Boi. Soc. Chil. Guím.

, 42,371-377 (1997) ISSN 0366-1644

FTTOBENTOS COMO BIOINDICADOR DE METAI-ES PESADOS

SILVIA BASUALTA MUÑOZ| Y JAIME TAPIA SANHIJEZA2

lUniversidad de Concepción, Centro EULA.

2Universrdad de Talca, lnstituto de Química de Recursos Naturaies.

(Recibido: 1411119A -Aceptado: Julio 4, 1997)

RES¡.JMEN

Se utilizó el fitobentos corno bioindicador de metales pesados en dos cuerpos de

agua de la Vli Begión (Chile), considerando tramos sometidos a distintas activida-
des antrópicas. La principal ventaja de utilizar el fitobentos como indicador biológi-
co, radica en el hecho que estos organismos son sensibles a los cambios arnbien-
tales, proporcionando su análisis químico una estiniación indirecta de la concentra-
ción del contaminante en el ambiente inrnediato. La incorporación intracelular de
ciertos metales en organismos acuáticos, facilita en parte su persisiencia ambiental
permitiendo que puedan ser acumulados por organismos que t¡enen como hábitat
el ecosistema acuático sujeto a estudio.

Se determinó las concentraciones de cromo, manganeso, cobre y cinc en muestras

de fitobentos y su agua circundante utilizando metodoiogías analíticas de alta sen-
sibilidad, como la espectroscopía de absorción atómica con horno de grafiio. Para
la validación de ia metodologia se utllizó material de referencia ceñificado, prove-
niente ciel National Research Council (NRC), Canadá y del National institute cÍ
Standarcjs and Technology (NIST), USA, para las muestras de agua y fitobentos,
respectivamente. Los resultados indicai'on una correiación entre el contenido de
metales en agua y en el fitobentos en diversos sectores impactados por la actividad
industrial.

SUMNflARY

The phytobenthos were used as bioindicator of heavy metals in two bodies of water
of the Vll Region (Chile), considering tracts sub.jected to different anthropic activities.
The main advantages of using phytobenthos as biological indicator, reside in the
fact that they are sensitive organisms to environmental changes, proportioning their
chernical analysis an indirect estimation of the concentration of pollutant in the
immediate environment. The intracellular incorporation of certain metals in aquatic
organisms that have as habitat the aquatic ecosystem subject to study, facilitates
their environmental persistence,

The concentratlons of chromíum, rnanganese, copper and zinc y¡ere determined in

both phytobenthos samples and in its surrounding water using analytical
methodologies of high sensibility, such as the atomic absorption spectroscopy wíth
grafite furnace. Certifíed reference material obtained from the l.iational Research
Council (NRC), Canada, and the National lnstitute of Standards and Téchnology
(NIST), USA, were used as validation of the methodology for the phytobenthos and
water samples, respectively.

The results indicate a correlation between the content of heavy meials in

phytobenthos and those places more impacted for the industrial activity.
 Boi. Soc. Chil. Quím., Vcl. 42, N, 3 (1997)

INTROD!JCCION

En Chile, existen varios rÍos expuestos a los efectos tóxicos cle compuestos químicos, entre
ellos metales pesados provenientes de actividades industriales y agroforestaies, causando un impor-
tante deterioro del ambiente acuático.

El río Claro, es uno de los principales recursos hídricos de Ia ciudad de Talca (Vll Región,
Chile) y recibe el impacto de las descargas domésticas e industriales a través del canal Baeza y del
estero Piduco, que cruzan la ciudad de oriente a poniente. En su trayectoria, reciben principalmente
los efluentes relacionados con industrias de cuero, ias cuales eliminan cantidades considerables de
cromo, sulfuro y materia orgánica. Además, reciben los residuos provenienles de industrias de ali-
mentos y de plantas impregnadoras de madera, las que eliminan cantidades considerables de sales
de cobre, cromo, arsénico, boro y pentaclorofenol.

El interés en determinar el contenido de ciertos metales pesados en diversas matrices am-

bientales, como agua, sedimento, organismos y otros, se debe fundamentalmente ai grado de toxici-
dad gue se le asocia a estos metales. Así por ejernplo, cromo(Vi) en dosis altas (5 mg/L) ha sido
señalado como causa de cáncer pulmonar y del tracto digestivo en ei hombrel,2,3). Asimismo, el
cobre, manganeso y cinc se consideran tóxicos para la vida acuática a niveles mayores de concen-
tracióna).

