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UNIVERSIDAD NACIONAL DANIEL ALCIDES CARRION

FACULTAD DE CIENCIAS AGRPECUARIAS


EFP INDIUSTRIAS ALIMEMTARIAS

UNIVERSIDAD NACIONAL DANIEL


ALCIDES CARRION
FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
EFP INDUSTRIAS ALIMENTARIAS

TEMA:
EXTRACCION CASERA DE ADN
CATEDRA:
NUTRICION Y ALIMENTACION
CATEDRATICO:
Ing. JOLLHE WISSAR Andrea
SEMESTRE:
VI
INTEGRANTES:
BERNABE VILA Edgar
CASTILLO QUESADA Irene
CARHUAVILCA TORRES Eliane
FLORES ELIAS Nayaret
MANDARACHI ESCOBAR Ilen
VILLAR HINOSTROZA Darlene
ROJAS BERMUDO Enrique

La Merced – Chanchamayo
2019 0
TRABAJO
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I. INTRODUCCIÓN

El ácido desoxirribonucleico o ADN es el material genético de los seres vivos. La extracción de

ADN se realiza con la finalidad de hacer estudios genéticos, de forense y biología molecular.

Nosotros podemos extraer ADN de forma fácil con productos caseros y un poco de cuidado.

Para los estudios genéticos más profesionales, se requieren protocolos especiales con diversos

pasos y materiales que pueden ser contaminantes. Sin embargo, podemos hacer una extracción de

ADN a partir de materiales que tenemos en casa, o que podemos hacer en el laboratorio de

biología del colegio. (Zita Ana, 2019)

La extracción de ADN se realiza como un paso previo para purificar el material genético o ADN

para realizar posteriormente estudios de análisis molecular (pruebas forenses, diagnóstico de

paternidad, diagnóstico de enfermedades, caracterización molecular, etc). El ADN de las frutas o

verduras que comemos lo utilizamos para identificar inequívocamente la especie o la variedad de

que se trata o incluso identificar los padres del individuo. (Gogorcena Yolanda, 2016)

El ADN de las frutas o verduras que comemos lo utilizamos por ejemplo para identificar

inequívocamente la especie o la variedad de que se trata o incluso los padres del individuo. En la

industria alimentaria el ADN se utiliza para detectar posibles fraudes en el caso de que se trate de

zumos o de mezclas de carnes o pescado.

La extracción de ADN de una muestra celular se basa en el hecho de que los iones salinos son

atraídos hacia las cargas negativas del ADN, permitiendo su disolución y posterior extracción de

la célula. Se empieza por lisar (romper) las células mediante un detergente, vaciándose su

contenido molecular en una disolución tampón en la que se disuelve el ADN. En ese momento,

el tampón contiene ADN y todo un surtido de restos moleculares: ARN, carbohidratos, proteínas

y otras sustancias en menor proporción. Las proteínas asociadas al ADN, de gran longitud, se

habrán fraccionado en cadenas más pequeñas y separadas de él por acción del detergente. Sólo

queda, por tanto, extraer el ADN de esa mezcla de tampón y detergente, para lo cual se utiliza

alcohol isoamílico. La extracción de ADN se puede realizar de varios tejidos, en nuestro caso lo

haremos de la pulpa del melocotón, pero se puede repetir con otras frutas o verduras.

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II. OBJETIVOS

 Realizar la extracción de ADN de tejidos animales y vegetales y reflexionar sobre la simpleza

de su composición con sencillas técnicas.

 Observar la estructura fibrilar del ADN.

 Establecer la relación entre el proceso de extracción y propiedades químico - fisicas del ADN

III. MATERIALES

 Un atado de espinaca

 Agua destilada helada

 Sal

 Jabón o detergente liquido

 Alcohol 96 º (helado)

 Enzimas (bromelina, papaina)

 Licuadora

 Colador

 Tubos de ensayo

 Muestra vegetal : cebolla (refrigerada)

 Agua destilada

 Sal de mesa

 Bicarbonato sódico

 Detergente líquido

 Alcohol isoamílico a 0ºC o alcohol de 96 º

 Licuadora

 Nevera

 Colador o centrífuga

 Vaso

 Tubo de ensayo

 Varilla fina

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IV. PROCEDIMIENTO Y METODOLOGIA

Muestra: ESPINACA

1. Se licuo las hojas de espinaca, previamente heladas, sin las nervaduras con 200 ml de agua

destilada y con una pizca de sal, con impulsos de 8 segundos por velocidad. (tres

velocidades).

