Tinción gram.
Fue desarrollada por el científico danés Hans Christian Gram
en1884, Es un procedimiento de gran utilidad empleado en los
laboratorios donde se manejan pruebas microbiológicas. Es definida
como una tinción diferencial
La técnica de coloración gram,
es de gran utilidad en
bacteriología, ya que permite
diferenciar bacterias
grampositivas y gramnegativas.
Conocimien
to
 Colorante es una sustancia
coloreada que es capaz de teñir
reaccionar químicamente.
o Colorantes sustantivos,
aquellos de naturaleza
coloidal y tiñen directamente
a la estructura.
o Colorantes adjetivos, aquellos
que precisan de un mordiente
para poder teñir la estructura.
 Mordiente es el fenómeno físico o
químico que permite reaccionar al
colorante con la estructura pueden
ser básicos
o Sales férricas de aluminio o
Fundament
o
Una tinción bacteriológica es
un conjunto de procedimientos
destinados a poner de
manifiesto morfologías y
estructuras bacterianas a través
de sustancias químicas
llamadas colorantes.
Procedimie
nto
 Colocamos el cristal violeta
 Se coloca Lugol, el cual sirve
como mordiente e impide la
salida del cristal violeta
 En seguida, se coloca una mezcla
de alcohol-acetona, la cual
deshidrata la pared bacteriana
cierra los poros de la misma
 Por último, se coloca safranina, la
cual funciona como contraste.
 Si la bacteria es de color púrpura, es
Interpretaci
grampositiva
 Si la bacteria es rosada o roja, es
ón

 Entre las bacterias gram positivas

más frecuentes se encuentran el
Staphylococcus, el Streptococcus y
el enterococo.
 Ejemplos de bacterias gram

Tinción Ziehl negativas son la Escherichia coli y la

neelsen.
La tinción de Ziehl-Neelsen permite distinguir a las micobacterias o
Bacilos Ácido Alcohol Resistentes (BAAR) que de otra forma no podrían
ser identificados. La propiedad que presentan algunas bacterias de resistir
la decoloración con ácidos fuertes después de ser coloreadas con solución
de fucsina caliente, permite reunirlas bajo la denominación general de
 Introducció
n absorben
Las micobacterias Procedimien
los colorantes solo muy
lentamente debido a la to
 Hacer un frotis con la cepa de
prueba, dejar secar al aire y fijarlo al
elevada proporción de ceras
calor.
y lípidos en la pared celular
 Cubrir el portaobjetos con fucsina
fenicada.
 Calentar suavemente con el mechero
hasta la emisión de vapores (5 min.)
 Lavar con agua
 Decolorar exhaustivamente con
alcohol-ácido.
 Lavar con agua.
 Cubrir el frotis con azul de metileno
durante un minuto

Interpretaci
ón
 Los bacilos ácido alcohol resistentes
aparecen color rojo sobre fondo azul.
 RESULTADO DE EXAMEN INFORME
NO SE OBSERVAN (BAAR) EN 100 CAMPOS CONTADOS AUSENCIA DE BACILOS
9-10 BAAR EN 100 CAMPOS OBSERVADOS INFORMAR EL # EXACTO DE BAAR EN 100 CAMPOS
10-99 BAAR EN 100 CAMPOS OBSERVADOS POSITIVO (+)
1-10 BAAR POR CAMPO EN 100 CAMPOS OBSERVADOS POSITIVO (++)
>10 BAAR POR CAMPO EN 20 CAMPOS OBSERVADOS POSITIVO (+++)