Protocolo de Laboratorio

Curso Biología Celular y Molecular

Tutor

Angélica Bonilla

Paula Andrea Sanabria Buitrago, código: 1054539652, curso: 200612_76

Deisy Alejandra Álvarez Amaya código 1128470131, curso: 151009_187

Diana Shirley Galviz Hoyos, código 30411473, curso: 151009_85

Catalina Marcela Álvarez Iral, código 43925369, curso: 151009_95

Universidad Nacional Abierta y a Distancia “UNAD”

Cead UNAD Medellín

Marzo 2020
 Practica No. 4

“Permeabilidad selectiva de la membrana del eritrocito”

Introducción

Los eritrocitos son células sanguíneas que transportan la hemoglobina en la sangre cuando de
colocan en una solución isotónica, las moléculas entran a través de la membrana celular y las
células revientan, a este resultado se le llama hemólisis.

Este proceso lo podemos ver en un espectrofotómetro que mide el cambio en la absorción de la

luz, debido al paso de la hemoglobina hacia el exterior.

Objetivo.

Observar y determinar el porcentaje de hemólisis en eritrocitos causada por diferentes moléculas.

 Desarrollo

Presentación de resultados

Utilizando su curva estándar para Hemólisis, obtenga los valores equivalentes de

hemólisis de cada una de las lecturas de Transmitancia de las soluciones

problema. Para cada solución problema realice dos gráficas: a) % de

Transmitancia contra % de Hemólisis. b) % de Hemólisis contra Tiempo,

presentando los valores en forma de barras. De acuerdo a tus resultados presenta

el ordenamiento de las diferentes

moléculassegúnsuvelocidaddepenetraciónalinteriordeloseritrocitos.

Cuestionario

1. Describa en detalle la estructura de la membrana plasmática según el modelo

actual. Esquematícelo.

La membrana celular es una cubierta que envuelve y delimita a la célula separándola del medio
externo. Funciona como una barrera entre el interior de la célula y su entorno ya que permite la
entrada y salida de moléculas a través de ella. Este paso de moléculas es un fenómeno
llamado permeabilidad. Pero la membrana no deja pasar fácilmente a todas las moléculas, por lo
que es selectivamente permeable.

La membrana plasmática es muy delgada, mide de 7 a 10 nanómetros (nm) de grosor, por lo que
el microscopio óptico no la detecta, sólo puede ser observada con el microscopio electrónico. La
membrana es como un mosaico fluido en el que la bicapa lipídica es la red cementante y las
proteínas están embebidas en ella, interaccionando unas con otras y con los lípidos. Tanto las
proteínas como los lípidos pueden desplazarse lateralmente.

 Los lípidos y las proteínas integrales se hallan dispuestos en mosaico.

Las membranas son estructuras asimétricas en cuanto a la distribución de todos sus componentes
químicos: lípidos, proteínas y glúcidos

La membrana está compuesta fundamentalmente por lípidos y proteínas, y en menor cantidad por
glúcidos.

2. Explique las características que debe presentar una molécula para que pueda

atravesar fácilmente la membrana plasmática.

La membrana presenta una permeabilidad selectiva, ya que permite el paso de pequeñas

moléculas, siempre que sean lipófilas, pero regula el paso de moléculas no lipófilas. Entonces, la
mayor parte de los iones y moléculas solubles en agua son incapaces de cruzar de forma
espontánea esta barrera, y precisan de la concurrencia de proteínas portadoras especiales o de
canales proteicos. De este modo la célula mantiene concentraciones de iones y moléculas
pequeñas distintas de las imperantes en el medio externo.
Las moléculas polares y cargadas tienen problemas mucho mayores para cruzar la membrana.
Las moléculas polares pueden interactuar con facilidad con la parte externa de la membrana,
donde se encuentran los grupos de cabezas con carga negativa, pero tienen dificultades para
atravesar el núcleo hidrofóbico. Por ejemplo, las moléculas de agua no pueden cruzar
rápidamente la membrana (aunque gracias a su tamaño pequeño y a que no tienen una carga
completa, pueden cruzarla a baja velocidad).