2. Se obtuvo el jugo molecular, el licuado duro 15 segundos.

3. Se vertió 150ml de jugo molecular en un vaso precipitado, después se agregó 2 cucharadas

de jabón líquido, se agito sin producir espuma.

4. Se pelo y se licuo la piña verde hasta obtener bromelina.

5. Se obtuvo la papaina raspando suavemente las gotas de latex de la papaya verde. v

6. Se coloco 3 ml de jugo molecular con 3ml de papaína en un tubo de ensayo y en un segundo

tubo de ensayo se coloco de 3ml de jugo molecular con 3ml de bromelina.

7. A estos tubos se le agrego 3 ml de alcohol helado.

8. Se formo una interfase entre el jugo molecular y el alcohol, y se movió lentamente con una

bagueta.

Muestra: CEBOLLA

1. Se preparo la sustancia tampón con los siguientes ingredientes y mantener en la nevera o en

un baño de hielo triturado:

 120 ml de agua destilada. No usar agua del grifo.

 1,5 g de sal de mesa, preferiblemente pura.

 5 g de bicarbonato sódico.

 5 ml de detergente líquido o champú.

2. La muestra que va a proporcionar el ADN entre los vegetales es la cebolla, cortarla en

cuadraditos.

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3. Se trituro la muestra con un poco de agua en la licuadora accionando las cuchillas a impulsos

de 10 segundos. Así se rompieron muchas células y otras quedaron expuestas a la acción del

detergente.

4. Se mezclo en un recipiente limpio 5 ml del triturado celular + 10 ml del tampón frío y se

agito durante al menos 2 minutos. Se separo después los restos vegetales más grandes del

caldo molecular haciéndolo pasar por un colador lo más fino posible.

5. Se retiro 5 ml del caldo molecular a un tubo de ensayo y se agregó con pipeta 10 ml de

alcohol enfriado a 0ºC. Se debe dejar escurrir lentamente el alcohol por la cara interna del

recipiente, teniendo éste inclinado. El alcohol quedará flotando sobre el tampón.

6. Se introdujo la punta de una varilla estrecha hasta justo debajo de la separación entre el

alcohol y el tampón. Remover la varilla hacia delante y hacia atrás y poco a poco se irán

enrollando los fragmentos de mayor tamaño de ADN. Pasado un minuto se retiró la varilla

atravesando la capa de alcohol con lo cual el ADN quedando adherido a su extremo con el

aspecto de un copo de algodón mojado.

V. RESULTADOS Y DISCUSI ÓN

5.1. Resultados de la Espinaca (Figura Nº1)

Al momento de mover la varilla se pudo observar el ADN de la Espinaca de un color

verde.

Resultados de la Cebolla (Figura Nº2)

Al momento de mover la varilla se pudo observar el ADN de la cebolla de color blanco.

5.2. Discusión

Según Cardozo y Giménez (2018), en su práctica de “EXTRACCION DE ADN DE LA

FRESA”. Usaron en su procedimiento el mortero en vez de la licuadora para la fresa, y

utilizaron un desengrasante de cocina para ayudar a romper las membranas celulares de

la fruta.

En la práctica: En ambas muestras de la Espinaca y la cebolla se licuo y se filtró lo que

también es lo recomendable para este método, pero se utilizó jabón líquido, que al igual

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que el desengrasante cumple con la misma función de ayudar a romper las membranas

celulares y liberar el ADN del núcleo.

Según Coronado Garceres (2014). En su práctica de “EXTRACCION DE ADN DE

VEGETAL”, nos dice que en caso de los vegetales como la espinaca y entre otros

vegetales se utiliza la Bromelina y Papaina para la extracción del ADN. La piña contiene

una enzima conocida con el nombre de bromelina o bromelaína. Ésta es una enzima

proteolítica, lo que quiere decir que es capaz de "romper" las proteínas dejando libres las

unidades que las forman, los aminoácidos. Analizando lo expuesto anteriormente, se

puede decir que se emplea en la extracción del material genético porque contribuye a

eliminar las proteínas que puedan contaminar el ADN de estas maneras puede obtener las

fibras.

