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Dr.

Wilfredo Hernn Revilla Cahuana


Perito Criminalstico
Representante Regional de TIAFT en Per
Representante en Per de la Asociacin Latinoamericana de Ciencias Forenses
Miembro de la Academia Internacional de Ciencias Forenses y Criminalstica
Vicepresidente del Instituto Peruano de Ciencias Forenses

LA PERICIA
QUMICO
TOXICOLGICA

ANALISIS QUMICO TOXICOLGICO


Por anlisis qumico toxicolgico se
entiende, el conjunto de procesos
analticos encaminados a poner de
manifiesto la presencia de una
sustancia de las consideradas txicas
en una muestra problema.
Toxicologa Fundamental. Repetto 2009

ANALISIS QUMICO TOXICOLGICO


rea fundamental Toxicologa analtica se
derivan varias ramas aplicadas:
Toxicologa Analtica Clnica
Toxicologa Analtica Laboral
Toxicologa Analtica Alimentaria
Toxicologa Analtica Ambiental
Toxicologa Analtica Forense, etc.

ANALISIS QUMICO TOXICOLGICO

Un principio fundamental de la
Toxicologa Forense es que el
diagnstico de certeza de una
intoxicacin, se hace con base al
anlisis de laboratorio.

Caractersticas del Perito Qumico


Farmacutico Forense
1. Debe poseer una adecuada formacin
cientfica
2. Que el perito tenga acceso a los medios
necesarios
3. Que est revestido de la necesaria
imparcialidad

Qu envergadura o grado de instalacin que


debe tener un laboratorio de toxicologa?
En la reunin conjunta Word Federation of
Associations of Clinical Toxicology Centers
and Poison Control Centers y la World Health
Organization (Genve, 1981) se sugiri la
posibilidad de tres niveles de complejidad,
que posteriormente fueron considerados por
Repetto, 1985 y 2006

Toxicologa Fundamental. Repetto 2009

NIVELES DE COMPLEJIDAD EN LOS LABORATORIOS


DE TOXICOLOGA (Toxicologa Fundamental. Repetto 2009)

a)Laboratorio de nivel primario.


Su equipamiento y personal es el mnimo,
imprescindible para desarrollar tcnicas de
inmunoensayo,
colorimtricas
y
cromatogrficas y poder detectar de forma
cualitativa
las
sustancias
(drogas,
medicamentos, plaguicidas, etc.) que con
mayor frecuencia produzcan intoxicaciones
en la localidad o zona.

NIVELES DE COMPLEJIDAD EN LOS LABORATORIOS


DE TOXICOLOGA (Toxicologa Fundamental. Repetto 2009)

b) Laboratorios de nivel intermedio.


Deben disponer de algn instrumental como
espectrofotometra U.V, GC, HPLC, IR, etc.,
y estn capacitados para la determinacin
incluso cuantitativa de txicos concretos,
como metales, plaguicidas, drogas de
abuso, etc.

NIVELES DE COMPLEJIDAD EN LOS LABORATORIOS


DE TOXICOLOGA (Toxicologa Fundamental. Repetto 2009)

c) Laboratorios de nivel superior


Correspondiente a un verdadero Laboratorio
de Toxicologa, con la mejor instrumentacin
cientfica, incluida la espectrometra de
masas, MEB, etc., y capacitados para realizar
sistemticas
analticas
toxicolgicas
generales y especficas y actuar como
centros de referencia de los anteriores.

FASES DE ACTIVIDAD EN UN LABORATORIO DE TOXICOLOGA


1. Fase. Pre analtica: incluye la recepcin y registro de la muestra y su
documentacin; estudio de la informacin disponible sobre la
presunta intoxicacin, (medicaciones, actividad laboral, etc.); datos
clnicos suministrados por el mdico que lo atendi, etc.; decisin
sobre la prioridad del anlisis frente a otras solicitudes recibidas.
2. Fase propiamente analtica o realizacin de los anlisis que
correspondan.
3. Fase. Interpretacin de los resultados y redaccin de un informe,
En caso necesario, deben realizarse nuevos anlisis de las mismas
muestras o de otras; por ello, se deben conservar apropiadamente
por un tiempo prudencial, manteniendo en todo momento la cadena
de custodia.