Además, aunque los iones pequeños tienen el tamaño justo para colarse por la membrana, su
carga se los impide. Esto significa que los iones como el sodio, potasio, calcio y cloruro no
pueden atravesar las membranas por difusión simple en ningún grado significativo, por lo que
deben ser transportados por proteínas especializadas. Las moléculas cargadas y moléculas
polares más grandes, como los azúcares y aminoácidos, también requieren la ayuda de las
proteínas para cruzar la membrana de manera eficiente.

3. Con qué finalidad se usa sangre en los experimentos.

La sangre se utiliza con diferentes fines tales como observar las células, ver los glóbulos,
eritrocitos, plaquetas, observar el proceso de permeabilidad en la membrana del eritrocito
llamado hemólisis, también el proceso de hipotonía, isotonía e hipertonía en ella. Se puede hacer
conteo de células y médicamente son muchas las cosas que se pueden hacer examinando la
sangre.

4. Si hubiéramos utilizado sangre de otro animal mamífero,

¿Esperaríamos los mismos resultados?, explíquelo en función de la

permeabilidad de la membrana.

Afirmativamente hubiéramos observado lo mismo, ya que la célula animal de mamíferos y la

humana tienen las mismas partes, al ser así la permeabilidad de la membrana celular tanto en
unos como en los otros cumple la misma función actuar como una barrera entre el interior de la
célula y su entorno al permitir la entrada y salida de moléculas a través de ella.

Bibliografías
https://www.portaleducativo.net/primero-medio/40/membrana-plasmatica

https://www.biologiasur.org/index.php/145-apuntes-de-biologia/procariotica-y-eucariotica/333-2-3-1-
membranas-celulares-composicion-estructura-y-funciones

https://es.khanacademy.org/science/biology/membranes-and-transport/passive-transport/a/diffusion-
and-passive-transport

Practica No. 5

“Meiosis y Mitosis”

Introducción

Objetivo.

Desarrollo

Presentación de resultados
Realice dibujos de todas las fases de la meiosis y mitosis.

APICE DE

LA

CEBOLLA

4X

APICE DE

LA

CEBOLLA

10X
 APICE DE

LA

CEBOLLA

40X Profase

Telofase

Anafase

Foto de ápice de la cebolla en 40 X donde observamos las fases de la mitosis

profase, telofase y anafase, en esta muestra la metafase no se observa.

OTRAS MUESTRAS DADAS POR LA TUTORA

A.
 Telofase

Profase

Anafase

Metafase

B.

Telofase

Profase

Anafase

Metafase
 C.

Metafase
Anafase

Profase

Telofase

Cuestionario

1. ¿Qué etapas de la meiosis y mitosis observó?

De la meiosis no vimos células pues son las reproductivas y no había muestra.

De la mitosis observamos en la muestra del ápice de la cebolla que llevamos la profase, telofase
y anafase; y en las muestras dadas por la profesora todas las fases: profase, anafase, telofase,
metafase.

2. ¿Qué tipo de células observó?

Observamos células vegetales en el ápice de la cebolla y animal en la sangre

 3. ¿Cuántos cromosomas poseen las células en mitosis?

Se tienen desde la profase hasta la metafase 23 pares de cromosomas (46 cromosomas).

4. ¿Cuántos cromosomas poseen las células en meiosis?

Al final de la primera parte de la meiosis se forman dos células hijas; cada una de ellas tiene la
mitad de cromosomas que la célula madre. En el caso del ser humano 23 cromosomas, con dos
cromáticas cada uno.
5. ¿Qué es la cromatina?

6. ¿Qué es la interfase?

7. ¿Cuáles son las etapas del ciclo celular y que caracteriza a cada una de ellas?