Durante los Últimos años, ha existido un creciente interés por optimizar rnetodologías analí-
ticas que permitan cuantificar el contenido de metales pesados a nivel de trazas en diversós tipos Ce
matrices. Tales metodologías deben poseer las características de alta precisión, exaciitud y selecli-
vidad, con objeto de acercarse a los valores reales de la presencia de estos contaminantes en el
-el
ambientes,6).

Actuaimente, estudios relacionados con Ia contaminación por metales pesados en sistemas

fluviales se han orientado a la utilización de indicadores biológicos, ya que estos poseen ia capacidad
de acumular sustancias polutantes que se encuentran en el medio acuático, propor.cionando su aná-
lisis una estimación indirecta de la concentración de tales sustancias en el ambiente ¡nr¡s¿¡¿¡67,8,9,10)

El objetivo de la presente investigación es deterrninar los contenidos de cromo, rxanganeso,

cobre y cinc en dos cuerpos de agua de la Vll Región, Chile, en sectores sornetidos a distinta activi-
dad antrópica. La cuantificación de los metales se realizó en muestras de mlcroalgas (fitobentos) y
su agua circundante. Se correlacionó los resultados de ambas matrices para demostrar !a importan-
cia del fitobentos como bioindicador de metales.

EXPERIMENTAL
Area de estudio

Considerando las características del río Claro y el estero Piduco como tributario, además de
las actividades antrÓpicas que son fuentes potenciales del ingreso de elementos nocivos, se conside-
ró 4 estaciones en las cuales se colectó muestras de agua y fitobentos en julio de i gg4 y septiembre
de 1995.

TABLA l. Estaciones de muestreo y sus características.

Zona control, sector cordillerano sin actividad anl

2 Zona urbana con descargas principalmente domésticas
3 Zona con descargas industriales y domésticas
4 Zona con descargas principalmente industriales

372
 Boi Soc. Chit. Quím., Ya1. 42, N'q 3 (1997)

Obtención de fitobentos

Se obtuvo 4 muestras de fitobentos con 4 réplicas cada una en los diferentes sectores del
río. Las muestras de fitobentos fueron obtenidas mediante el raspado directo de las rocas sumergi-
das con espátula de teflón. Cada una de las muestras fue subdividida en dos partes: la primera
destinada a fa cuantificación de los metales y la segunda, a la identificación taxonómica de las princi-
pales especies presentes en cada sector. Las muestras se mantuvieron refrigeradas a 4"C en enva-
ses de polietileno hasta sus respectivos análisis.

Obtención de las muestras de agua

Las muestras de agua fueron colectadas en envases de polietileno en las mismas zonas
donde fue colectado el material biológico. Cada muestra puntuai estuvo constituida por la mezcla
homogénea de dos submuestras de igual volumen, extraída de la superficie y a una profundidad
api"oximada de 40 cm. Posteriormente, fueron filtradas en un sistema de poiicarbonato, utilizando
filtros de 0,45 pm de porosidad. Ei filtrado fue acidificado con HN03 s.p. (1 mlil) y preservado a 4"C
hasta su análisis.

Tratamiento químico

Las muestras de fitobentos fueron separadas y concentradas mediante filtros de 0,45 pm de

porosidad. Posteriormente, fueron lavadas con agua bidestilada y secadas hasta peso constante
durante 24 horas. Luego, se sometió |os filtros y 50 ml de agua bidestilada a ultrasonido para liberar
completamente el material adherido a ellos. El filtro se lavó y secó hasta peso constante. La canti-
dad de muestra a analizar (0,10 - 0,30 g) se determinó por diferencia de peso entre el f iltro seco con
y sin muestra de microalga. La suspensión resultante se trató con 5 ml de ácido nítrico s.p., llevando
a casi sequedad por calentamiento bajo constante agitación. Enseguida, la suspensión fue filtrada y
los insolubles lavados. La solución resultante fue completada a un volumen de 25 ml. En forma
paralela se trabajó con soluciones blanco y maierial de referencia cerlificado de ho.las de espinaca
(SRM 1570), considerando que su matriz es similar a la del f itobentos.

