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Revista Internacional de Volumen 2


Edición 2 /2012
Investigación Criminal 79-101

ENVENENAMIENTO CON CIANURO: DE LA FISIOLOGÍA A LA


QUÍMICA ANALÍTICA FORENSE

Andriana SURLEVA1*, Robert GRADINARU2,


Gabi DROCHIOIU2*,

1)Departamento de Química Analítica, Universidad de Tecnología Química y Metalurgia,


8” Kl. Ohridski” blvd., 1756 Sofía, Bulgaria
2)Facultad de Química, “Al. Universidad I. Cuza”, 11 Carol I, Ro-700506 Iasi, Rumanía

Resumen
La extrema toxicidad del cianuro, su amplia aplicación industrial así como su continuo uso ilegal generan interés de investigación
en diferentes campos de la ciencia, imponiendo un enfoque multidisciplinario para estudiar el envenenamiento por cianuro. Esta
revisión presenta nuevos datos sobre la exposición al cianuro, la toxicología y el desarrollo de antídotos. La investigación
relacionada con el cianuro en las ciencias ambientales y forenses, junto con la medicina, depende estrechamente de los logros
recientes en los métodos de determinación del cianuro. Se resumen los sistemas de detección de cianuro y los procedimientos de
pretratamiento de muestras recientemente informados para muestras ambientales, biológicas y de plantas. También se analizan
los requisitos principales de los sistemas analíticos para la determinación de cianuro y las tendencias en la investigación analítica.

Palabras clave: envenenamiento por cianuro; determinación de cianuro; antídotos contra el cianuro.

Introducción derivados, como las almendras amargas, las


Los cianuros comprenden una amplia gama hojas de laurel, los huesos de durazno y la
de compuestos de diversos grados de complejidad mandioca, se han utilizado como venenos letales
química y toxicidad, todos los cuales contienen un (Sykes, 1981). Los huesos de melocotón utilizados
resto CN, al que los humanos están expuestos en en las ejecuciones judiciales por los antiguos
forma gaseosa, líquida y sólida de una amplia gama egipcios se exhiben en el Museo del Louvre, París,
de fuentes naturales y antropogénicas. Diariamente, y un papiro egipcio se refiere a la "pena del
las personas pueden estar expuestas a niveles bajos melocotón". Los romanos usaban hojas de laurel
de cianuro de los alimentos, el tabaco y otras de cerezo como método de ejecución (también
fuentes. Las exposiciones letales a los cianuros conocida como “la muerte del cerezo”). Por
resultan únicamente de accidentes, suicidios u primera vez se produjo cianuro expresamente
homicidios. La inhalación de gas cianuro, con el propósito de matar durante la Primera
especialmente dentro de un espacio cerrado, Guerra Mundial, a finales de 1915 y principios de
presenta un riesgo significativo para la salud. La 1916 (Baskin et al., 2008).
ingestión de alimentos y bebidas que contienen Durante la Segunda Guerra Mundial, se
cianuro también puede causar efectos graves en la consideró que los nazis empleaban HCN (Zyklon
salud. B) para exterminar a las personas en los campos
El cianuro se ha utilizado como veneno de concentración. Se detectó cianuro en las
durante miles de años. Desde la época del paredes de los crematorios casi 50 años después
antiguo Egipto, las plantas que contienen cianuro (Baskin, 2001). El cianuro tiene

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sido el agente típico utilizado en las determinación en biológico fluidos,


“cámaras de gas” para la ejecución judicial también se revisan los objetos ambientales y
de asesinos, en las que se echa una sal de las plantas y se discuten las tendencias en el
cianuro en un ácido para producir HCN. El desarrollo de métodos.
cianuro a menudo ha sido utilizado por 1. Exposición al cianuro
individuos y grupos para cometer suicidio. Los compuestos que contienen cianuro,
Uno de los eventos más notorios ocurrió en principalmente cianuro de hidrógeno y cianuros de
1978 cerca de Port Kaituma, Guyana, cuando sodio o potasio, se utilizan ampliamente en la
los seguidores de Jim Jones bebieron una industria: en procesos de extracción de minerales
bebida con sabor a uva mezclada con para la recuperación de oro y plata, galvanoplastia,
cianuro, lo que resultó en la muerte de más cementación de acero, flotación de metales base,
de 900 niños y adultos (Thompsonet al., desengrasado de metales, teñido y impresión, en la
1987). producción de agentes quelantes, en la síntesis de
Hoy en día, el cianuro de sodio todavía se productos químicos orgánicos e inorgánicos. El
usa ilegalmente para pescar en algunos países cianuro de hidrógeno también se utiliza como
del sudeste asiático. La pesca con cianuro es un fumigante en barcos, vagones de ferrocarril,
método rápido para aturdir y recolectar peces, grandes edificios, silos de grano y molinos
pero la práctica causa daños irreversibles a los harineros, así como en la fumigación de guisantes y
arrecifes de coral. Desde la década de 1960, se semillas en cámaras de vacío.
estima que se han utilizado más de 1 millón de Las fuentes antropogénicas de
kilogramos de cianuro en los arrecifes de Filipinas liberación de cianuro al medio ambiente son
(Maket al., 2005a). diversas: desechos gaseosos o aguas
La producción anual de KCN es de residuales de las industrias de fabricación y
alrededor de 1,4 millones de toneladas y el 13% de procesamiento, emisiones de incineradores de
la misma se utiliza en procesos metalúrgicos de desechos sólidos municipales, quema de
refinación. Aunque la descarga de agua que biomasa, quema de combustibles fósiles,
contiene cianuro está estrictamente regulada y se incluidas las emisiones de vehículos (Baumet
recomiendan encarecidamente los procedimientos al., 2007), operaciones de fumigación y la
de pretratamiento, se han informado algunos producción de coque u otros procedimientos
accidentes industriales y descargas ilegales de de carbonización del carbón. El cianuro de
desechos (www.rainforestinfo.org.au). hidrógeno se forma durante la combustión
El envenenamiento por cianuro presenta uno de incompleta de polímeros que contienen
los desafíos más difíciles en medicina de nitrógeno, como ciertos plásticos, poliuretanos
desastres y ciencia forense, debido a su alta y lana (Koskinen-Soivi et al., 2005).
toxicidad, acción rápida, varias fuentes El cianuro de hidrógeno está presente en
posibles de exposición y algunas el humo del cigarrillo (Xuy otros., 2006;
limitaciones de los métodos analíticos para brunemannet al.,1977). Es una de las 44
la determinación de cianuro. El objetivo de sustancias dañinas en el humo del cigarrillo que
esta revisión es resumir las principales inhibe varias enzimas respiratorias y es un
fuentes antropogénicas y naturales de importante agente ciliatóxico, que causa cambios
liberación de cianuro al medio ambiente, las en el revestimiento epitelial de ciertos órganos
bases bioquímicas del envenenamiento por del cuerpo. La cantidad de cianuro en el humo del
cianuro y los antídotos disponibles para su cigarrillo puede afectar directamente la salud de
tratamiento. Los logros recientes en cianuro las personas, especialmente la