8. ¿En cuál fase del ciclo celular se duplica el material genético y porqué?

9. ¿Cuáles son las partes del cromosoma?

10. ¿Qué es una célula diploide?

11. ¿Cómo se identifica el estado de Profase en una célula en mitosis?

12. ¿Qué es la metafase?

13. ¿Cómo se identifica el estado de Anafase en una célula en mitosis?

14. ¿En cuál tipo de tejido ocurre la meiosis y porqué?

15. ¿Cuántas fases comprende la meiosis? Identifíquelas.

16. ¿En cuál fase de la meiosis ocurre la reducción del número de cromosomas en la célula

(pasa de condición diploide ahap.

 Practica No. 6

“Extracción de ADN”

Introducción

Todo organismo vivo está formado por la molécula del DNA, encontramos entre las cuatro

biomoléculas principales los ácidos nucléicos, el ADN o acido desoxirribonucleico, es el

material genético que comprende todas las instrucciones que determinan las características

y funciones del organismo.

Objetivo.

Extraer ADN a partir de células animales y vegetales.

Desarrollo

Obtención de ADN a partir de células animales.

A.Epitelio de mucosa bucal

Proceso Descripción
Epitelio bucal con jabón líquido en reposo

10 minutos

Pasar la muestra a un tubo de ensayo esta

no debe superar la tercera parte del tubo

Anadir 1 ml de jugo de piña

Una vez tapado y asegurado el tubo agitar

suavemente el tubo a 180° sobre su eje

vertical repitiendo el giro 5 veces

 Verter el alcohol isopropanol y así

Creando una capa sobre la mezcla

Y esperar cinco minutos

Extracción de ADN

Obtención de ADN a partir de células vegetales.

Proceso Descripción
 Maceramos las espinacas x 2 minutos

Adicionamos agua embotellada.

Adicionamos jabón liquido de platos

reposar 10 minutos y pasamos a un tubo de

ensayo , añadimos jugo de piña, se gira

Suavemente 5 veces y dejar reposar

Añadimos alcohol isopropanol para

generar una capa sobre la muestra

esperar 5 minutos

Extracción de ADN

Presentación de resultados

Dibujar la estructura molecular del ADN y explicar brevemente sus

características.

El ácido desoxirribonucleico es un ácido nucléico que contiene

instrucciones genéticas usadas en el desarrollo y funcionamiento de todos
los organismos vivos conocidos y algunos virus, y es responsable de su
transmisión hereditaria. La función principal de la molécula de ADN es el almacenamiento
a largo plazo de información. Los segmentos de ADN que llevan esta información genética
son llamados genes, pero las otras secuencias de ADN tienen propósitos estructurales o
toman parte en la regulación del uso de esta información genética.

Las cuatro bases nitrogenadas del ADN se encuentran distribuidas a lo largo de la "columna

vertebral" que conforman los azúcares con el ácido fosfórico en un orden particular. (la
secuencia del ADN). Laadenina(A) se empareja con la timina (T), mientras que
la citosina (C) lo hace con la guanina. Las dos hebras de ADN se mantienen juntas por los
puentes hidrógenos entre la base.

Cuestionario
1. ¿Para qué sirve extraer ADN?

Sirve para poder estudiarlo o manipularlo, en la investigación biomédica se utiliza

para analizar a los pacientes con diferentes padecimientos como enfermedades

genéticas, cáncer, infecciones y otras.

2. ¿Describa brevemente cuál es la importancia del ADN para lavida?

El ADN es muy importante para la vida ya que contiene el mensaje genético para

toda la función y organización celular, es la molécula que controla todos los procesos

vitales para los seres vivos, además de ser el principal constituyente de los

cromosomas celulares. El ADN contiene una serie de codificaciones para generar

todas las proteínas de nuestro cuerpo

3. ¿Para qué se utiliza el detergente y la sal?

