ser que sea un caso de bronquitis aguda. En caso de asma o bronquitis aparecen inmunoglobulinas. 2.8 Cuerpos asbestósicos: Es un mineral que se usa para fabricar amianto, que es un material aislante térmico.
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El amianto suelta un polvo en el cual va el asbesto, el cual entra en el aparato respiratorio. Si esto ocurre puede producirse asbestosis que es un cuadro similar a silicosis. Esta es una enfermedad que puede tardar años en aparecer y que se caracteriza porque en el esputo aparecen macrófagos en el interior de estos cuerpos ferruginosos. 3 Otras exploraciones: 3.1 Fibrobroncoscopia: Es una técnica endoscópica realizada con un broncoscopio flexible, que es un instrumento que puede ser introducido hacia el interior de los bronquios para poder observar su interior. Un fibrobroncoscopio flexible es un tubo flexible de 5 mm., que a través de fibra óptica nos va a permitir ver la luz bronquial. Una broncoscopia con un broncoscopio rígido es exactamente la misma técnica, pero la sonda es con un tubo rígido, muchas veces tiene en su extremo como un canal que sirve para aspirar secreciones. Otras veces en ese canal se pueden insertar pinzas para poder extraer muestra, esta técnica es para personal adiestrado, la introducción de esa sonda a veces se hace por vía bucal o por vía nasal, muchas veces se hace bajo control radiológico. Esta prueba se puede hacer con fines diagnósticos, sobre todo para confirmar diagnósticos sospechosos de cáncer pulmonar y también cuando se observan imágenes radiológicas con causas desconocidas. Otras veces la prueba se hace con fines para controlar la eficacia terapéutica o con fines terapéuticos, incluso para eliminar cuerpos extraños.
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3.2 Biopsia bronquial: Consiste en extraer un trozo de tejido de los bronquios y eso se puede hacer llevando un fibrobroncoscopio hasta el bronquio, en el canal se insertan unas pinzas de biopsia y se recoge la muestra. 3.3 Broncoaspirado: Consiste en introducir en el interior del bronquio una cantidad 3 que oscila entre 5-10 cm de solución salina, inmediatamente se hace una aspiración, con esa aspiración vendrán células que servirán para analizar que se desprenden de la pared bronquial. 3.4 Cepillado bronquial: A través de un broncoscopio se introduce un cepillo y se va haciendo un cepillado de las paredes del bronquio, luego se introduce una solución salina y se aspira, por el cepillado de la pared se obtienen células bronquiales. 3.5 Biopsia transbronquial: Se hace a través del bronquio pero la lesión es pulmonar, la muestra se extrae del pulmón que se va a analizar. 3.6 Lavado broncoalveolar: En los procesos broncoalveolares se introduce entre 100150 ml. de suero fisiológico y posteriormente se aspira, se obtiene así muestras del alveolo. 4 Líquido pleural: El objetivo de este líquido es evitar el roce de las hojas de la pleura, este líquido se produce a expensas del plasma, se trata de un ultrafiltrado de plasma que se realiza a través del endotelio capilar de las hojas pleurales. En su formación intervienen varios factores, la presión oncótica (presión debida a las proteínas), la permeabilidad capilar, el drenaje linfático. El volumen de ese líquido pleural es de unos 10 ml., en condiciones normales se caracteriza porque no hay fibrinógeno, la concentración de proteínas es de 1g./ 100 ml. Cualquier desequilibrio que ocurra en los factores que intervienen en su producción