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sistema nervioso central. Los estudios de El contenido de cianógenos de los


trabajadores expuestos crónicamente al cianuro huesos de albaricoque y cereza es lo
de hidrógeno han informado una variedad de suficientemente alto como para causar una
efectos neurológicos inespecíficos que incluyen intoxicación aguda, especialmente en niños
dolor de cabeza, mareos y parestesias (Pritchard, (OMS, 2004; Akyildizet al., 2010; Barceloux, 2008).
2007). Estas características pueden persistir También se encontró cianuro en frutas de hueso
después de interrumpir la exposición. enlatadas (Barceloux, 2008; OMS, 2004).
principales naturales fuentes de Recientemente se informó una dosis peligrosa de
Los cianuros son más de 2600 especies de 20 granos de almendra que contenían 29 mg de
plantas, incluidas frutas y verduras que HCN/kg (Morandini, 2010). El envenenamiento del
contienen glucósidos cianogénicos ganado debido al glucósido cianogénico dhurrin
(cianógenos), que pueden liberar cianuro en el sorgo y en la hierba de Sudán está bien
por hidrólisis cuando se ingieren (Ganjewala documentado (Goffy otros., 2011). La linaza es un
et al., 2010; Bjarnholt et al., 2008; Barceloux, cultivo polivalente y su consumo es beneficioso
2008). Entre ellos, la yuca (tapioca, para la salud humana, pero algunos cultivares
mandioca) y el sorgo son alimentos básicos contienen altas concentraciones de cianógenos
para millones de personas en muchos países que restringen su dosis diaria o su uso en
tropicales. El cianuro de hidrógeno se libera mezclas de alimentos para animales (Herchiy
a la atmósfera también a partir de procesos otros., 2012; Bacala y Barthet, 2007).
biogénicos naturales de plantas superiores, Otros subgrupos con mayor potencial de
bacterias y hongos. exposición incluyen aquellos que se encuentran en las
La mayoría de la población está expuesta proximidades de emisiones accidentales o
a niveles muy bajos de cianuro en el ambiente intencionadas de fuentes puntuales, fumadores activos
general. Sin embargo, existen subgrupos y pasivos y víctimas de inhalación de humo relacionado
específicos con mayor potencial de exposición. con incendios. Los trabajadores pueden estar
Estos incluyen individuos involucrados en el expuestos a los cianuros durante las operaciones de
procesamiento a gran escala de yuca y aquellos fumigación y la producción y uso de cianuros en
que consumen cantidades significativas de muchos procesos industriales (OMS, 2004).
alimentos preparados incorrectamente que Probablemente la causa más común de
contienen glucósidos de cianógeno (OMS, 2004). envenenamiento por cianuro en el mundo occidental es
La raíz de yuca (tapioca) contiene una cantidad el humo inhalado en espacios confinados durante
suficiente de cianógenos para requerir un incendios que afectan edificios domésticos e
procesamiento especial para reducir el peligro de industriales (Lindsayet al., 2004). La mayoría de los
toxicidad (Bardbury & Denton, 2011). El límite estudios recientes respaldan una concentración de
máximo permisible de contenido de cianógeno cianuro en sangre de menos de 0,026 µg/mL en sujetos
en la harina de yuca es de 10 mg HCN/kg (OMS, sanos. La concentración elevada de cianuro en sangre
2004). Las porciones comestibles de las especies es una característica clínica de la inhalación de humo y
de plantas dietéticas comúnmente utilizadas en el gas de cianuro de hidrógeno inhalado puede resultar
los países europeos contienen niveles fatal. En casos de muerte por incendio, los datos
relativamente bajos de glucósidos de cianógeno, toxicológicos de las víctimas, como sus niveles de
aunque algunos huesos y semillas de frutas carboxihemoglobina y cianuro en sangre, pueden
comunes contienen concentraciones proporcionar al investigador de incendios evidencia
significativamente más altas. científica importante para promover una determinación
de la causa.

