SIMPOSIO 1. Castilla Alcalá, José Antonio

2 2
2
Novedades en análisis de 0 semen:
I N
OMS-6ª edición
L
B C
LA Jose Antonio Castilla
U. Reproducción, HU Virgen de las Nieves, Granada
CEIFER Biobanco, Granada
Next Fertility Sevilla
2
Manual OMS’6: nuevas técnicas
• Análisis básico
02
•
N 2
Análisis ampliado: Indicados en determinadas situaciones clínicas
•
L I
Análisis avanzado: técnicas muy especializadas, investigacion y
•
emergentes
B C
•
•
LA
Preparación del semen para TRA
Crioconservacion
2
Manual OMS’6: Desaparece
2 2
• Lo que desaparece
2 0
N
• Test de hámster
I
• Unión a zona pelúcida
L
• Moco cervical
B C
LA
3
2 2
2 0
Análisis básico del semen
Movilidad espermática
L I N
Vitalidad espermática
Concentración espermática
B CMorfología espermática
LA
4
Clasificación de la movilidad
2 2
Descripción OMS’1-4 OMS’6
2 0 OMS’5
I N
Inmóvil grado d IM
L
No progresiva (<5 µm/s)* grado c NP
Progresiva (≥5 µm/s)** PR
C
lenta (5-24 µm/s) grado b --
B
rápida (≥25 µm/s) grado a --
A
*incluye movimiento circular sin progresión final
L
**avanza más de una “cabeza” por segundo
**incluye movimiento circular “amplio”
5
Movilidad Espermática
2 2
0
• Vuelven los 4 tipos de movimientos: a, b, c, d
2
• Hacerlo siempre a 37ºC Tipo “a”
I N
40 m/s 25 m/s 15 m/s 4 m/s
CL
A B
L
a a b C
Yeung et al., 1997 6

Movilidad espermática: clasificación
2
Se considerada como: OMS´6 OMS´5
2
Inmóvil Grado D IM
0
No progresiva Grado C NP
Progresiva PR
2
lenta Grado B
rápida (>25 µm/s a 37ºC) Grado A
L I N
B C
LA cola cabezas
Porqué distinguir entre rápidos y lentos
2 2
Capacidad de penetrar el moco cervical
2 0
Aitken RJ, J Reprod Fertil (1985)
Mortimer D, J Reprod Fertil (1986)
Capacidad fecundante in vivo
L I N Comhaire F, J In Vitro Fert Embryo Transf (1988)

Barrat CL, Hum Reprod (1992)
C
Gestación en inseminación de donante Irvine DS, Hum Reprod (1986)
A B
Gestación en inseminación conyugal Bollendorf A, J Androl (1996)
Sifer C, Hum Reprod (2005)
L
Fecundación y división en FIV-ICSI Van den Bergh M, Hum Reprod (1998)
8
2
Análisis básico del semen 2
2 0
L I N
B CMorfología espermática
LA
9
Vitalidad Espermática
2 2
 Los espermatozoides con una tinción rosa débil en la cabeza se consideran
como muertos
2 0
L I N
B C
LA
2 2
2 0
I N
L
B C
Morfología espermática
LA
11
Concentración Espermática
2 2
2 0
 Nueva tabla de diluciones que favorece la dilución 1:20
L I N
B C
LA
12
Cuando hay muy pocos espermatozoides
2 2
0
OMS’5 (2010) OMS’ (2021)
Si 0 – 16 espermatozoides (campo X200)
No hace falta precisión
N 2
Si 0 – 16 espermatozoides (campo X200)
No distingue entre métodos ‘imprecisos’ y ‘precisos’
I
1 No hacer nada (<2 x 106/mL) 1 No centrifugar, porta-cubre (24x50)*
L
2 Centrifugar > porta-cubre (24x24) 2 Cámara gran volumen 25 µL (dil 1:1)**
C
3 No centrifugar, porta-cubre (24x50) 3 Centrifugar > porta-cubre (24x24)*
4 Newbauer (dil 1:1)
B
Sí hace falta precisión
A
4 Newbauer (dil 1:1) * Indicar que se trata de una concentración aproximada
L
5 Cámara gran volumen 25 µL (dil 1:1)** ** Para usar con microscopio de fluorescencia
** Para usar con microscopio de fluorescencia

