Bioquímica Clínica II

TEMA: Metodología Analítica de Hormonas

Actividades:
• ¿Qué métodos analíticos eran los que se utilizaban hasta el año 1960?
RADIOINMUNOANÁLISIS Es una técnica inmunológica propuesta en 1959 por Yallow y
Berson, que tiene una gran aplicación en clínica.
2-Cuales son los métodos químicos para la determinación de Hormonas? Enúncielos
• Radioinmunoanálisis.
• Enzimoinmunoanálisis.
• Fluoroenzimoinmunoanálisis.
• Quimioluminoinmunoanálisis.
3-Describa el método HPLC (cromatografía liquida) para determinar: catecolaminas y
hormonas esteroides
La Cromatografía Líquida de Alta Resolución (HPLC) es una técnica de separación de
mezclas de productos poco o nada volátiles. La muestra se introduce en el puerto de
inyección donde es arrastrada por una mezcla de disolventes (fase móvil) hacía una
columna cromatográfica. La diferente interacción de los analitos con la fase móvil y el
relleno de la columna permite la separación de los componentes de la mezcla para una
posterior detección, y/o caracterización, y/o cuantificación utilizando diversos
detectores.
La posibilidad de utilizar diversos procesos de interacción entre analitos y distintas
columnas cromatográficas, junto con la opción de seleccionar diferentes detectores,
hace que sea posible la extracción de un gran volumen de información permitiendo
abordar un amplio abanico de necesidades analíticas.
4- En cuanto a los Métodos Inmunometricos podemos encontrar:
A-RADIOINMUNOANALISIS: Es una técnica inmunológica que tiene una gran aplicación
en clínica. Permite la cuantificación exacta de compuestos biológicos presentes en el
organismo en concentraciones tan bajas como ng/ml (nanogramo=10-9 g) o incluso de
pg/ml (picogramo=10-12 g) no es necesario purificar previamente la muestra.
B-ENZIMOINMUNOANALISIS: Son técnicas inmunoquímicas cuantitativas basadas en
reacciones antígenoanticuerpo como en el RIA, y siguiendo un protocolo experimental
similar. La diferencia consiste en que el marcaje se hace con un enzima en vez de con
un isótopo radiactivo.
C-FLUOROENZIMOINMUNOANALISIS: Esta técnica sigue un protocolo básicamente
igual al descrito para EIA, con la diferencia de utilizar como marcador una molécula
fluorescente o un sustrato que por la acción de un enzima se transforma en una
molécula fluorescente. La lectura es utilizada para el cálculo de los resultados en la
misma forma que en RIA.
D-QUIMIOLUMINOINMUNOANALISIS: Esta técnica sigue un protocolo básicamente
igual al descrito para EIA, con la única diferencia de utilizar como enzima ligada un
enzima que cataliza la oxidación de un sustrato adecuado. Este al oxidarse, alcanza un
estado de excitación electrónica, y al volver posteriormente los electrones a sus órbitas
primitivas de menor energía, emiten la diferencia en forma de energía luminosa. Esta
energía luminosa es medida en un luminómetro. La lectura es utilizada para el cálculo
de los resultados en la misma forma que en RIA.
5-En que consiste un perfil hormonal? ¿para qué es útil? Especifique alguno
El perfil hormonal permite determinar las causas de distintas afecciones de infertilidad
en hombres y mujeres. Consiste en un análisis de sangre donde se analiza la
concentración de diferentes hormonas.
• El perfil hormonal femenino es un examen de laboratorio que se usa para
conocer principalmente la actividad de los ovarios y muestra la cantidad de
estradiol, hormona folículo estimulante y hormona luteinizante, en algunos
casos también puede mostrar la cantidad de prolactina, progesterona y
testosterona en sangre.