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Origen y causa del incendio. Como se discutió en la y potencialmente pueden ser utilizados en un
Guía para Investigaciones de Incendios y ataque terrorista. También se sigue utilizando en
Explosiones (NFPA 921, 2008): existe una relación casos de eutanasia ilegal (Blanco & Rivero, 2004).
entre la naturaleza de un incendio, es decir, latente, Recientemente, un informe de caso de una
flamígero, posterior al flashover y la producción de persona que no estaba muy familiarizada con los
gases tóxicos como el monóxido de carbono y el productos químicos, especialmente no con los
cianuro de hidrógeno. Sin embargo, la estabilidad cianuros, ha demostrado la adquisición de
del cianuro se cuestiona cuando el investigador información profesional a través de Internet, lo
tiene que interpretar los resultados toxicológicos de que permitió un suicidio con un procedimiento
las víctimas de incendios debido a los cambios en la complejo por inhalación de HCN (Musshoff et al.,
concentración de cianuro a lo largo del tiempo en las 2011).
víctimas post mortem y las muestras de sangre 2. Base bioquímica del envenenamiento por
almacenadas (McAllisteret al., 2008). Baum también cianuro
ha propuesto diferentes modelos de exposición al Los cianuros se absorben bien a través
cianuro a las emisiones de automóviles en áreas del tracto gastrointestinal o la piel y se
abiertas y cerradas.y otros. (2007). La concentración absorben rápidamente a través del tracto
de cianuro en el aire por encima del nivel de respiratorio. Una vez absorbido, el cianuro se
toxicidad aguda se obtuvo para un modelo de garaje distribuye rápida y ubicuamente por todo el
residencial: 192µg HCN/m33 cuerpo, aunque los niveles más altos se
encuentran típicamente en el hígado, los
más de 3 h de un automóvil en ralentí. pulmones, la sangre y el cerebro. No hay
Algunos medicamentos contienen acumulación de cianuro en la sangre o los
cianuro o sustancias que pueden convertirse tejidos después de una exposición crónica o
en cianuro dentro del cuerpo, por ejemplo, repetida (Baskinet al., 2008).
nitroprusiato de sodio (Na2Fe(CN)5NO) que a Altas concentraciones de cianuro
veces se administra por vía intravenosa mayo producen mareos, dolores de cabeza,
durante el tratamiento de cuidados inconsciencia y convulsiones con parálisis del
intensivos de la hipertensión. Sin embargo, centro respiratorio central. Las características
se han informado efectos tóxicos de este clínicas incluyen coma, paro respiratorio y
fármaco (Saniy otros., 2011), originalmente colapso cardiovascular. La toxicidad del ion
atribuido al resto nitroso o a varios cianuro está mediada principalmente por su
productos de descomposición como cianuro, alta afinidad por la fracción férrica del
tiocianato y nitrito. Se postuló que el átomo citocromoCoxidasa en las mitocondrias, un
de hierro del complejo de nitroprusiato componente clave en la respiración oxidativa.
reacciona con los grupos sulfhidrilo libres (- Esta interacción estable pero reversible
SH) en los eritrocitos y libera cianuro.en vivo bloquea la última etapa en la cadena de
por reacción no enzimática. transferencia de electrones, lo que resulta en
Las sales de cianuro como el cianuro de hipoxia celular y cambio de respiración celular
sodio (NaCN) y el cianuro de potasio (KCN) están aeróbica a anaeróbica, lo que lleva al
asociadas con la intoxicación por ingestión. Los agotamiento de ATP celular, acidosis láctica y
cianuros se utilizan como agentes suicidas pero muerte celular y tisular (Pritchard, 2007).
también homicidas (Gilly otros., 2004; Musshoffet La vía más importante de
al.,2011), particularmente entre los trabajadores excreción de cianuro es la formación
de la salud y de laboratorio, de tiocianato, que posteriormente se

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excretado en la orina. La formación de El sello biológico de la exposición al


tiocianato es catalizada directamente por la cianuro es la acidosis láctica y la alta
enzima rodanasa e indirectamente a través de concentración de oxihemoglobina en el retorno
una reacción espontánea entre el cianuro y los venoso. Una alta concentración de lactato en
productos de sulfuro de persulfuro de las plasma en víctimas de incendios sin quemaduras
enzimas. 3-mercaptopiruvato graves y en pacientes envenenados con cianuro
sulfurtransferasa y tiosulfato reductasa. Las vías puro es un indicador específico sensible y
menores para la desintoxicación del cianuro confiable de intoxicación por cianuro (Megarbane
implican la reacción con la cistina para producir et al., 2003). El cianuro de hidrógeno en el aliento
aminotiazolina- y también se ha sugerido como una herramienta
combinación de iminotiazolidinecarboxílico
ácidos ycon de diagnóstico para el envenenamiento por
hidroxicobalamina (vitamina B12a) para formar cianuro y para infecciones bacterianas
cianocobalamina (vitamina B12); estos productoras de cianuro (Stamyret al., 2009). El
productos finales también se excretan en la principal metabolito del cianuro, el tiocianato, se
orina (OMS, 2004; Baskin et al., 2008). considera más estable que el cianuro. en vivo,
Combinadas, estas rutas metabólicas pero puede introducirse por rutas distintas al
desintoxican 0,017 mg de cianuro por metabolismo del cianuro, lo que dificulta su uso
kilogramo de peso corporal por minuto en el como marcador de exposición al cianuro. El
ser humano promedio (1,19 mg/min en una cianuro también forma un metabolito menor,
persona de 70 kg) (Baskinet al., 2008; lindsayet 2-amino-2-tiazolina-4-
al., 2004). ácido carboxílico, que es relativamente estable y
Después de una única exposición breve a tiene un buen potencial como biomarcador de la
una baja concentración de cianuro de hidrógeno exposición al cianuro (Logueet al.,2005; Encestar
de la que una persona se recupera rápidamente, enet al., 2008). Recientemente, los aductos de
no se anticipan efectos a largo plazo para la proteína de tiocianato han sido propuestos como
salud. Se ha informado que la intoxicación un depósito a largo plazo de información sobre la
posterior a la ingestión deliberada de cianuro de exposición al cianuro (Yousoet al., 2010).
sodio o potasio causa un deterioro neurológico
grave. En algunos casos se ha observado una 3. Antídotos de cianuro
recuperación lenta de los síndromes de distonía El cianuro produce un inicio rápido de
grave que surgen de la intoxicación con cianuro toxicidad y por lo tanto requiere un
(Pritchard, 2007). tratamiento vigoroso e inmediato para
El cianuro es uno de los pocos agentes prevenir el síndrome tóxico. La eliminación
químicos que no sigue la ley de Haber, que rápida de una mayor exposición, la
establece que el Ct(el producto de la administración de medidas generales de
concentración y el tiempo) necesario para apoyo, incluido el oxígeno al 100 %, y la
causar un efecto biológico dado es constante administración de antídotos específicos en
en un rango de concentraciones y tiempos; por heridos en estado crítico revierten
esta razón, la LCt50 (la exposición a vapor o eficazmente los efectos de la exposición. Se
aerosol que es letal para el 50% de la población ha examinado una serie de antídotos más
expuesta) para una exposición breve a una nuevos, solos o junto con el tratamiento con
concentración alta es diferente de una tiosulfato de sodio, y se han clasificado en
exposición prolongada a una concentración tres grupos principales (Hally otros., 2009;
baja (Pritchard, 2007). Beatríz, 2007; Jones y Scott, 2008):