En la práctica: En el procedimiento de la práctica para la extracción del ADN de la

Espinaca también se utiliza la Bromelina y Papaina lo que nos garantizó poder obtener

los resultados. Por la misma razón que Coronado Garceres nos fundamenta.

VI. CONCLUSIONES

Se logro obtenidos las fibrillas del ADN celular del tejido vegetal, por su fácil método de

extracción, siendo para estudiantes en formación una práctica de fácil realización. De la misma

forma, gracias a la extracción se observo de forma exitoso las fibrillas ADN celulares siendo de

mas notoriedad con aquella que se trabajó con papaína.

Gracias a la ruptura de la estructura celular y la combinación con ácidos, se logro obtener el ADN

de los tejidos, demostrando en práctica la sencilla de extracción de la estructura celular.

VII. RECOMENDACIONES

Realizar la presente practica con diferentes ácidos, para poder verificar si la extracción es de igual

resultado.

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VIII. BIBLIOGRAFIA

Cardozo y Giménez (2018). “PRACTICA DE EXTRACCION DE ADN”. Consultado el 21 de

diciembre del 2019. Recuperado de: http://www.colegioceualicante.es/blog/wp-

content/uploads/2018/02/practica-adn-fresa.pdf

Coronado, P. (2014). “EXTRACCION DE ADN VEGETAL”. Consultado el 21 de diciembre del

2019. Recuperado de: https://es.scribd.com/document/226069549/Informe-5-

Extraccion-Adn

Gogorcena Y. (2016). “DESCUBRE EL ADN DE LAS FRUTAS QUE COMEMOS”. España:

Ministerio De Ciencias Innovación Y Universidades. Consultado el 21 de diciembre del

2019. Recuperado de http://www.eead.csic.es/spreading/showspreading?Id=478

Zita A. (2019). “EXTRACCIÓN DE ADN (EXPERIMENTO CASERO)”. Consultado el 21 de

diciembre del 2019. Recuperado de https://www.todamateria.com/extraccion-adn-

experimento/

IX. CUESTIONARIO

1. ¿Qué componentes tiene el jabón líquido o detergente líquido, y como actúa en el

proceso de extracción del ADN?

Se utiliza detergente para romper la pared celular y la membrana plasmática, a

continuación, sirve para romper la membrana nuclear y llegar al núcleo donde se

encuentra el material genético o ADN y liberarlo.

2. ¿Por qué se trabaja en frio?

El alcohol se utiliza para precipitar el ADN que es soluble en agua pero que al encontrarse

con alcohol éste se desenrolla y cae hasta quedarse entre el agua y el alcohol, dos líquidos

con distintas densidades.

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3. ¿Que función tiene las enzimas en los enlaces proteicos?

Las enzimas son moléculas orgánicas que actúan como catalizadores de reacciones

químicas, es decir, aceleran la velocidad de reacción. Comúnmente son de naturaleza

proteica, pero también de ARN. Las enzimas modifican la velocidad de reacción, sin

afectar el equilibrio de la misma, ya que una enzima hace que una reacción química

transcurra a mayor velocidad, siempre y cuando sea energéticamente posible (ver energía

libre de Gibbs). En estas reacciones, las enzimas actúan sobre unas moléculas

denominadas sustratos, las cuales se convierten en moléculas diferentes denominadas

productos. Casi todos los procesos en las células necesitan enzimas para que ocurran a

unas tasas significativas. A las reacciones mediadas por enzimas se las denomina

reacciones enzimáticas.

4. ¿Qué tipo de Aminoácidos encontraríamos en las muestras utilizadas en la práctica?

 En la Espina aminoácidos como: la valina, la Metionina.

 En la Cebolla aminoácidos como: la Cisteína.

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X. ANEXOS

FIGURA Nº1 “ADN de la espinaca.

FIGURA Nº2 “ADN de la cebolla.


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