Determinación de Cu, Cr, Mn y Zn

Para la determinación de ios metales en agua, se trabajó bajo campana extractora utiiizan-
do una placa calefactora caiibrada a 90'C, se preccncentró 300 ml de muestra acidificada con 1 ml
de HNO3 s.p. hasta casi sequedad, completándose a L'rr volumen finai de 25 ml en matraz volumétrico
pretratado. En forma paralela se trabajó con soluciones bianco y material de referencia certificado de
agua.

Las determinaciones de Cu, Cr, Mn y Zn en las muestras de fitobentos y agua fueron reali-
zadas por espectroscopía de absorción atómica con hornc de grafito, utilizando un equipo Perkin
Elmer 1100-B equipado con un HGA-700, un muestreadorAS-20, lámpara de deuterio y lámpara de
cátodo hueco de Cr, Cu, I\4n y Zn. Se utilizó como gas de transporte Ar (99,998%) y alicuotas de
muestra de 20 ul. Las Interferencias espectrales se corrigieron con lámpara de deuterio, a excepción
del Cr, y las matriciales empleando el método de adición estándar.

Validación de la metodología

La validación de la metodología analítica se realizó utilizando materiai de referencia cedifi-

cado, proveniente del National Research Council, Canada (SLRS-2) para las muestras de agua y del
National lnstitute of Standards and Technology (SRM-1570) para las muestras de fitobentos. Los
resultados se presentan en las Tablas ll y lll.

373
 Bol. Soc. Chil. euím., Vat.42,
Ne 3 (igg7)

TABLA ll. Resultados - Cu,rt:

- - - para Cr, ,v.,
Mn vy 4tt
Zn en
cr r dgua
agua oe
de r¡o
río (SLBS_2)
(SLHS_2) por EAA con HGA.

3::l;,^1'^ti:0"',"1
Certificación ^
g.-10 (4) o.ü rsl o 2s (4)(4\ n otr ,E\
0.2s
Error relativo y"
2.76 t 0.17 0.45r 0.07 '10.1 +
0.3
(5)
9.4 3.33 z 0.'l 5
11.1 2.0
1n¡: titlmero O o. I

TABLA lll.
_Resultados para Mn y Zn en"espinaca (SRM-1570)
por EAA con HGA.
cxperrmental (¡.rgll) r
Desv. Estandar (n) 4.9 163.2 (1
0.82 (s) J ¡.O0
Certificación 0.58 (4) 0.86 (4)
12 4.42 (s)
Error relativo % 166 EA
9.2 6.5
(n) Número de determinacrones 1.7 2.6
¡ndepend¡entes

RESI..'LTADOS Y DISCUS¡ON
Los valores de temperatura,
pH, conductividad, sólidos
los dos períodos de muestras suspendidos y caudaf obtenidos
p"r, lo, Luátiá rrgrr", d" ;ü;; en
ción están compilados en dístintos grados de conramina-
peratura presentó er.varor
la Tabla rv, o-o,t'" se observa
qrá áiü, "r;
o-o" períodos de muestreo
*ar oá.¡o (p"i;;;;;"r:.¡,. ra tem-
1994 y 9.1"c en seotrembre
las temperaturas más altas
dlrG; "n-r, ".:::T,,
;;;ff;esponder
urcanranoo s.4.c
a ,, ,".tái"-o,.direrano. En ¡rro cu *
p"*áÁ[áu ru
cambio se obtuvo
siendo 14'4"c v 13 2"c
"' báü , ,,
I "lmpañas "n ".i""iá,ii.1o"."roocadura Jer nioucor¡,
óél ,J$".tiuumenre.
do a que ra estación + rrl", ,"*rtrdos pueden expricarse debí-
"o.r".poí0" ."á"r
domésticos, ;;;;;'";oü=n',"rou,aturas
donde se ;;;;ü
ra mayor cantidad de residuos
§3 r""d:l mjs'ái"Jrou. que ra existente
en er me-