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(i) inductores de metahemoglobina: 4. Aspectos analíticos del envenenamiento por


el nitrito de sodio, el nitrito de amilo y el 4- cianuro: problemas y tendencias
dimetilaminofenol promueven la a) Determinación de cianuro en
formación de metahemoglobina que se muestras ambientales
une al cianuro y evita que se una a la La especificidad del cianuro como
citocromo oxidasa celular. Sin embargo, se contaminante ambiental es de especial
informa que actúan muy lentamente y se preocupación, debido a la diferente
asocian con efectos secundarios graves toxicidad de las sustancias que contienen
(Bhattacharya & Vijayaraghavan, 2002; cianuro, de un lado y del otro, al hecho de
Pritchard, 2007). que la cuantificación del cianuro depende
(ii) compuestos que contienen cobalto: del método analítico utilizado (Zhengy
edetato de dicobalto (EDTA de cobalto) e otros., 2003). Los contaminantes del
hidroxocobalamina. El cobalto actúa como cianuro se han clasificado oficialmente en
agente quelante del cianuro y el cianuro tres grupos principales según su toxicidad
combinado se excreta en la orina. Se ha y destino ambiental: (i) cianuro libre,
demostrado que el edetato de dicobalto es incluidos el HCN, los cianuros alcalinos y
potencialmente tóxico, pero recientemente se alcalinotérreos; (ii) cianuro disociable de
aprobó la hidroxocobalamina como un ácido débil (WAD) - un término colectivo
antídoto seguro y eficaz contra el cianuro (Des para cianuro libre y complejos metal-
Lauriersy otros., 2006; Fortíny otros., 2010); 2,
cianuro (Ag(CN) -Cu(CN)3- 4, CD(CN)24 -,
(iii) formadores de cianohidrina: alfa- Zn(CN)2-4, Hg(CN)2- 4, Ni(CN)2- 4,) cual
el cetoglutarato reacciona con el cianuro para libera fácilmente HCN en condiciones
formar derivados de cianohidrina no tóxicosy es ambientales ligeramente ácidas; y (iii)
papel prometedor como tratamiento alternativo cianuro total: cada fuente potencial de
por envenenamiento por cianuro ha sido reportado HCN independientemente de su origen
(Bhattacharya y Vijayaraghavan, 2002; (US EPA, 1992). El término “cianuro” se
Sultanay otros., 2011; tulsawaniy otros., refiere a todos los grupos CN que
2006). pueden determinarse analíticamente
Muchos de los antídotos existentes como iones cianuro (CN) a través de
para el envenenamiento por cianuro son medidas espectrofotométricas o
altamente tóxicos, particularmente cuando se electroquímicas, generalmente
administran en dosis tales que no quedan después de un pretratamiento
restos de cianuro sobre los que puedan actuar apropiado de la muestra para liberar
(Lindsayet al., 2004). A veces, los antídotos se iones cianuro (APHA, 1998). Las
administran antes de obtener los resultados de Agencias de Protección Ambiental han
los análisis de sangre y, por lo tanto, se impuesto niveles máximos de
encuentran en cantidades inapropiadas. A contaminantes (MLC) para la descarga
veces, la administración del antídoto se retrasa de cianuro al medio ambiente. Los
y el daño lo provoca el cianuro o los antídotos. MLC para el cianuro WAD varían de
Durante la demora entre el diagnóstico y la 0,05 a 0,07 μg/L para agua potable y
administración, el cianuro se ha metabolizado en el rango de 200-500 μg/L para
y la dosis requerida de antídoto se ha alterado aguas residuales (OMS, 1998). El MCL
invariablemente. para el cianuro total es mucho más
alto: 1 mg/L.

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los hechos mencionado encima Espectroscopia UV-Vis Se ha investigado


destacar las principales demandas de los mucho para intentar mejorar la selectividad, el
métodos de determinación de cianuro en objetos tiempo de análisis o desarrollar
ambientales: (i) alta sensibilidad para alcanzar el procedimientos respetuosos con el medio
MLC bajo; (ii) alta selectividad para analizar una ambiente. Drochioiu informó sobre un estudio
gran variedad de matrices; (iii) capacidad de comparativo de algunos ensayos
especiación para cuantificar cianuros tóxicos; (iv) espectrofotométricos nuevos y establecidos
implementación en dispositivos analíticos para el cianuro ambiental.et al.(2008a; 2011): (i)
portátiles para permitir el análisis in situ en el método de Aldridge y sus variantes con
tiempo real. En los últimos años, se ha informado piridina y pirazolona; (ii) método de
sobre una variedad de nuevos sensores de isonicotinatobarbitúrico que fue útil para
cianuro y métodos mejorados de determinación detectar cantidades diminutas de cianuroen
de cianuro. Sin embargo, no es fácil responder a vivo yin vitro; (iii) la reacción del ion cianuro
todos los requisitos anteriores. con la ninhidrina, que demostró ser rápida,
Recientemente, se publicó una revisión sencilla, altamente selectiva y libre de la mayor
que presenta los métodos disponibles para la parte de las interferencias, pero en condiciones
determinación de cianuro y evalúa su reductoras; (iv) ensayo basado en ácido pícrico
flexibilidad para la aplicación en analizadores que se describió como altamente selectivo,
portátiles automatizados (Surleva, 2009). Se pero aún menos sensible; (v) método
enfatiza especialmente el potencial de la combinado de resorcinol-ácido pícrico que
detección electroquímica en vista de su mostró una sensibilidad mejorada. Los logros
idoneidad para la automatización y la en la determinación de cianuro han sido
miniaturización. En dispositivos portátiles se ha revisados recientemente por Ma & Dasgupta
dado preferencia a la detección amperomérica (2010). Esta revisión presentó más de 80
a pesar de su baja selectividad, lo que requiere artículos publicados entre 2005 y 2009. Aunque
separación de cianuro y se ha aprobado los autores afirman revisar toda la literatura
oficialmente un método en línea por inyección publicada durante ese período, parece que
de flujo, intercambio de ligandos y detección están especialmente enfocados en las técnicas
amperométrica (US EPA, 2004). Recientemente de detección óptica. No obstante, presentamos
se han propuesto nuevos detectores selectivos aquí los nuevos artículos publicados desde
de cianuro por inyección de flujo obtenidos 2009 hasta 2012 (Tabla 1). Cabe mencionar la
mediante la técnica de deposición intensa investigación dirigida al desarrollo de
electroquímica de capa fina (Neshkovay otros., sondas combinadas colorimétricas y
2006; Surleva et al., 2007; Surleva y Neshkova, fluorescentes capaces de trabajar en medios
2008). Los sensores son totalmente 100% acuosos. Aunque queda mucho trabajo
competitivos con la detección amperométrica por hacer para proponer un método sólido,
en lo que respecta al límite lineal inferior, el estos sensores muestran un límite de
rendimiento de la muestra y la sensibilidad. detección muy bajo junto con una buena
Además, los detectores potenciométricos selectividad, pequeños volúmenes de muestra
ofrecen ventajas adicionales: respuesta y una respuesta rápida. Funcionan según el
selectiva (de modo que se podría omitir el paso principio de "apagado y encendido" y son
de separación y, por lo tanto, simplificar el extremadamente adecuados para dispositivos
equipo) y especiación de cianuro. Debido a la portátiles de señalización en entornos
alta sensibilidad de peligrosos.

