UNIDAD

5: BIOLOGÍA
MOLECULAR-PARTE III
• Transcripción
• Procesamiento del RNA
• Estructura de genes y control de
expresión genética
• Traducción-Conceptos
Referencias:
• Molecular Cell Biology, 7a edicion.
Lodish, H., et al. (Capítulos 4, 12)
• Molecular Biology of the Cell, 5a
edicion. Alberts, B., et. al. (Capítulos
4,5,6)
Expresión de genes que codifican proteínas
ØGen = “unidad de DNA que
contiene la información
para especificar la síntesis
de una proteína o de un
RNA”
ØmRNA, tRNA, rRNA, etc.
ØEtapas:
• Transcripción (1)
(DNAàRNA)
• Procesamiento (2) del RNA
• Traducción (3)
(RNAàProteina)
Expresión Genética: Procariotas vs. Eucariotas

https://socratic.org/questions/how-does-gene-regulation-differ-in-prokaryotes-and-eukaryotes
1. Transcripción
DNA à RNA
RNA polimerasa (RNA pol)
• Enzima: RNA polimerasa (RNA pol)
• Sintetiza RNA adicionando bases complementarias a las
encontradas en el DNA (una cadena o ”template” =
modelo, plantilla)
• Excepto: A en DNA à U es adicionado al RNA
• Al final, RNA se separa del DNA
• Solo sintetiza en dirección: 5’à3’
• Cadena molde DNA: 3’à5’
• Orientación del esqueleto azucar-fosfato (enlace fosfodiester)
• Terminología:
• Posición 1: donde empieza transcripción
• Downstream (Corriente abajo): dirección de transcripción
(à3’)
• Upstream (C. arriba): dirección opuesta (à5’)
Transcripción – Proceso
• Etapas:
1. Iniciación
2. Elongación
3. Terminación
Transcripción – Iniciación
1. “Complejo cerrado”
• Promotor: secuencias en
posición -10 y -35 (DNA 𝛔
doble cadena)
• RNA pol
• Tipos I (rRNA), II (mRNA) y III
(tRNA)
• RNA pol + factor 𝛔: unión 𝛔
firme al promotor
• Factores de transcripción
asisten en unión al promotor
2. “Complejo abierto”
• RNA pol “melts” DNA
𝛔
3. RNA pol polimeriza
fragmento corto de RNA
Transcripción – Elongación y Terminación
• Elongación 𝛔
• RNA pol se libera de 𝛔
• Adiciona ribonucleótidos
5”à3’
• Híbrido DNA-RNA temporal
• Terminación
• Terminador: secuencia en
DNA indica terminación
• RNA pol – RNA – DNA se
disocian
• RNA sigue el proceso de
procesamiento
2. Procesamiento/Maduración
del RNA
Eucariotas vs. Porcariotas
“Capping”: Cubierta 5’ y cola 3’
“Splicing”: Eliminación de Intrones/Unión de Exones
Procesamiento del mRNA: Eu. Vs Procariotas
• En procariotas:
• mRNA transcrito: listo para traducción
• Transcripción y traducción:
simultáneas
• En eucariotas:
• Transcripciónàpre-mRNA
• ProcesamientoàmRNA (maduro)
• mRNA (maduro) à ribosoma
Procesamiento del
mRNA: Eucariotas
1. Transcripciónà pre-mRNA
2. Adición de la cubierta 5’ (7 metil
guanilato)
3. Corte de fragmento 3’
4. Adición de “cola Poly A” (100-250)
5. Empalme/maduración
(eliminación de secuencias no
codificantes = intrones)
6. Transporte del mRNA
Procesamiento del mRNA- Empalme Alternativo
ØPermite la expresión de múltiples/relacionadas proteinas de un gen
Control de expresión genética en procariotas
• Como se toma la decisión de
empezar transcripción y síntesis
protéica?
• Represión= transcripción “off”
• Activación= transcripción “on”
• Cambios de acuerdo a condiciones
ambientales/nutricionales
• Para aumentar eficiencia: bacterias
tienen múltiples genes (que regulan
una misma vía metabodentro de
una misma unidad regulatoria =
OPERON
Operon Lactosa-Elementos y Estructura Genética
• Secuencias de ADN:
1. Operador: donde se une el represor
2. Promotor: donde se une la RNA pol
3. Regulador: codifica al represor
4. Sitio CAP: donde se une CAP
5. Genes estructurales: codifican
proteinas requeridas para CAP
metabolismo de lactosa
• Proteínas/elementos:
1. RNA pol: sintetiza RNA
2. Represor: se une al operador
3. CAP: se une al sitio CAP y
“ensambla” la RNA pol al promotor
4. Inductor: lactosa; remueve al
represor del operador

CAP
Operon Lac- Mecanismo
• Es un operon inducible:
• Con lactosa à ON
• Sin lactosa à OFF
• Cuando lactosa esta en el medio es
necesario sintetizar las enzimas para su
metabolismo (operón ON)
• Activación/Represión del Operón en 3
casos diferentes:
1. [Presencia (+) de Glucosa] y [Ausencia (-)
de Lactosa] à No mRNA (no prot.)
2. [Presencia (+) de Glucosa] y [Presencia (+)
de Lactosa] à poco mRNA
3. [Ausencia (-) de Glucosa] y [Presencia (+)
de Lactosa] à mucho mRNA
Crecimiento diauxico (bifásico)
Operon Triptófano (Trp)
• Es un operon reprimible:
• Con triptófano à OFF
• Sin triptófano à ON
• Cuando triptófano
(aminoácido esencial)
esta en el medio, no es
necesario sintetizarlo
(operón OFF)
Operon Trp:
en presencia
de Trp
Operon Trp:
en ausencia
de Trp