GUÍA DE APRENDIZAJE N° 02

SEMANA 2:

COMPETENCIA: Planifica y gestiona proyectos de producción de cultivos, haciendo uso

sostenible de los recursos para asegurar el cumplimiento del programa de producción en el
marco de las normas de calidad exigidas para los cultivos.
CAPACIDAD: Aplica conocimientos de agronomía y el análisis de los factores de producción
para elaborar programas de producción de cultivos, así como las labores diarias y los
requerimientos de insumos y personal que aseguren el cumplimiento de dicho programa en el
marco de las normas de calidad del sistema de producción.

RESULTADO DE CONTENIDOS PRODUCTO ACADÉMICO

APRENDIZAJE
Explica, diferencia y
reconoce la importancia del
proceso de síntesis in vivo e
in vitro del ADN
Síntesis del material
genético: Replicación in vivo
e in vitro (PCR).
Características, componentes
moleculares durante el
proceso e importancia.
1. Esquemas del proceso de
Replicación in vivo.
2. Esquemas del proceso de
replicación in vitro (PCR).

SECUENCIA DE ACTIVIDADES
Presentación de video de motivación y reconocimiento de saberes
previos en videoconferencia.
Día: 19 de Abr. de 23
INICIO
Horario:
Teoría: 08:00 am -12:00
Práctica: 14:00pm – 18:00pm
DESARROLLO Exposición docente
Teoría: Síntesis del material genético: Replicación in vivo e in vitro
(PCR). Características, componentes moleculares durante el proceso e
Importancia.
Práctica:
- Tarea 1:
Desarrollo y presentación de ejercicios según Anexo 01 de esta guía
de aprendizaje.
-Proyecto RSU: Se formarán grupos de trabajo para desarrollar el
Proyecto de Responsabilidad Social (RSU) denominado “Valorando
nuestros tubérculos y raíces nativas desde un enfoque genético” y
asignará 01 especie nativa a cada grupo para la búsqueda de
información bibliográfica que aborde estrictamente el estudio del
genoma o genes de interés en la especie vegetal asignada. Para ello, el
alumno recurrirá a plataformas virtuales como NCBI y otros
repositorios científicos. El trabajo será evidenciado mediante la
presentación de un mínimo de 04 artículos científicos.
- Tarea 2:
- Presentación de un mínimo de 04 artículos científicos sobre el
genoma o genes de la especie nativa.
Lectura del Módulo de aprendizaje:
Síntesis del material genético in vivo e in vitro
(PCR)
 En este material sirve como una actividad asíncrona y resume el
proceso de Replicación in vivo e in vitro (PCR) con artículos
científicos y videos vinculados en el texto que son necesarios
revisar y estudiarlos para lograr las competencias de la sesión de
aprendizaje.
Uso de herramientas virtuales de comunicación síncronas y/o
asíncronas.
Video conferencias, mensajería, calendario de actividades.
Realización y envío de la tarea de la semana N° 2.
El alumno deberá presentar correctamente desarrollada en la aula
virtual, dentro de un plazo máximo de seis días contados a partir de la
culminación de la clase práctica:
Tarea 01:
CIERRE
- Elaboración de Esquemas del proceso de Replicación in vivo y
Esquemas del proceso de replicación in vitro (PCR).
Tarea 02:
- Presentación de un mínimo de 04 artículos científicos sobre el
genoma o genes de la especie nativa.

I.- INTRODUCCIÓN:
La replicación de ácido desoxirribonucleico es el mecanismo que permite al ADN duplicarse.
De esta manera de una molécula de ADN única, se obtienen dos "replicas" de la primera. Esta
duplicación del material genético se produce de acuerdo con un mecanismo semi-conservativo,
lo que indica que las dos cadenas complementarias del ADN inicial, al separarse, sirven de
molde cada una para la síntesis de una nueva cadena complementaria de la cadena molde, de
forma que cada nueva doble hélice contiene una de las cadenas del ADN original. Este
mecanismo es posible gracias a la complementación entre las bases que forman la secuencia de
cada una de las cadenas, el ADN tiene la importante propiedad de reproducirse idénticamente,
esto es importante para la transmisión de la información genética de una célula a otra a través
del proceso de división celular1,2,3.

PCR por sus siglas en inglés (polymerase chain reaction), es una técnica de biología molecular
desarrollada en 1986 por Kary Mullis, sin embargo ya en la década de los 70 por Ghobind
Khorana con la finalidad de sintetizar químicamente genes sin embargo en aquella época las
condiciones y avances científicos eran aun limitados, así por ejemplo no se tenía información de
secuencias de ADN ni se contaba con enzimas DNA polimerasa termoestables; e1 objetivo de
esta técnica es obtener un gran número de copias de un fragmento de ADN particular, partiendo
de un mínimo; en teoría basta partir de una única copia de ese fragmento original, o molde. Esta
técnica fue creada aprovechando la propiedad de la enzima llamada ADN polimerasa para
sintetizar cadenas nuevas y complementarias de ADN a partir de cadenas moldes de ADN, con
la diferencia que se sintetizan solamente fragmentos de un determinado tamaño y no toda la
extensión de la molécula de ADN, además de amplificar millones de veces esta región, en la
 actualidad se emplea esta técnica con diferentes finalidades, entre las cuales se encuentran la de
detectar la presencia de un determinado organismo o microorganismo, amplificar una región
correspondiente a un gen para su posterior clonación entre otros múltiples uso 4.