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Tabla 1. Métodos analíticos para la determinación de cianuro en muestras ambientales,


publicados entre 2010 y abril de 2012 (bases de datos Science direct y Springer link)

LOD
RS recuperar
, rango, analizando
método D, y, objeto comentarios referencias
µg/m µg/mL tiempo
% %
L
grifo, mineral
0.00 0.01 – modo cinético abbasi et Alabama.,
espectrofotometría 2-4 97-109 4 y desperdicio
7 0.5 sin separación 2010
agua
Bebiendo membrana óptica Absalán et
espectrofotometría 0.11 0,26–6,5 2 - 7-10
agua sensor Alabama.,2010

oro potenciométrico y
plata nitrato Breuer et Alabama.,
- - - - - cianuración rodanina final-
valorimetría 2011
soluciones puntos
conductimetría
Bouyahiaet al.,
impedancia 0.16 hasta 1.3 - - - - biosensor de catalasa
2011
espectroscopia
citocromo CFukuet al.,
voltamperometría 0.11 0 – 0,26 - - - -
biosensor 2012
grifo y se utiliza la corrección β
Hamza et Alabama.,
espectrofotometría 0.16 0,05–2,0 2.3 99-109 5 Bebiendo para mejorar
2010
agua sensibilidad
isaad et Alabama.,
espectrofotometría Bebiendo agua soluble
0.03 - 4-8 95-105 10 2011un 2011en,
detección a simple vista agua quimiosensor
2011C, 2010
sin cubeta espacio de cabeza único-
0.00 0.03 – río, lago
microespectrofoto 3.9 97 8 soltar jainistay otros., 2010
4 0.5 y agua del grifo
métrica microextracción
AuNPs /Cu2+–
espectrofotometría abajo para Kim et Alabama.,
- - - - - fenantrolina
nanopartículas de oro 0.26 2010
sensor
borónico ácido-
espectrofluorimetría Bebiendo fluoresceína Kulchat et Alabama.,
0.52 - - 103 -
detección a simple vista agua sensor/dios3+ 2012
nanopartículas
a base de cumarina
espectrofluorimetría 0.00 Bebiendo
0.5-4.7 2 99 30 sensor; mezclado liet al., 2011
detección a simple vista 8 agua
solvente

DMSO/H2O
espectrofotometría mezcla, tiourea
0.03 - - - - - Linet al., 2011
detección a simple vista derivados establecido

sensor
a base de rodafluor
espectrofluorimetría 0.00 0.01-
- - - - sensor MeOH–H2 Lvet al., 2011
detección a simple vista 1 0.08
solvente
modificado vidrioso
0.00 0.001 - industrial Norozifar et
voltamperometría 1.4 98-104 - carbón electrodo/
02 3.9 aguas residuales Alabama., 2011
nanopartículas de agricultura

a base de tiourea
espectrofotometría sensor Odagoet Alabama.,
- - - - - -
detección a simple vista no acuoso 2010
medio

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Andriana SURLEVA, Robert GRADINARU, Gabi DROCHIOIU

a base de cumarina
espectrofotometría sensor parque & Kim,
0.06 - - - - -
espectrofluorimetría solvente (DMSO/ 2012
H2O)
fluoresceína-
espiropirano Sumiya et Alabama.,
espectrofotometría 0.13 0.13-0.4 - - 5 -
conjugado; solvente 2012
H2O/MeCN
diferencial Saleh &
inyección secuencial
electrolítico - - 1.4 - 3 agua Abulkibash,
valoración
potenciometría 2011
dual colorimetric-
espectrofotometría 0.03 Tsui et Alabama.,
0.13-1.3 - - - sonda fluorescente
espectrofluorimetría 9 2012
disolvente EtOH/H2O
nanocables formación

agua del grifo; biosensor ácido


voltamperometría 0.00 0.002– Wanget al.,
2 -5 98-102 - agua de rio destilación y
06 0.08 2010
absorción de álcali de
HCN
automático
biodetector acoplado 0.00 0.001- estimación general Woznicaet al.,
- - - agua
con oxígeno 5 0.01 de toxicidad del agua 2010
electrodo
naftalimida
espectrofotometría
- - - - - - sensor basado; 100% xuet al.,2010
espectrofluorimetría
medio acuoso
dispersión raman 0.03 CuI evaporado delgado
0.04 - 4 - - 5 - Yan et al., 2010
espectroscopia 1 sustrato de película

galvanoplastia
& Yarí &
selectivo de iones 0.00 0.0005- lleno de plata
3 102 - fotográfico Sepahvand,
potenciometría 03 2600 nanotubos de carbon
desechos; grifo 2011
agua
solvente CH3CN-
espectrofluorimetría - - - - - - Yuy otros., 2010
H2O
ion tratado con NaOH
cigarrillo
cromatografía/ 0.00 0.015 – 5.2 cambridge filtrar zhang et Alabama.,
94-101 25 convencional
amperométrico 3 2.5 0 por HCN 2011
humo
detección absorción
espectrofotometría 0.00 Zhou et Alabama.,
- - - 1 - medios no acuosos
espectrofluorimetría 5 2012

