Guía de práctica 05.

Transporte a través de membrana

Transporte a través de
Práctica N° 5:
membranas
Profesor:
Luis Manuel López Roa

I. Introducción

La membrana plasmática o celular, posee funciones muy importantes en relación con la dinámica
celular y los procesos funcionales en la célula. Igualmente, en los eucariotas las membranas
que limitan los orgánulos cumplen funciones semejantes ya que relacionan el interior de los
mismos con el resto de la célula permitiendo el intercambio de materiales. Recordando que los
organismos vivos son sistemas abiertos en los cuales hay intercambio de materia y energía con
el entorno que los rodea, una de las características de las membranas celulares es la
permeabilidad diferencial, lo que permite la selectividad en el control del transporte celular. Este
transporte de materiales en un sentido u otro permite mantener el equilibrio de los diferentes
componentes celulares que controlan, condiciones como el pH, concentraciones de iones y de
biomoléculas que deben permanecer dentro de ciertos parámetros indispensables para el
equilibrio celular. El intercambio de materiales depende no solo de la estructura y composición
de la membrana celular sino de los fluidos intra y extracelulares

Los mecanismos de transporte pueden ser pasivos o activos dependiendo del uso de energía,
por lo general ATP-ADP. Entre los pasivos tenemos la ósmosis, la difusión simple y la difusión
facilitada, mientras que, en los activos, la endocitosis y exocitosis.

A partir de la siguiente práctica de laboratorio se pretende evidenciar el transporte de sustancias

tomando en cuenta la incidencia de factores como la temperatura, la densidad de las moléculas,
el tamaño y la solubilidad en dicho proceso.

II. Resultados de Aprendizaje

General
Presenta competencias cognitivas, comunicativas, investigativas y sociales necesarias para
el campo de la salud animal y salud pública veterinaria.

Específicos
• Comprende las bases celulares y moleculares que sustentan los procesos biológicos
en las células, su importancia y relación en el contexto de la salud animal y publica.

• Integra los fundamentos de la ciencia de la biología celular, su historia y aportes con

la utilidad de esta en la medicina veterinaria.

• Asocia las características fisiológicas de células eucariotas, procariotas y virus con

algunos mecanismos de índole bioquímico.

• Conoce las estructuras y los procesos químicos, moleculares y celulares que permiten
la generación, el mantenimiento y la perpetuación de la célula.

• Concluye diferencias entre el funcionamiento de diversos seres vivos por medio del
examen microscópico de células

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III. Materiales, equipos y reactivos

MATERIALES REACTIVOS
Microscopio Azul de metileno con diferentes
concentraciones: 0,5%, 2%, 3,5%
Láminas portaobjetos Solución salina isotónica, hipertónica
e hipotónica
Láminas cubreobjetos
Gotero o pipeta pasteur
Tubos de ensayo
Gradilla
Pipeta graduada de 10 ml con pera
de succión
Cama de hielo
Baño de María a 50º C (con gradilla)
Beaker de 100 ml
Termómetro
Hojas de elodea*
Marcador delgado*
Cuchilla*
*por grupos de trabajo

IV. Procedimiento

Pre-informe:

1) ¿Qué es el transporte celular y cuál es su importancia?

2) ¿En qué consiste la difusión simple y la difusión facilitada?
3) ¿Qué caracteriza al proceso de ósmosis?
4) ¿Qué factores pueden incidir en el transporte a través de la membrana?

Metodología:

1. CONCENTRACIÓN Y TIEMPO DE DIFUSIÓN

Marque 3 tubos de ensayo (1,2 y 3 respectivamente) y a cada uno de ellos agregue 5 ml

de agua destilada; posteriormente, con ayuda de un gotero, adicione en la superficie del
líquido lo siguiente:

Tubo 1: 1 gota de azul de metileno al 0.5%

Tubo 2: 1 gota de azul de metileno al 2%
Tubo 3: 1 gota de azul de metileno al 3.5%

Registre el tiempo desde que adicionó el colorante (tiempo cero) hasta que se distribuyó
uniformemente en la muestra (Tf). El intervalo entre estos tiempos constituye el tiempo de

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difusión. La diferencia entre el Tf y To es igual al tiempo de difusión. Haga una gráfica donde
el eje X a la concentración del azul de metileno, y en el eje Y el tiempo de difusión.

Importante: No agite los tubos, registre los datos en la tabla 1

2. TEMPERATURA Y TIEMPO DE DIFUSIÓN

Tome 3 tubos de ensayo y enumérelos. Adicione en cada uno de ellos 5 ml de agua a

temperatura ambiente. Posteriormente, realice lo siguiente:

Tubo 1: Ubique el tubo en un recipiente con hielo.

Tubo 2: Disponga el tubo en una gradilla a temperatura ambiente.
Tubo 3: Lleve el tubo a baño de maría a 50º C

Registre para cada montaje la temperatura, luego agregue en la superficie una gota de azul
de metileno al 5 %. Registre en cada caso el tiempo de la difusión (Tabla 2). Registre sus
observaciones

3. FENÓMENOS DE LA MEMBRANA EN CÉLULAS DE LA HOJA DE ELODEA

Sobre una lámina portaobjetos ubique una hoja de elodea y agregue una gota de solución
isotónica (Márquela con el número respectivo). En una segunda lámina ubique otra hoja de
elodea con solución hipertónica y en una tercera lámina, una hoja de elodea con solución
hipotónica. Seguidamente cubra con una laminilla cubreobjetos, deje reposar por 3 minutos y
observe en el microscopio en el objetivo de 40X. Registre sus observaciones

V. Resultados

Tabla 1. Registro tiempo de difusión

Concentración de
azul de metileno Tiempo inicial Tiempo final Tiempo de difusión
(%)
0.5

2.0

3.5

Tabla 2. Temperatura y tiempo de difusión

Tubo No. Tiempo inicial Tiempo final Tiempo de difusión

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VI. Preguntas orientadoras

• ¿Cuál es la solución de azul de metileno más concentrada y cuál la menos

concentrada? ¿Qué relación tiene la concentración con el tiempo de difusión?
• ¿En qué tubo fue más rápida la difusión?
• ¿Cómo se observan las células?, ¿hay espacio entre la pared celular y el contenido
celular?
• ¿Qué les ocurrirá a los glóbulos rojos, si se colocan en: a) Solución isotónica (cloruro
de sodio 0,9%), b) Solución hipertónica (cloruro de sodio al 1,5%), c) Solución
hipotónica (cloruro de sodio al 0,3%). Explique.

VII. Recursos digitales

https://www.youtube.com/watch?v=WjUp7Gjd8bY

VIII. Bibliografía

BACCA, C., et al. (2011). Manual de laboratorio. Biología General. Universidad INCCA de
Colombia. Facultad de Ingeniería, Administración y Ciencias Básicas.
BERNAL, D. (2000). Manual de guía de laboratorio de biología celular y molecular. UDCA.
Bogotá
CAMPBELL, N., et al. (2007). Biología. Editorial Médica Panamericana. Buenos Aires.
CURTIS, H., et al. (2008). Biología. Editorial Médica Panamericana. Buenos Aires.
FREEMAN, S. (2009). Biología: 3ª. Ed. Ed. Pearson. Madrid.
HARVEY, L. et al. (2016). Biología celular y molecular. Ed. Médica Panamericana. Buenos
Aires
SOLOMON, E. et al. (2008). Biología: La unidad y la diversidad de la vida. 8ª Ed. McGraw-
Hill. México.

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Autor(es): Pilar Huérfano Riaño Manuel López Roa

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