INFORME DE LABORATORIO

¹Juan Sebastián Acosta, ¹Bibiana Andrea Tovar

¹Estudiantes de Biología, Facultad de Ciencias, Universidad del Tolima

Resumen
Las plantas medicinales son una fuente de conocimiento etnobotánico y etnomedicinal debido
a sus propiedades biológicas y terapéuticas. Cuentan con una composición química compleja,
estos extractos vegetales son mezclas de metabolitos secundarios y algunos de los principales
componentes químicos que se encuentran en ellas son monoterpenos y sesquiterpenos
incluyendo carbohidratos, alcoholes, éter, aldehídos y cetonas, los cuales son responsables de
las fragancias y de las propiedades biológicas de las mismas (García Luján, C. et al, 2010). Es
por ello que en el presente laboratorio se desarrollaron actividades de detección de algunos
metabolitos secundarios de plantas, así como su identificación por medio de análisis
organoléptico, la cuantificación de algunos compuestos y finalmente la elaboración de un
producto dérmico, con fines comerciales, a continuación se explica a fondo cada una de estas.
Introducción
Las prácticas de laboratorio son una herramienta en el aprendizaje para los estudiantes, ya que
brindan la posibilidad de entender cómo se construye el conocimiento dentro de la comunidad
científica, además aportan una mejor comprensión teórica en diversos contenidos aclarando
con mayor facilidad las dificultades presentada por los estudiantes, permitiendo cuestionar sus
saberes y confrontarlos con la realidad (Reyes aguilera, 2020). El diplomado en
Identificación, Producción, Transformación y Comercialización de Plantas Medicinales tiene
como objetivo principal generar procesos de transferencia de conocimiento de los elementos
más importantes relacionados con la bioprospección y bioactividades que se vinculan con el
mercado de las plantas medicinales para construir una cultura responsable con la salud pública
mediante la aplicación de conocimientos, habilidades, herramientas técnicas y legislativas para
conseguir llenar las expectativas del mercado de interés sin poner en riesgo al consumidor. Este
informe de laboratorio contiene la resolución de cuatro partes, la primera de ella fue la
detección de adulteraciones y/o falsificaciones en drogas homeopáticas y fitoterapéuticas, en
la cual el estudiante identifico drogas en polvo de una falsificación a través de pruebas
organolépticas y químicas. Posteriormente, se trabajó en la detección rápida de algunos
metabolitos secundarios, caracterización de una droga cruda y evaluación de su potencial
bioactivo con el fin de identificar los principales metabolitos secundarios presentes en extractos
de plantas medicinales y evaluar su potencial antioxidante in-vitro. La tercera parte del
laboratorio consistió en la cuantificación de compuestos fenólicos y actividad antioxidante con
el objetivo de determinar el potencial antioxidante de extractos obtenidos de plantas
medicinales. Finalmente se realizó la preparación de un producto fitofarmacéutico con el fin
de tener un acercamiento práctico a la elaboración de productos obtenidos de extractos de
plantas con fines comerciales. A continuación, se explicará cada una de las actividades
realizadas en el laboratorio con sus respectivos análisis.
 Metodología

Resultados y análisis
Parte 1. Detección de adulteraciones y/o falsificaciones en drogas homeopáticas y
fitoterapéuticas.
a. Análisis Organolépticos
# Muestra Color Olor Sabor Nombre

1 Tierra Hierba Amargo leve Llantén

2 Rojo Fuerte Picoso Ají

3 Marrón oscuro Fuerte Amargo fuerte Café

4 Marrón claro Dulce Dulce Canela

5 Blanco-amarillo Neutro Picoso Matandrea

6 Marrón Dulce Dulce Guayabita

7 Café Dulce Dulce Clavo

8 Café Neutro Hierba Cilantro

9 Amarillo arena Dulce Dulce fuerte Cardamomo

10 Verde oscuro Hierba Muy dulce Stevia

11 Verde claro Hierba Agrio Coca

Como conclusión de esta parte inicial del laboratorio debemos resaltar la importancia de
diferenciar sustancias. Los alimentos, frutas y especias observadas tienen características
específicas que las diferencian entre sí, en la práctica fueron identificadas por medio de estas
habilidades organolépticas, logrando identificar sabores, colores y colores distintos entre sí.
Esta actividad fue importante debido a que es importante reconocer las características de un
producto y sus componentes, para reconocer su estado original y posibles adulteraciones.
Parte 2. Detección rápida de algunos Benedict
metabolitos secundarios, caracterización de
una droga cruda y evaluación de su
potencial bioactivo

a. Método de extracción de para

Passiflora magdalena por
Ultrasonido

Ultrasonido durante 10 min con etanol al 96%

(extracción del perfil de metabolitos de una
muestra de Passiflora magdalenae). Resultado: Positivo, se observo un
Proporción: material vegetal: solvente: (1:10). precipitado de color verde oliva cuyo
tiempo de reduccion fue de 3 minutos. Es
b. Pruebas rápidas para la decir un rango de concentración ++
determinación de metabolitos: b1. equivalente a aproximadamente 1.0% de
Determinación de la presencia de azúcares reductores presentes en la
carbohidratos: Reactivo Molish muestra.