El detergente se utiliza para romper las membranas celulares y así poder extraer el

ADN de estas. Y la sal evita la unión de proteínas al ADN.

4. Dibuje o esquematice la acción del detergente sobre las células

5. ¿Por qué se utiliza el alcohol?

Ya que el DNA tiene afinidad por los alcoholes especialmente por el isopropanol, la

adición de alcohol, precipita el ADN dado que es insoluble en altas concentraciones

de sal y alcohol.

6. El ADN de una célula se encuentra enrollado a proteínas formando

la cromatina ¿En qué etapa del experimento se separa el ADN de

las proteínas?

Como nuestro ADN es soluble en agua, cuando aplicamos el alcohol se

desenrolla y precipita en la interface entre el alcohol y el agua. Ahí nos

permite ver como se separa el ADN de las proteínas.

7. ¿En qué parte exacta del tubo se observan los filamentos de ADN?

¿qué se deduce sobre la solubilidad de ADN en el agua salada y el

etanol?

En la parte de arriba del tubo y se ve como se enrollan los filamentos

de ADN.
 Se deduce que el ADN es soluble en agua, esto se hace para coger

células, y el etanol precipita el ADN dado que es insoluble.

8. ¿Cuáles son las técnicas de biología celular y/o molecular que

requieren la extracción de ADN? (Explique al menos 3 técnicas e

incluya imágenes).

 Reacción en cadena de polimerasa: Técnica utilizada básicamente para copiar la

DNA, la polimerización en cadena se puede también utilizar para introducir

mutaciones dentro de la DNA

 Electroforesis del gel: técnica utilizada para separar la DNA, EL ARN y las

proteínas basadas en su talla aplicando un campo eléctrico pues la DNA funciona a

través del gel de la agarosa.

 Reproducción de la expresión: ayuda a los científicos a entender la función de la

proteína, La DNA que cifra para una proteína determinada se reproduce o se copia

utilizando la polimerización en cadena en un vector de la expresión llamado

plasmidio, este puede estimular la alta expresión de la proteína deseada para así

poder examinar su actividad enzimática.

https://sites.google.com/site/portafolioprofejavier/adn-su-estructura-y-composicion
 Practica No. 7

“Genética humana”

Introducción

Objetivo.

Determinar caracteres heredables en una población.

Desarrollo

Procedimiento

1. Enrollamiento de lengua

Alelo dominante U (Mayúscula)

Alelo recesivo u (Minúscula)

2. Separación de los lóbulos de las orejas

Alelo dominante L (Mayúscula)

Alelo recesivo l (Minúscula)

3. Pulgar en escuadra
 Alelo dominante P (Mayúscula)
Alelo recesivo p (Minúscula)

4. Pico de viuda

Alelo dominante V (Mayúscula)

Alelo recesivo v (Minúscula)

5. Vello en las falanges de los dedos de la mano

Alelo dominante D (Mayúscula)

Alelo recesivo d (Minúscula)

6. Dedo anular más corto que el dedo índice

Alelo dominante A (Mayúscula)

Alelo recesivo a (Minúscula)

Presentación de resultados y cuestionario

A. Explique el tipo de anormalidades cromosómicas existentes y

cuáles son los efectos en el desarrollo delindividuo.

 Anormalidades numéricas: El cromosoma normal contiene 23 pares de

cromosomas, dando un total de 46 cromosomas cada célula, llamadas las células

diploides, en caso de síndrome de Down o de la trisonomia 21 hay una copia

adicional de los cromosomas del cromosoma 21 y por lo tanto el 47 el síndrome de

Turner por otra parte se presenta de la ausencia de un cromosoma x significando

que solamente 45 cromosomas están presentes.

 El efecto en el desarrollo del individuo con síndrome de Down se caracteriza por el

retraso mental

 Anormalidades s estructurales: ocurren cuando la morfología cromosómica es

alterada debido a una situación inusual del centrómero y por lo tanto de los largos

anormales del cortocircuito del cromosoma p y del arma larga q.