LA MUESTRA PARA EL ANLISIS TOXICOLGICO

lquido orgnico (sangre, orina, saliva, etc)


Vsceras y faneras (hgado, rin, cerebro, uas, pelos)
comprimido medicamentoso
restos vegetales
residuos en una taza, vaso o botella.
alimento, bebida, el envase de conservas, o unos cigarrillos

aire urbano o de un recinto industrial


compartimientos de un ecosistema (aire, aguas, sedimentos,
plantas, gusanos, aves, huevos, mamferos, etc.).

Unas muestras de extraordinaria utilidad en toxicologa muestras


certificadas o estndares de referencia, proporcionadas por
instituciones nacionales o internacionales de estndares, metrologa o
referencia.

CADENA DE CUSTODIA
Cadenas de custodia abiertas, son aquellas en que
intervienen organismos y personas de distinta entidad, que se
transfieren la muestra y su control de unos a otros, observando
normas que pueden ser diferentes.
Cadenas de custodia cerradas, en que todo el proceso de
gestin de la muestra es realizado por miembros de un mismo
organismo segn una normativa nica.

Cadena de custodia interna, en nuevos documentos que


habrn de registrar:
Fecha y hora de la recepcin.
Identidad de la persona que recibe la muestra.
Identidad y firma del portador.
Naturaleza, cantidad y condiciones en que se recibe la prueba.
Identificacin de la muestra mediante un nmero de registro, preferiblemente a travs de cdigo de
barras.
Lugar y condiciones (frigorfico, almacn, etc.) en que se conservar hasta su anlisis.
Destino posterior.. .

CONSIDERACIONES GENERALES SOBRE LAS MUESTRAS BIOLGICAS

a) Muestras hemticas.
Dado que los xenobiticos son distribuidos por la sangre a todos los
tejidos, la concentracin sangunea suele ser un indicador de la
impregnacin tisular y de la afectacin. La mayor parte de los
xenobiticos orgnicos van disueltos en el plasma o unidos a las
protenas; algunos se transportan por los hemates.
Como al coagular la sangre y separarse el suero puede haber prdidas
por arrastre, es preferible reservar el suero para los estudios
enzimolgicos.
Por tanto, la sangre total y el plasma son las muestras ms
representativas. El ideal es que el laboratorio reciba sangre total, sin
coagular y sin hemolizar, adicionada con fluoruro sdico slido (5
mg/ml)
El perito decidir si utiliza la sangre total o la centrifuga para separar el
plasma y trabajar con l, pues resulta ms cmodo y libre de
interferencias y pigmentos que la sangre, y no forma, emulsiones con
los disolventes orgnicos.

b) Orina. Es una matriz fcil de trabajar, con pocas interferencias,


pero muchos xenobiticos se excretan mal por esta va, por lo
que el anlisis puede o no ser representativo. No precisa
adicin de conservadores.
c) Contenido gstrico, lquido de lavado gstrico o vmitos.
No presentan demasiados inconvenientes prcticos, y su
anlisis puede ser rpido por ser fcil la separacin del
xenobitico.
Pero los resultados no son representativos de la intoxicacin
porque se refieren a xenobitico no absorbido (aunque est
dentro del cuerpo, no ha pasado a la sangre y no pudo actuar
sobre los receptores).
d) Vsceras. El hgado, seguido del rin y el cerebro, son los
rganos que ms xenobiticos acumulan, por lo que se
prefieren como muestras analticas. No deben ser adicionados
de agentes conservadores sino mantenidos, a baja
temperatura .

Preparacin de muestras sanguneas con destino a la


determinacin de drogas y alcoholemia

Desinfeccin del instrumental


Desinfeccin de la piel.
Cantidad de sangre que se debe extraer
Frasco para remitir la muestra
Aditivos conservadores
Sangre de cadveres
Muestras de cabellos

FASES DE UN ANLISIS QUMICO TOXICOLGICO GENERAL

1. Separacin o extraccin del txico de la


muestra problema.
2. Fraccionamiento del extracto.
3. Purificacin de los extractos obtenidos.
4. Deteccin de la sustancia xenobitica.
5. Identificacin del txico.
6. Determinacin o valoracin cuantitativa.