El pH
varió entre 7.0 y g.g y entre
mente. A excepción de ra 7.9 y 8.9 en Ia primera v I
estació; á é;;;.;""nt,ui o" ,r,üi
nas, et pH más a,to (pH .""rJ".r""r:#:,:;T#ñ,rr"..?XiiJ3-
= 8.9), por cor'r"üJ"onr, ;;;-;;";,;;""
oe res¡duos domésticos
de caracterís,¡"ulái"ur¡"u" pror"ni"ntJ;.já;r"principarmenre por descargas
aportes der canar Baeza.
La conductividad presentó
los máxímos valores para cada
(estero piduco), campaña en ras estaciones
or"
septiembre de 1995 como11.1111-"riá
ó.rü r'ljl20 ms
consecuencia j" ";;,,r;; ilñ,
y entre 0.16 y 0 rB ms
i"¡1t1 qrgr'ür,"á ,páiuou
3y4
en
oo," ra actividad indusrriar.
:;['Jffii"r":ffJ:i: *'g:,,",ffi:r:j:._*f: .traron en ra estación 1, siendo o os y o ó+ ms

suspendidos, ra menor concentración

1:"5:,::.1los,sólidos se presentó en ambas
"urp"nuSo*
;:ri:mí:ki;;i!l""ilü:xi::ñb,::f#!,5:"rlT,tr"r::.X,:a§["*t"*m::
prncpamenü,;,""ff :"Tff ::ff
,::r.."::ffij1n::m::lii*:ií#j;i,;#iiil:lr_
Con respecto al caudal,
las estacione. prá"unLion oO."r, la
"u varo,
un mayor
v-c"t,
or" ?n campaña de jurio de 1994, todas
cñ sept¡embre de :'"
observada en el mes ou
¡rlio o" l'glj.-'"' "l1T-"1]: 1995, debido u rá púuo,.n!,r,, ,"v-

37.4
 Bol. Soc. Chil. Quím., Vol.42, N! 3 (1997)

ABLA lV. Parámetros f ísico-químicos medidos en las cuatro estaciones estudiadas en julio de 1994
' septiembre de 1995.

Temperatura PH Conductividad S. suspendidos Caudal

=iedorres ('c) (ms) (mg/L) (rn3/s)
7t1994 9/1995 711994 9/1995 711994 9/1995 711994 9/1995 711994 9/1995
-70
--I-------54 e.1 7.0 0.03 0.04 0.10 0.i2 65.0 50.2
2 11.8 12.8 8.9 8.9 0.08 0.07 1.87 3.75 219.6 89.7
3 10.0 12.4 t.t at 0.18 0.16 2.87 14.00 92_4 57.3
4 14.4 13.2 t.ó 0.20 0.18 8.00 13.14 I 05.0 88.2
Descripción de la flora algal

El análisis taxonómico de las comunidades de fitobentos en ambos muestreos reveia que el

grupo con mayor representación de especies corresponde a las diatomeas con 25 representantes,
cuyas especies más abundantes corresponden a Fragilaria u/na (Nitzch.) Lange-Bertaiat, Melosira
varians Agardh y Diatoma vulgare Bory.

La mayoría de las estaciones son estables respecto a Ias especies dominantes durante los
2 muestreos de julio de 1994 y septiembre de "1 995. Pero se establecen asociaciones características
para cada estación, siendo dominantes en la esiación 1, las algas verdes representadas por el géne-
ro Tetraspora sp. y la especie Ulothrix zonata (Weber et Mohr) Kuetz. En la estación 2 dominan las
diatomeas F. ulnay M. varians y disminuye su abundancia la ciorófita a. zanata.

Las estaciones 3 y 4 son bastante similares y son las esiaciones con mayor influencia
antrópica, las especies dominantes corresponden a la diatomea D. vulgarey ei aiga verde Cladophora
glomerata (L.) Kuetz.

La flora algal está siendo determinada por una serie de factores asociadcs a ella, como el
nivel de contaminación, pH, tempei'atura, nutrientes, Iuz y olros.

Se observa, además que las especies D. vulgarey C. gtcineraÍason bastante tolerantes a la

contaminación, ya que se presentan con mayor abundancia en las estaciones 3 y 4, lo que implica
que deben poseer la capacidad para adaptarse o encontrar los nutrientes y el rnedio propicio para su
mayor desarrollo.

Concentración de ¡netales en fitobentos y agua

De acuerdo a los resultados presentados en la Tabla V, se observa que, en general, existe

una buena relación entre la concentración del metal en el fitcbentos y su agua circundante, especial-
mente en el caso de cromo, donde se registró los valores más altos en los sectores sometidos a una
mayor actividad industrial (estación 4).