b) Determinación de cianuro en muestras de alimentos como la yuca, la cereza o la


biológicas almendra. La concentración de cianuro en
Los fluidos humanos contienen cianuro sangre es información esencial en medicina y
debido a diferentes fuentes de exposición al ciencia forense. Aunque el estado de los
cianuro. Aparte de la terapia con nitroprusiato de objetos de análisis es completamente
sodio (como agente hipotensor) y la ingestión de diferente, los análisis médicos y forenses de
sal de cianuro en el contexto de intentos suicidas cianuro tienen las mismas dificultades:
u homicidas, las principales fuentes de exposición (i) Primero, almacenamiento de muestras y
son el humo de los incendios o el tabaquismo, la el pretratamiento afecta significativamente los
inhalación accidental de ácido cianhídrico en las resultados del análisis. Antes de la detección, el
industrias del metal y el plástico, e ingestión de cianuro necesita separarse de la hemoglobina. Esta
varios tipos separación es más comúnmente realizada por

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ENVENENAMIENTO CON CIANURO: DE LA FISIOLOGÍA A LA QUÍMICA ANALÍTICA FORENSE

acidificación mediante microdifusión en una los últimos logros en la determinación de


celda de Conway o transporte de nitrógeno a cianuro en muestras biológicas informados
una solución trampa alcalina. El proceso de después de 2004 (Cuadro 2).
acidificación es propenso a errores debido a la En un intento por mejorar la eficiencia
liberación incompleta oa la producción artificial y la precisión de los procedimientos de
de cianuro. pretratamiento de la muestra, se propusieron
(ii) Segundo, métodos estándar para una microextracción en fase líquida con
La determinación de cianuro en sangre requiere espacio de cabeza protegido por fibra hueca,
mucho tiempo y no puede proporcionar datos una microextracción de una sola gota con
adecuados en tiempo real. Muchos de los métodos espacio de cabeza o una extracción líquido-
descritos en la literatura son muy sensibles, pero no líquido sobre soporte sólido combinada con
tienen límites de calibración superiores lo electroforesis capilar o separación
suficientemente altos como para ser utilizados en cromatográfica. Un enfoque interesante para
muertes por cianuro. Además, el ensayo de cianuro la liberación de cianuro sin acidificación es una
tiene que diferenciar entre cianuro unido y no unido degradación enzimática de cianuro libre y
para proporcionar datos para la administración de complejado (Maket al., 2005a,b).
antídotos contra el cianuro. Otra dirección de investigación
Los especímenes post mortem más está dirigida al desarrollo de sistemas de
Los que se analizan con frecuencia en busca de detección sensibles y selectivos. El límite
cianuro en toxicología forense son la sangre, el de detección más bajo de 0,3 ng/mL se
bazo, el hígado y el cerebro. Las concentraciones informó para la electroforesis capilar con
de cianuro en sangre inferiores a 0,25 µg/mL se detección UV (Menget al., 2009).
consideran normales, y aquellas entre 0,25 y 2–3 La concentración lineal más amplia
µg/mL como elevadas, pero que normalmente no rango se reporta para gas
causan la muerte. Las concentraciones superiores cromatografía/espectrometría de masas:
a 3 µg⁄mL son consistentes con la muerte en 0,05 - 10 µg/mL (Frisony otros., 2006) y 0.1–
ausencia de otros hallazgos relevantes o 20 µg/mL (Liuet al., 2009).
toxicológicos (Gambaroet al., 2007). Los tejidos Lindsay y O'Hare (2006) describieron
animales son otros objetivos forenses para el un sensor electroquímico modificado con
análisis, especialmente cuando se trata del uso nafion altamente selectivo para la
ilegal de compuestos de cianuro en el medio determinación de cianuro a pH fisiológico sin
ambiente (Maket al., 2005a). Por lo tanto, la separación, pero se necesita una validación
determinación de cianuro en análisis forenses y el adicional en muestras de sangre. Se estudió la
monitoreo de cianuro a niveles muy bajos son de inestabilidad del cianuro en muestras de
gran importancia (Mengy otros., 2009). sangre post mortem y se propuso agregar
fluoruro de sodio a las muestras de sangre
Las técnicas analíticas para la obtenidas de víctimas de incendios para
detección de cianuro en sangre publicadas reducir la inestabilidad del cianuro debido a la
antes de 2004 han sido revisadas críticamente actividad bacteriológica (McAllisteret al., 2011).
por Lindsayy otros. (2004). Aquí presentamos

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Andriana SURLEVA, Robert GRADINARU, Gabi DROCHIOIU

Tabla 2. Métodos analíticos para determinación de cianuro en muestras biológicas reportados


entre 2004 y abril de 2012 (bases de datos Science direct y Springer link)

LOD, recuperar
rango, DSR,
método µg/m y, objeto comentarios referencias
µg/mL %
L %
espectrofluorimetría Detección radiométrica y Baduguet Alabama.,
0.26 0,39 - 2,2 - - -
espectrofotometría basada en la vida útil 2004a; 2004b
gas
cromatografía/
Sangre pura espacio de cabeza en fase sólida Boadas-Vaelloet
nitrógeno 0.003 - 12 -
(ratones) micro-extracción Alabama., 2008
fósforo
detección
gas
cromatografía/ 0,01 - 0,2
0.01 3-7 84–96 Sangre pura extracción de espacio de cabeza Felby, 2009
captura de electrones 0,2 - 1,0
detector
gas
0.006 todo humano fase sólida Frisón et Alabama.,
cromatografía/ 0.05 - 10 8 80
sangre microextracción 2006
espectrometría de masas