b2.Determinación de presencia de
saponinas
Prueba de espuma

Resultado: Positivo Esta prueba mide la

presencia de glúcidos o azúcares en la
muestra. El ácido sulfúrico hidroliza a
los polisacáridos, monosacáridos o
disacáridos y estos reaccionan con el α-
naftol generando una coloración Resultado: Negativo, en este caso la
violeta. En esta prueba se esperaba una espuma sobrenadante indicaría la presencia
coloración más violeta, sin embargo, si de saponinas en la muestra, y en el extracto
se notó la formación de un anillo en la no se observó espuma.
interfase de un color marrón.
Prueba de Rosenthaler presencia de taninos pirogálicos. Esta
prueba utilizada para determinar la
presencia de taninos en una muestra,
los taninos pirogalicos o hidrolizables
tienen propiedades antitumorales,
antidiabeticas, antitumorales y
regulatorias en procesos del
metabolismo humano.

b4. Determinación de la presencia

de flavonoides
Prueba de NaOH
Resultado: Un anillo azulado y un
anillo de color verde
Las saponinas de triterpenos
pentacíclicos y las sapogeninas
esteroidales, reaccionan con el
reactivo Rosenthaler el cual es un
compuesto de vainillina al 1% en
acido o-forforico al 10%, dando color
violeta en caso de reaccionar con
triterpenos o un anillo de color
verdoso en caso de ser sapogeninas
esteroidales, por lo que nuestro
resultado fue positivo para Resultado: Positivo, se observó un
sapogeninas esteroidales pero cambio de coloración a amarillo muy
negativo para saponinas triterpenicas. leve lo que indicaría una baja cantidad
de flavonoides en la muestra. Esta
b3. Determinación de la presencia prueba de hidróxido de sodio
de taninos reacciona ante la presencia de
Prueba de cloruro férrico flavonoides, los cuales son
metabolitos secundarios con actividad
antioxidante.

b5. Determinación de presencia de

Alcaloides
Reacciones de precipitación y
coloración

Resultado: Positivo virando a una

coloración azul oscuro, posible

Resultado:
Reactivo Tanred: Positivo, el
reactivo Tanred es una solución de
yoduro de potasio, mercurio II cloruro
y agua destilada.
Mayer: Positivo, este reactivo está
compuesto de forma similar al Tanred
pero con una mayor carga de
concentración de Yoduro de potasio.
Dragendorff: Positivo, el reactivo
está compuesto por Nitrato de bismuto
pentahidratado, ácido nítrico, yoduro
de potasio y agua destilada, y es
utilizado para revelar presencia de
alcaloides.
El resultado positivo en las tres
pruebas indican que el extracto de
Passiflora magdalenae contiene
alcaloides, los cuales son metabolitos
secundarios con diversas actividades
biológicas, desde antimicrobiana ,
psicoactiva, euforizante, hasta
intoxicante.
b6. Determinación de la presencia
de terpenos
Reacción de salkowski:
Resultado: Positivo, en el cual se
observó en la interfase anillos de color
azul verdosa, lo cual indica presencia
de carotenoides los cuales son
pigmentos naturales, y una leve
coloración amarilla con fluorescencia
verde lo que indica la presencia de
terpenos los cuales son metabolitos
característicos de propiedades
volátiles aromatizantes.
b7. Reconocimiento de polifenoles
con (FC): No se usó CaCO3 , se usó
Na2CO3.
Resultado: Positivo para polifenoles.
Como conclusión de la segunda parte
de este laboratorio pudimos observar
que la muestra de passiflora
magdalenae contiene carbohidratos,
probablemente en bajas
concentraciones, ya que los cambios
en la coloración no fueron tan
notorios, en cuanto a las pruebas para
identificar saponinas, ambos ensayos
fueron negativos, no se observó
presencia de estas, en contraste con la
prueba para de cloruro férrico la cual
fue positiva, es decir que hay presencia
de taninos pirógalicos, así mismo se
determinó la presencia de flavonoides,
alcaloides, terpenos y polifenoles.