Más confuso, desordenado
13
2 2
2 0
I N
L
B C
Morfología espermática
LA
14
Morfología: % Esperatozoide IDEAL
2 2
Recomiendan Papanicolaou como la principal técnica de tinción
0
•
• Recomiendan indicar cualquier anomalía que se repita (sin %)
•
•
Contar sólo espermatozoides con cola
2
Reportar la presencia de cabezas sin cola cuando es superior al 20%
N
I
• Incluyen un esquema para evaluar la morfología
CL
A B
L Yeung et al., 1997 15
Morfología Espermática
2 2
0
• Muchos más ejemplos de morfología
2
• El tamaño de los espermatozoides varía dependiendo del tipo de tinción
L I N
B C
LA
Morfología Espermática
2 2
2 0
L I N
B C
LA
ACTUALIZAR LAS MEDIDAS SEGÚN EL TIPO DE TINCIÓN QUE SE
UTILICE EN EL LABORATORIO
2 2
2 0
Análisis extendido del semen
- Fragmentación del DNA
I N
- FISH de espermatozoides
L
- Secuencia de eyaculación
B C
L A
18
Fragmentación DNA:
• Tunel:
2 2
• Deja muy abierta descripción
2 0
• Lectura >200 espermatozoides (microscopio)
I N
• Test de dispersión de cromatina:
L
• Baja variabilidad entrelab
C
• Lectura: >500 espermatozoides
B
• Comet test:
A
• Alta variabilidad entrelab.
L
• Lectura: 100 espermatozoides
• Naranja de acridina (citometria flujo)
• Lectura: 5000 espermatozoides
19
Fragmentación DNA:
2 2
0
• Cut-off : para cada laboratorio
N 2
I
• Evaluación por Valor predictivo para distintas
L
situaciones:
C
• Gestación clinica
B
A
• Embarazo evolutivo
L• Aborto,
• Nacido vivo
20
2 2
2 0
L I N
B C
LA 21
21
2 2
2 0
L I N
B C
LA
2 2
2 0
• ↑ Sensibilidad (↓FN) ó ↓ Prevalencia → ↑ VP-
• ↑ Especificidad (↓FP) ó ↑ Prevalencia → ↑ VP+
L I N
B C
Para que sea util ALTO VP+,
AUMENTAR PREVALENCIA
LA SELECCIONAR BIEN PACIENTES
23
2 2
2 0
Análisis extendido del semen
I N
L
B C
L A
24
Aneuploidia espermaticas: FISH
2 2
0
• Cut-off : algunos infertiles tiene hasta 10
2
veces más aneuploidias espermaticas
N
•
L I
Mala calidad seminal
•
B C
Abortos
L
•
•A Alta fragmentación DNA
Translocaciones cromosómicas
25
FISH de espermatozoides
•
2 2
Nivel basal de disomía en hombres fértiles según OMS 6ª edición
2 0
L I N
B C
LA
FISH de espermatozoides
2 2
Comparación entre los datos OMS (puntos rojos) y Garcia-Mengual et al, 2019
0
•
N 2
L I
B C
LA
2
Examinación extendida del semen2
2 0
L I N
B C
LA
28
2
Examinación extendida del semen2
2 0
N
L I
B C
LA
29
Evaluación de la secuencia del eyaculado
2 2
0
• El paciente recoge el eyaculado en estos dispositivos
2
según el orden de expulsión
L I N
B C
A
• Detección de obstrucciones
L
de conductos de eyaculación
en análisis seminal

2 2
0
Los VALORES DE REFERENCIA han muerto
N 2
L I
Vivan los LÍMITES DE DECISIÓN
B C VALORES DE
A
REFERENCIA
L 31
Límites de decisión
2 2
 Evolución de los valores de referencia en las distintas ediciones del manual
0
de la OMS
N 2
L I
B C
LA
32
Límites de decisión
2 2
 No hay valores de referencia sino LÍMITES DE DECISIÓN que dependen de cada
laboratorio y de cada situación
2 0
L I N
B C
LA
33
2
La consecuencia de reducir los límites
de referencia
02
2
ROC plot infértil A fértil
N
A
I
frequency
CL
A B valor medido
L 34
Björndahl L, Hum Fertil (Camb) (2011)

La consecuencia de reducir los límites
de referencia
2 2
0
infértil fértil B A
2
A
frequency
N
B
L I
B C valor medido
A
 Límites de referencia basados únicamente en la distribución de fértiles
L
 Reducción del umbral reduce la sensibilidad y excluye de ulteriores estudios
diagnósticos (se consideran sin patología)
35
2
Límites DECISION distintos para objetivos distintos
Diagnóstico de infertilidad
02
Decisión/pronóstico de tratamiento
2
situación real situación real
I N
Infértil Fértil Infértil Fértil
L
patológico (+) FP (en riesgo de patológico (+) FP (medicalización
VP VP
C
Infértil ser tratados sin Infértil innecesaria)
necesidad)
test test
B
normal (–) FN (subfértiles normal (–) FN (Otras
A
Fértil considerados VN Fértil causas de VN
L
normales) infertilidad)
Sensibilidad alta
Sensibilidad no puede ser alta (considerar factor femenino)
Confirmar con otros indicadores de riesgo más específicos)
Mayor especificidad, reducción de falsos positivos
36
2 2
2 0
L I N
B C
LA
CONCLUSIONES
2 2
2 0
Un paso adelante en la estandarización del
análisis de semen pero no exento de
polémica
L I N
B C
LA
2 2
2
Novedades en análisis de 0 semen:
I N
OMS-6ª edición
L
B C
LA Jose Antonio Castilla
U. Reproducción, HU Virgen de las Nieves, Granada
CEIFER Biobanco, Granada
Next Fertility Sevilla

SIMPOSIO 1. Castilla Alcalá, José Antonio

Cargado por

Información del documento

Descripción original:

Título original

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

SIMPOSIO 1. Castilla Alcalá, José Antonio

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

2 2

Yeung et al., 1997 6

Capacidad fecundante in vivo

L I N Comhaire F, J In Vitro Fert Embryo Transf (1988)

** Para usar con microscopio de fluorescencia

LA SELECCIONAR BIEN PACIENTES

Yeung et al., 1997 30

Björndahl L, Hum Fertil (Camb) (2011)

También podría gustarte