0.2 0.5 - 10 8 - Post mortem Conway gámbaro et Alabama.,


espectrofotometría
muestras de sangre celda de microdifusión 2007
gas
cromatografía/
Post mortem espacio de cabeza automatizado gámbaro et Alabama.,
nitrógeno- 0.05 0.05 - 5 14 91
muestras de sangre extracción 2007
fósforo
detector
capilar humano saliva
0.007 - espacio de cabeza de una sola gota Jermak et Alabama.,
electroforesis/ 0.002 - 92 - 106 y orina
0.52 microextracción 2006
espectrometría UV muestras

lindsay &
sangre de membrana-nacional
amperometría 0.1 hasta 1.3 - - O'Hare,
víctimas quemadas electrodo revestido
2006
gas
plasma y extracción líquido-líquido
cromatografía/ 0.04 0,1–20 7 91 - 116 Liuet al., 2009
orina en soporte sólido
espectrometría de masas

inyección de flujo
0.013 - Conejo entero diseño de chip fluídico
quimioluminiscencia 0.019 2 98 Lvet al., 2005
1.3 sangre destilación ácida
mi
degradación enzimática
electroquímico mak et Alabama.,
0.18 0,78 - 7,8 - - tejido de pescado de cianuro libre y
biosensor 2005a
complejado
degradación enzimática
espectrofotometría mak et Alabama.,
0.029 0,26 - 2,6 tejido de pescado de cianuro libre y
indirecto 2005b
complejado
capilar no fumadores
protegido con fibras huecas
electroforesis/ 0.000 0.003 - y fumadores Meng et Alabama.,
6 92 - 103 espacio de cabeza en fase líquida
ultravioleta 3 0.52 orina y 2009
microextracción
espectrofotometría saliva
electropulverización CN-+ NaAuCl4para
orina de la victima
ionización 0.003 - producir dicianooro, Minakata et al.,
0.001 13 96 - 117 contenido gástrico
tándem masa 1.3 Au(CN)-2 seguido por 2009, 2011
sangre
espectrometría extracción
capilar
lisado en el capilar enzimático Papezova &
electroforesis/
0.08 0.4 - 13 3 93 - 106 eritrocitos reacción de CN-con glatz,
ultravioleta
muestras rodana 2006
espectrofotometría

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gas fumador y
0.026 - determinación indirecta Yousoet al., de la
cromatografía– 0.003 - - no fumador
2.6 exposición al cianuro 2010
espectrometría de masas plasma
identificando el origen
relación isotópica masa comida, bebida,
- - 1-7 94 - 105 de Téet al., 2012
espectrometría medicamento
cianuro

c) Determinación de cianuro en plantas Las autoridades dispositivos analíticos para pequeñas granjas de plantas es

de salud humana prestan especial atención a de especial importancia.

los cianógenos como constituyentes tóxicos de los Algunos resúmenes de los métodos
alimentos, ya que algunas plantas cianogénicas son para la determinación de glucósidos
alimentos básicos en algunos países y la población está cianogénicos (aunque no exhaustivos) se
expuesta a un alto nivel de riesgo de intoxicación por pueden encontrar en Herchiet al.(2012),
cianuro. El análisis de plantas y la estimación de su Ganjewalaet al.(2010) y Bjarnholtet al.(2008).
contenido de cianógeno tienen problemas específicos En la Tabla 3 se presenta una revisión de los
relacionados con la necesidad de: (i) hidrólisis y métodos recientes para la determinación de
separación de cianógenos o cianuro producido a partir cianógenos, publicados entre 2000 y 2012.
de matrices complejas, y (ii) sistemas de detección
sensibles. La mayoría de las enfermedades relacionadas
con el cianuro se registran en países en desarrollo, por
lo que la disponibilidad de

Tabla 3. Métodos para la determinación de glucósidos cianogénicos en plantas y cianuro en alimentos


publicados desde 2000 hasta abril de 2012 (bases de datos Science direct y Springer link)
cianogénico
Método matriz/muestra analito pretratamiento de la muestra Nota referencias
compuestos
CG sorgo; hidrólisis (121oC),
total Goffet Alabama.,
espectrofotoma hierba de sudán; dhurrin extracción en fase
cianuro 2011
tratar forraje líquida y sólida
espectrofotoma rango 0.08-
amigdalina total alcalino extracción; Tatsuma et
prueba enzimático raíz de mandioca 2,6 µg/ml prueba
linumarina cianuro hidrólisis encimática Alabama.,2000
ensayo platos
picrato sábana enzimático hidrólisis no lineal
amigdalina total Abban et
ensayo de estado sólido - (pH 6-8) espacio de cabeza respuesta
linumarina cianuro Alabama.,2011
detección extracción placas de prueba

GC-electrón
hojas de yuca linamarina
captura/foto total Curtiset Alabama.,
trébol lotaustralina extracción de espacio de cabeza LOD 69 ng/mL
nización cianuro 2002
eucalipto prunasina
detección
espectrofotoma
tratar
hidrólisis encimática saka &
cloramina T/ linamarina total
raíces de yuca (fosfato pH 7); Nyirenda,
barbitúrico/ lotaustralina cianuro
30oC; 15' 2012
isonicotínico
ácidos

espectro- hidrólisis encimática,


linamarina total bradbury &
fotometría hojas de yuca tampón de fosfato (pH
lotaustralina cianuro Dentón, 2011
papel picrato 6,5)
Espectrofotoma semillas de lino, piedras amigdalina hidrólisis encimática; LOD 0.05
total Drochioiuet
intento de durazno, ciruela, linustatina pH 10; 16 horas; 30oC µg/mL
cianuro Alabama., 2008
resorcinol/picra nectarina, neolinustatina NaHCO3extracción rango: 0–5

90 Revista Internacional de Investigación Criminal, 2,2, 79-101

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Andriana SURLEVA, Robert GRADINARU, Gabi DROCHIOIU

el método albaricoque, manzana µg/mL


semillas 9 X 103
L/mol·cm
espectrofotoma
total enzimático rango 0.1- 50 Bradbury, µg/
tratar harina de yuca linumarina
cianuro hidrólisis mL 2009
método picrato
LOD 8 ng/mL
espectrofotoma hidrólisis encimática,
almendra, manzana amigdalina rango: 0.02- Surleva &
tratar total NaHCO3 extracción,
semilla, linaza, linustatina 1,0 µg/ml Drochioiu,
ninhidrina cianuro microdifusión
granos de ciruela neolinustatina ε 1.4x105 2012
método separación
L/mol·cm
mandioca, linaza
linumarina Hidrólisis ácida:
semilla, sorgo,
dhurrin pérdida de HCN
gigante taro
amigdalina necesidades de
espectrofotoma hojas, piedras de hidrólisis encimática Haque &
linustatina total extrapolación.
tratar Durazno, ciruela, en kit picrato; bradbury,
neolinustatina cianuro enzimático
método picrato nectarina, hidrólisis ácida 2002
trigloquinina hidrólisis:
albaricoque, manzana
taxifilina recuperación 101.9
semillas
prunasina % (DE 0,64)
brote de bambú
electroquímico
ácido destilación y LOD 0,6 ng/mL
hidroxiapatita vino destilado, total Wanget Alabama.,
- álcali absorción de rango 2–80
nanocables almidón de mandioca cianuro 2010
HCN ng/mL
biosensor de matriz