ORIENTACIN DE LOS ANLISIS TOXICOLG1COS

Frecuentemente, el qumico al que se pide un anlisis


toxicolgico se enfrenta con un vastsimo problema,
cuya resolucin, si no se le suministran algunas pistas,
consumir considerable esfuerzo, tiempo y dinero.
Por el contrario, datos orientadores permitirn no slo
reducir el campo de estudio y utilizar tcnicas ms
apropiadas, sino que tambin evitarn tener que insistir
en ensayos de comprobacin si, cuando se identifica el
txico, ste se corresponde con la informacin recibida.

MUERTE POR ENFERMEDAD O AGENTES


QUMICOS.

E
C

SIGNOS DE INTOXICACIN (+) (-)

R
O

OBTENER LA MUESTRA

P
S
I
A

ORIENTA LA INVESTIGACIN TOXICOLGICA


HALLAZGOS EN LA NECROPSIA
CORRELACIONADOS CON AQT

VARIABLES QUE INFLUYEN EN LOS RESULTADOS ANALTICOS

Momento de toma de la muestra


Cuando el individuo absorbe una sola dosis de txico, la
concentracin en sangre, orina o vsceras depender
lgicamente del momento txico-cintico en que se tome la
muestra o se produjera la muerte.
Ej. Calculos retrospectivos del alcohol etlico
Metabolitos: Etilglucornido y etilsulfato

Estabilidad del compuesto en la muestra


Frecuentemente el frmaco es transformado por las enzimas del plasma;
este inconveniente se reduce en las muestras de sangre total, que precisan
un conservador para que no coagulen; el aditivo (por ejemplo el FNa)
puede, al propio tiempo, inhibir los procesos de degradacin.
Como demostr Kawai (1995), durante la putrefaccin de la muestra
biolgica, la Pseudomona sp. que puede estar presente es capaz de
biotransformar los glicoles, por ejemplo el dietilenglicol (DEG) en los cidos
etoxiactico y etoxiglicolactico; esto lleva a Ferrari (2007) a justificar la
imposibilidad de hallar DEG en los cadveres de los intoxicados en Panam
(2006)
Caso de supuesta intoxicacin por carbamatos, en Per

Amplitud y reproduciblidad del mtodo analtico


Los mtodos analticos deben ser amplios, capaces de, mediante un
proceso sistemtico, abarcar el mayor nmero posible de sustancias
txicas, todo lo contrario de los mtodos de tamizado (screening) que se
limitan a grupos concretos .
Tambin han de ser muy sensibles, pues, a partir de muestras del orden
de 2 ml, han de ser capaces de detectar concentraciones inferiores a los
50-100 microgramos, pero ms importante an es que los resultados se
repitan cada vez que se analiza la misma muestra.

Ello exige la continua participacin en programas de control de


calidad, tanto dentro del propio laboratorio como
interlaboratorios.

NORMATIVAS DE GARANTA DE CALIDAD EN LOS ANLISIS


TOXICOLGICOS

Comit Olmpico Internacional y algunas federaciones deportivas;


Sociedad de Toxiclogos Forenses norteamericanos
Administracin americana sobre
Enforcement Authority, DEA)

drogas

de

abuso

(Drugs

Asociacin Internacional de Toxiclogos Forenses (TIAFT) ha


publicado sus recomendaciones en 1994, con el compromiso de
revisarlas peridicamente, y que debieran ser tenidas en cuenta por
todos quienes realicen anlisis toxicolgicos con destino judicial o
forense.

Al concluir el caso se elaborar un


Informe de los resultados dirigido a
quien lo solicit, el cual debe reflejar no
solo los resultados de los anlisis sino
tambin el mtodo empleado.

GRACIAS POR SU ATENCION


interrogantes, comentarios,
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