La mayoría de las anomalías cromosómicas ocurren como un accidente en el ovulo

o el espermatozoide, En este caso la anomalía está presente en cada una de las

células del cuerpo., Sin embargo, algunas anomalías sucedes después de la

concepción en este caso algunas células tiene la anomalía y otras no.

B. ¿Cómo influye el ambiente en la expresión de losgenes?

Los mecanismos epigeneticos son un traductor del medio ambiente y son capaces de

modificar la expresión de los genes al funcionar como un registro delentorno son la

memoria del medio ambiente al que estuvieron expuestos. Es una área de

investigación actual para tratar de comprender como los genes y el ambiente trabajan

juntos y cómo podemos modificar el entorno para alguien cuya susceptibilidad

genética indica que esta en riego de una enfermedad.

C. Mencione al menos 2 síndromes relacionados con anormalidades

cromosómicas más frecuentes y otras dos menos frecuentes o

enfermedadeshuérfanas.

Síndromes relacionados con normalidades cromosómicas más frecuentes:

 Síndrome de Down (trisomía 21):Alteración congénita ligada a la triplicación

total, o parcial del cromosoma 21, que origina retraso mental y de crecimiento y

produce determinadas anomalías físicas.

 Síndrome de Turner (45,X):Trastorno genético que afecta el desarrollo de las

niñas, la causa es un cromosoma X ausente o incompleto. Las niñas que lo

presentan son de baja estatura y sus ovarios no funcionan en forma adecuada.

Síndromes relacionados con anormalidades menos frecuentes o enfermedades

huérfanas

 Síndrome de Moebius: Enfermedad rara del desarrollo, dos importantes nervios

craneales, el 6 y 7, no están totalmente desarrollados en estos pacientes. Estos

nervios controlan tanto el parpadeo y movimiento lateral de los ojos, como las

múltiples expresiones de la cara, causa parálisis facial y falta de movimiento en los

ojos.

 Síndrome de prader Willi: Enfermedad rara del desarrollo embrionaria, con una

frecuencia de 1 por cada 25.000 nacidos vivos. Retraso mental, e hipogenitalismo.

 Estudiante No. 1 Estudiante No. 2 Estudiante No. 3 Estudiante No. 4

Genotipo Genotipo Genotipo Genotipo

Característic
Fenotip (s) Fenoti (s) Fenoti (s) Fenoti (s)
a
o po po po

posible( posible( posible( posible(

s) s) s) s)
Enrollamiento de Si enrolla la UU Uu No enrolla uu Si enrolla UU Uu Si enrolla UU Uu

lengua lengua la lengua la lengua la lengua

Separación de los No tiene No tiene Si tiene Si tiene

lóbulos separado los ll separado ll separado LL Ll separado LL Ll

lóbulos de los lóbulos los lóbulos los lóbulos

de las orejas Las orejas de las de las de ,as

orejas orejas orejas

Pulgar en escuadra Si tiene Si tiene Si tiene No tiene

pulgar en PP Pp pulgar en PP Pp pulgar en PP Pp pulgar en pp

 escuadra escuadra escuadra escuadra
Pico de viuda No tiene vv No tiene vv Si tiene VV Vv No tiene vv

pico de pico de pico de pico de

viuda viuda viuda viuda

Vello en las No tiene No tiene Si tiene Si tiene

falanges de vello en las vello en vello en vello en

falanges dd las dd las DD Dd las DD Dd

los dedos de la falanges falanges falanges

mano
Dedo anular más No tiene No tiene Si tiene Si tiene

corto dedo anular AA Aa dedo AA Aa dedo aa dedo aa

más corto anular más anular más anular más

que índice corto que corto que corto que

que el dedo índice
índice índice índice
Sexo Hombre Mujer Hombre Mujer Hombre Mujer Hombre Mujer