Parte 3. Cuantificación de compuestos
fenólicos y actividad antioxidante
a. Método Folin-cioucalteu (FC):
Gráficas
Los compuestos fenólicos están presentes
en algunas plantas, estos son susceptibles
a la oxidación lo que los convierte en
compuestos con actividades
antioxidantes neutralizando las sustancias
con radicales libres. Utilizando los datos
de absorbancia obtenidos por el método
FC más la curva de calibración de ácido
gálico y la ecuación de la recta (y=
mx+b).
Se realizo el despeje de la fórmula para
hallar “X”, la cual equivale a
concentración de fenoles, “Y” equivale a
la absorbancia, “b” es el punto de
intersección y “m” la pendiente. Se logró
obtener las cantidades de concentración
de compuestos fenólicos en microgramos
por mililitro, obteniendo valores
positivos en las primeras cuatro
diluciones seriadas, comprobando la
presencia de compuesto fenólicos, sin
embargo en la última dilución seriada se
observó un resultado negativo, debido a
que la absorbancia no reconoció la
presencia de estos compuestos,
b. Actividad antioxidante - Actividad
inhibitoria de radical libre ABTS:
Gráficas
Ac= 0,5542 (Promedio de Abs
Blanco)
(Porcentaje de inhibición de radicales libres ABTS)
Una vez obtenidos los resultados de
absorbancia de cada solución seriada,
se procedió a realizar un promedio por
cada concentración, y a estos se les
aplicó una fórmula para obtener el
porcentaje de inhibición de radicales libres de , como el aceite de almendra que hidrata la piel
la solución ABTS. Observando la reacción en y le da una consistencia cremosa a la mezcla,
la placa Elisa concuerda con los resultados la manteca de cacao tiene propiedades
obtenidos. Los pozos de Passiflora emolientes y le da la consistencia semisolida,
magdalenae presentaban una coloración la vitamina E tiene propiedades antioxidantes
amarillosa-transparente, lo que indicaba una y el limoncillo le otorga propiedades
neutralización de los radicales libres presentes estimulantes del sistema nervioso y
en la solución ABTS que era de color azul. Se antiséptico.
observa que a mayores concentraciones mayor
porcentaje de inhibición de radicales libres,
los cuales van desde el 75.04% en la
concentración más alta, hasta 18.40% en la
más baja, comprobando la actividad
antioxidante de nuestro extracto.

Parte 4. Preparación de un producto

fitofarmacéutico
Preparación de una crema hidratante con
aceite esencial de Limoncillo y vitamina E.

Resultado: Se realizó un producto

fitofarmacéutico con manteca de cacao, aceite
de almendras y cera de abejas. El cual se
colocó a altas temperaturas para que se
mezclaran los componentes, seguidamente se
somete a bajas temperaturas para empezar el
proceso de solidificación y tomará una
consistencia cremosa semisólida, en este paso
se le adicionó el aceite esencial y la vitamina
E. Se considera fitofarmaceutico debido que
los componentes tienen propiedades
favorables para la salud y provienen de plantas
Bibliografía:
1. Aguilera, E. A. R. (2020). Prácticas de laboratorio: la antesala a la realidad. Revista
Multi-Ensayos, 6(11), 61-66
2. Ahued, M. G. (2014). Análisis sensorial de alimentos. PÄDI Boletín Científico de
Ciencias Básicas e Ingenierías del ICBI, 2(3).
3. Desai, S. D., Hadimani, G. A., Bagoji, I. B., Biradar, P., HM, N., & Hugar, S. (2015).
Evaluation of phytoconstituents of methanolic root extract of Withania somnifera.
Journal of Advanced scientific research, 6(1), 27-30.
4. Tolosa, L., & Cañizares, E. (2002). Obtención, caracterización y evaluación de la
actividad antimicrobiana de extractos de propóleos de Campeche. Ars Pharmaceutica
(Internet), 43(1-2), 187-204.
5. Fitri, A., Toharmat, T., Astuti, D. A., & Tamura, H. (2015). The potential use of
secondary metabolites in Moringa oleifera as an antioxidant source. Media Peternakan,
38(3), 169-175.
6. Blainski, A., Lopes, G. C., & De Mello, J. C. P. (2013). Application and analysis of the
folin ciocalteu method for the determination of the total phenolic content from
Limonium brasiliense L. Molecules, 18(6), 6852-6865.
7. Thaipong, K., Boonprakob, U., Crosby, K., Cisneros-Zevallos, L., & Byrne, D. H.
(2006). Comparison of ABTS, DPPH, FRAP, and ORAC assays for estimating
antioxidant activity from guava fruit extracts. Journal of food composition and analysis,
19(6-7), 669-675.
8. Muñoz Jáuregui, A. M., Ramos-Escudero, D. F., Alvarado-Ortiz Ureta, C., & Castañeda
Castañeda, B. (2007). Evaluación de la capacidad antioxidante y contenido de
compuestos fenólicos en recursos vegetales promisorios. Revista de la Sociedad
Química del Perú, 73(3), 142-149.
9. Andreae, W. A., & Van Ysselstein, M. W. H. (1956). Studies on 3-indoleacetic acid
metabolism. III. The uptake of 3-indoleacetic acid by pea epicotyls and its conversion
to 3-indoleacetylaspartic acid. Plant physiology, 31(3), 235.