FIA LOD 18 ng/mL Ketterer&


total lote extracción,
amperométrico extracto de planta - rango 0.02-21 Keusgen,
cianuro hidrólisis encimática
biosensor µg/mL 2010
vid prunasina total francoset al.,
LC–MS/MS hidrólisis encimática
cultivares sambunigrin cianuro 2005
linamari extracción ácida con Sornyothaet
HPLC raíz de mandioca linamarina
norte H2ENTONCES4 Alabama., 2007

sorgo; De Nicolaet
HPLC dhurrin dhurrin extracción de metanol
pasto de sudán Alabama., 2011

linustati Bacala &


linustatina metanol y etanol Barthet, 2007
CG
norte
Semilla de lino sub-nanogramo
neolinustatina neolinusta extracción Barthet y
estaño Bacala, 2010
cromatografía de gases GC; LC – cromatografía líquida; MS – espectrometría de masas; FIA – análisis de inyección de flujo.

Las principales tendencias en la métodos cromatográficos (Tabla 3 y Herchiet


investigación sobre la determinación de al.,2012, Ganjewalaet al.,2010, Bjarnholtet
cianógeno podrían resumirse como: (i) desarrollo al.,2008). Una ventaja del método
de un procedimiento de pretratamiento de cromatográfico es la cuantificación de
muestras adecuado para una amplia gama de glucósidos cianogénicos en su forma nativa.
matrices y un gran número de cianógenos; (ii) Su amplia aplicación está limitada por la falta
desarrollo de procedimientos eficientes de de estándares de glucósidos cianogénicos o
liberación y separación de cianuro; (iii) desarrollo por su alto costo.
de sistemas de detección sensibles y selectivos La determinación indirecta de glucósidos
adecuados para el análisis de pequeñas cianogénicos, también conocida como
cantidades de muestras; (iv) desarrollo de determinación del potencial cianogénico de la
equipos de bajo costo y fácil mantenimiento. planta, se basa en la cuantificación del HCN liberado
Los glucósidos cianogénicos se pueden después de una reacción ácida o enzimática.
determinar directamente mediante varios

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hidrólisis de glucósidos de cianógeno (Tabla 3). el antídoto se puede determinar fácilmente. La


vida media fisiológica del cianuro libre es corta y
La extracción eficiente y la hidrólisis la concentración puede verse afectada por las
completa son la clave para la determinación condiciones de almacenamiento y muchos otros
precisa de los cianógenos de las plantas. La factores. Es crucial analizar rápidamente tales
detección espectrofotométrica después de muestras, si es posible.en el lugar.
diferentes reacciones de formación de color es La misma exigencia la impone también
la más utilizada en la determinación de la ecología. Debido a la diferente toxicidad de
cianógenos totales: ensayo de papel picrato los contaminantes industriales que contienen
(Bradbury & Denton, 2011; Bradbury, 2009; cianuro, se deben aplicar diferentes
Burnset al., 2012), detección de estado sólido procedimientos de desintoxicación para que el
basada en picratos (Abbanet al., 2011; Brimeret equilibrio ecológico no se altere a gran escala.
al., 1998; Haque y Bradbury, 2002); método
combinado de picrato/resorcinol (Drochioiuet Rápidamente disponible y altamente
al., 2008b), método de cloramina T/ácido de confianza información sobre el cianuro
barbitúrico/ácido isonicotínico (Saka & se requiere contaminación para este propósito.
Nyirenda, 2012). Recientemente, el método Debido a la importancia para las
basado en ninhidrina se ha modificado aplicaciones clínicas, forenses y, muy
especialmente para la determinación de probablemente, de seguridad y antiterrorismo, se
cianógenos totales en plantas (Surleva & ha vuelto urgente establecer analizadores de
Drochioiu, 2012). Se combinó una hidrólisis cianuro de "punto de atención" rápidos,
enzimática espontánea (a pH 6-8) con sensibles, específicos y robustos.
extracción mediante solución de bicarbonato o Las nuevas sondas colorimétricas/fluorimétricas

separación por microdifusión. El método es que funcionan con el principio de "encender y encender"

rápido, barato y respetuoso con el medio son muy prometedoras para usarse en pequeños

ambiente. Se han utilizado reactivos no tóxicos. dispositivos de alarma o pruebas puntuales.

No se necesitó capacitación especial ni Sin embargo, se necesita mucha


instrumentación sofisticada. investigación para validarlos en muestras reales,
por ejemplo, aire, aguas naturales, aguas
Conclusiones residuales industriales, fluidos biológicos como
orina, sangre, saliva, etc.
Esta revisión proporciona un buen
ejemplo de cómo las demandas de la ecología, Agradecimientos
la ciencia forense y la medicina motivan la
investigación y el desarrollo de nuevos Andriana Surleva agradece a la
métodos analíticos e instrumentación. Agencia de Universidades Francófonas
El análisis rápido de cianuro en sangre o (l'Agence Universitaire de la Francophonie)
aliento está maduro para nuevos enfoques por un gran posdoctorado “Eugen Ionescu
atractivos. Existen antídotos de acción rápida 2011-2012”.
para el envenenamiento por cianuro, ya sea por Roberto Gradinaru y gabi
inhalación de humo o exposición a un arma Drochioiu reconoce el apoyo financiero
terrorista. Es vital determinar los niveles de de la Unión Europea y el Gobierno
cianuro en la sangre o respirar de forma rápida y rumano a través de la European Social
precisa para que una dosis adecuada de

92 Revista Internacional de Investigación Criminal, 2,2, 79-101

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Andriana SURLEVA, Robert GRADINARU, Gabi DROCHIOIU

Fondo POS DRU 2007-2013, Contrato POSDRU/86/1.2/S/62307.

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