En general, fos resultados obtenidos en las distintas estaciones para las matrices de agua y
fitobentos, se encuentran dentro de los rangos encontrados en un estudio realizado en Canadá,
donde fueron colectados 36 lagos en cuatro áreas geográficasl1). La estrategia empleada por el
fitobentos para acurnular metales tiene una importancia fundamental si se corisidera utilizarlos como
bioindicadores de elementoslrazal2). El grado de dicha acumulación, a menudo se expresa como
Factor de Concentración.

En el presente estudio el Factorde Concentración (FC), fue calcuiado en base alarazón

entre el contenido del metal en el fitobentos y su forma iónica disuelta en ei agua, dado que la fase
acuosa caracteriza la fracción biológicamente Cisponible. Los valores encontrados fueron levemente
más aitos o similares a los encontrados en estudios comparablesl3). Cabe destacar que las fluctua-
ciones en el FC de ciertos metales son típicas de ecosistemas de agi,ras corrientesla).
 Bol. Soc. Chit. euím., Vat.42, Ne 3 (1997)

en ritobentos v asua en tas estaciones

Iá#-tl"Xr,,3ffil"flT,i!fletales mr.¡estreadas en jurio ce

--
F¡tobentos Aguas .1C3 O,ro."n,or%
FC x
/uqtq\ (uq/ml) x t0.J
r 33r0s(4) '"n'.É-t'"--- - ,, I.,tg'g]-,
,,,n.'r,lL,r'
2 cr 15.013.0(4) 2.Bt0.e(4) s.4
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,ii iil;e':l!l' 'iJíiti,!á' !?
2 tuln szs.o!:2sa(4, ls.zto.ei+j ¿o.o g76.ir21.5(3) 21.7t4.s(4)
3 B4o.e rze.oi+i za.+tz.ti+¡ zé o 12.3
:lg llle B(4) rg.e:5.5(5) 16.4
r^0-6 7tB r7¿l -*-=-;;?7ñ x27.1(s)
:27.1 (S) ZO.1!:2.8rc
ZO.1:2 8(3\ /tn
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ro.2jo.3(3) - srosE
á.'" tfiíj1z?i'ál ;?iT?ÍIl ltl" rÍ::iilirál re1?:iá ,tr|
175.0t15.1(4) 11.7.t0.5(5)

FC: Facior de Concentración

En la presente investigación
se observa que en las muestras
cinc y cobre presentan concentraciones de fitobentos, el manganeso,
relativamente altas y constantes
situación estaría inciicando que en reiación al crorio, esta
estos ;r";;;1".
rados' estarían constituyendo parte g.1g:l;:." "^" vl"o*l
ou ü ,rir, naturar dei fitobeníos.
además de ser incorpo-
se encuenlran amoliamente distribuidot De hecho, estos erementos,
iu
"n ,naluraleza. tormancto parte de rnatrices bioÍógrcas y
3,:H"i;: i::,Ti[il:::a: il1"S.?,*i]ii:,,n', o ¡nc,uso ',;li;;;.,,,
(nsis) parecen ,"i
""un
Las formas solubles de los elementos
estudiados presentan un buen grado
lo tanto pu'"""n1"1rn buen de incorpora-
#,;::,? :r"ir"J:t:;]rtor ¡no¡caoor áelas condiciones der rusar, espe-

",i;;;;,";;ffi ;;#ff ;:fffr

de detección del método utilizado,
:i:,";:,:p!!1ii;i:n::;p#[ll*[hl:h*:
posibre ,rut""tu,
Es importante complementar la "n "r*üiJ¡1"
para obtener una aproximación v
", iiesenc¡a de
utilización o"il,too"r',to. -r ,*illiJqrímico
a través del fitobentos.
un cuerpo de agua,
más i"ul o"lu pr"sencia de cíertos
metares.

AGRADEC!MIENTOS
Los autores aoradecen a Ia Dirección
de.!nvestigación de la Universidad,de
Taica (proyecto
SJilí:"i3:lJ:i::üaXl:ü-ciiÉlü","i".10 o" coñ"up"i¿n üL
uooyo otorsado ar desarrorro

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