puede dar lugar a un exudado o a un trasudado, cuando la cantidad de líquido pleural es mayor a 10 ml. se dice que hay un derrame pleural, y estos derrames pueden ser clasificados de dos formas, puede ser un derrame que sea un exudado o un trasudado. Un exudado aparece en los siguientes casos: cuando hay un aumento de la permeabilidad capilar, cuando hay una disminución de la reabsorción linfática. Los trasudados se producen cuando hay un aumento de la presión capilar o que disminuye la presión oncótica de las proteínas. Causas del derrame: Neoplasias, infección (por ejemplo neumonías), puede ser producido por un traumatismo, enfermedad reumatoidea, pancreatitis. Toracocentesis o punción transtorácica Consiste en una técnica para la obtención de líquido pleural, es una técnica sencilla pero necesita ciertos cuidados, control radiológico, la punción se realiza con el paciente sentado, se hace una infiltración anestésica local, se introduce una aguja gruesa y larga en la cavidad pleural con un sistema que sirve para dirigirla (fiador) porque la aguja tiene que primero atravesar la pared torácica, músculos, y luego encuentra una resistencia que es la cavidad pleural. Cuando se encuentra dentro de la cavidad se aspira líquido evitando que entre aire, no todas las muestras son iguales y los líquidos densos con pus son más difíciles de extraer. El proceso de recogida tiene que ser en condiciones asépticas. La muestra se reparte en tubos para hacer distintos estudios, puede ser que el líquido sea un líquido hemorrágico y se le llama un hemotórax, si es lechoso porque tiene contenido linfático se le llama quilotórax. En el hemotórax hay que comprobar si viene manchado con sangre (rotura de un capilar) o viene con sangre. Si es debido a rotura de un capilar al ir extrayendo el líquido va a ir

clareando, si es que la pleura ya contiene sangre se mantiene durante toda la extracción el mismo tono. Examen macroscópico: En condiciones normales se caracteriza porque es amarillo pálido y transparente, si el líquido es turbio es que hay presencia de leucocitos, que indican que tiene un origen inflamatorio que puede ser que sea infeccioso o no. Otras veces tiene aspecto lechoso, quiloso, aún así hay dos casos, quiloso verdadero o pseudoquiloso. Quiloso verdadero, se produce por una fuga de contenido torácico hacia el espacio pleural y si es pseudoquiloso se origina por una ruptura de grasas que están en las células. Puede haber un derrame sanguíneo, hemotórax, su causa más frecuente es por un traumatismo o también puede aparecer si hay un tumor. Muchas veces la extracción de líquido pleural es hemorrágica pero debida a la toracocentesis porque se pudo romper un vaso sanguíneo y al aspirar sale sangre, pero eso no tiene significado patológico y se distingue que la sangre es producida por la punción cuando la salida de líquido se produce con aclaramiento. Examen bioquímico: Se considera que el líquido pleural es un trasudado cuando la concentración de proteínas es menor de 3g./ 100ml. y la densidad es menor de 1,018g./cm3. El exudado es al contrario que el trasudado. Hay otros parámetros bioquímicos: hay 2 enzimas para diferenciar exudado de trasudado, la amilasa suele estar alta en los casos de exudado, en trasudado casi no varía. La otra enzima LDH (lactato deshidrogenasa), en los trasudados la relación que hay entre el LDH del

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líquido pleural y la LDH del suero es menor de 0,6 y para el exudado es mayor de 0,6. Puede interesar hacer un análisis bacteriológico, la infección que ocurre en esta zona anatómica es secundaria, aparece a consecuencia de otra patología, las causas pueden ser indirectas, la infección llega a la pleura por alguna vía que está en contacto con la pleura, A través del mediastino si hay una perforación, mediastinitos, o si hay una afectación de la pared torácica. Otras causas pueden ser directas, por ejemplo un traumatismo punzante, por ejemplo un navajazo o al realizar una toracocentesis sin la asepsia adecuada, por vía sanguínea al llegar los gérmenes a la pleura desde la sangre. La muestra la debemos de recoger en condiciones estériles utilizando tubos especiales, a veces manteniendo condiciones anaerobias, además se aconseja que se centrifugue la muestra unos 20 min. A 1500 rpm., si es muy líquida, si tiene aspecto muy purulento no se centrifuga. Además se suelen hacer cultivos y se tiñe con Zhiel y con Gram.
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