Capacidades:

 Conoce los elementos que participan durante el proceso de síntesis in vivo y la

función que desempeña cada elemento.
 Conoce los elementos que participan durante el proceso de síntesis in vitro y la
función que desempeña cada elemento.
Desarrollo:
1.- A partir de la siguiente secuencia de ADN representar el proceso de replicación in
vitro (PCR) según el siguiente esquema:
CICLO I

Elevar temperatura 94 °C
Desnaturalización

Bajar temperatura 60 °C
Unión Primers: Hibridación

Subir temperatura 72 °C
Síntesis cadenas nuevas:
Extensión

CICLO II
Desnaturalización:

Hibridación:

Extensión:
A partir de la siguiente cadena de ADN:
3’ ATCCCAGCTTGCAGCGAGCCATTTAACTTATACGCGCGAGTGTGCGAGCAGTGAGCTACGATCGAGTGGTCGAGGCGA 5’
5’ TAGGGTCGAACGTCGCTCGGTAAATTGAATATGCGCGCTCACACGCTCGTCACTCGATGCTAGCTCACCAGCTCCGCT3’
1. Sintetizar la cadena complementaria de ADN.
2. Realizar Reacción en Cadena de la Polimerasa a partir de los siguientes primers:
a. 5’ TCGGTAAATT 3’
b. 3’ GAGCTACGA 5’
3. Realizar 3 ciclos de amplificación con las siguientes condiciones:
a. Ciclo 1:
I. Denaturacion del ADN 95°C 2-4 minutos
II. Hibridación de primers 60°C 30’’
III. Extensión 72° C 30’’
b. Ciclo 2:
I. Denaturacion del ADN 95°C 30’’
II. Hibridación de primers 60°C 30’’
III. Extensión 72° C 30’’
c. Ciclo 3:
I. Denaturacion del ADN 95°C 30’’
II. Hibridación de primers 60°C 30’’
III. Extensión 72° C 30’’
PD: La taq polimerasa sintetiza en dirección 5’3’
95 °C durante 4 min
3’ ATCCCAGCTTGCAGCGAGCCATTTAACTTATACGCGCGAGTGTGCGAGCAGTGAGCTACGATCGAGTGGTCGAGGCGA 5’

5’ TAGGGTCGAACGTCGCTCGGTAAATTGAATATGCGCGCTCACACGCTCGTCACTCGATGCTAGCTCACCAGCTCCGCT3’

60°C durante 30’’

3’ ATCCCAGCTTGCAGCGAGCCATTTAACTTATACGCGCGAGTGTGCGAGCAGTGAGCTACGATCGAGTGGTCGAGGCGA 5’
5’ TCGGTAAATT

GAGCTACGA 5’
5’ TAGGGTCGAACGTCGCTCGGTAAATTGAATATGCGCGCTCACACGCTCGTCACTCGATGCTAGCTCACCAGCTCCGCT3’
72°C durante 30’’
3’ ATCCCAGCTTGCAGCGAGCCATTTAACTTATACGCGCGAGTGTGCGAGCAGTGAGCTACGATCGAGTGGTCGAGGCGA 5’
5’ TCGGTAAATTGAATATGCG…….. 3’

3´ …..CAGTGAGCTACGA 5’
5’ TAGGGTCGAACGTCGCTCGGTAAATTGAATATGCGCGCTCACACGCTCGTCACTCGATGCTAGCTCACCAGCTCCGCT3’

Continuar el proceso hasta culminar con el segundo ciclo de amplificación.

 SINTESIS IN VIVO:

1. A partir de siguiente secuencia de ADN, desarrollar el proceso de replicación:

2. Complete las secuencias en ambas Horquillas de replicación:
3. Complete las secuencias en ambas Horquillas de replicación:
4. Complete las cadenas correspondientes a los productos de replicación de ADN:
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
1. Klug W. 2006. Concepts of Genetics. 10 ed. Edit. Pearson.
2. Pierce B. 2012. Genetics. 4ta Ed it W. H. Freeman.
3. Tamarin RH. 2001. Principles of Genetics. Seventh Edition. Graw−Hill.
4. Sambrook J. 2001. Molecular Clonig: A Laboratory Manual. COLD SPRING
HARBOR LABORATORY PRESS