MATERIA: Bioquímica l

UNIDAD: 2

Reporte de laboratorio práctica 2

“Titulación de un aminoácido”

PROFESORA: Erika Darnely Rojas Ayala

INTEGRANTES DEL EQUIPO:

Hurtado España Jessica(C21090899)

Rangel Crystal (21090356)
Jorge Salazar Andrés (21090330)
Sensores Montes Brandon Eduardo (21090371)
Luna Alonso Héctor Sebastián (21090335)
Pérez Delgado Yoav Salvador (21090354)
Díaz Ramírez Leonardo Raúl (21090303)

FECHA: 31 de Marzo del 2023

GRUPO: WA
INTRODUCCIÓN

La potenciometría se refiere al método electroanalítico empleado en la determinación de

concentración de lones H+ en una sustancia que se encuentra en solución mediante el uso de
un potenciómetro y dos electrodos (Skoog, W., Holler J. & Crouch S, 2000). Un potenciómetro
es el dispositivo que se utiliza para medir la diferencia de potencial existente entre en un
electrodo de trabajo y uno de referencia, cuando ambos están sumergidos en una solución de
la cual se desea determinar su acidez o basicidad, expresando esta como pH. En el caso del
electrodo da referencia, esto posee un potencial conocido, constante y estable a diferencia del
electrodo de trabajo. El potencial que se desarrolla en este último electrodo varia en proporción
a la concentración de lones H+ que se encuentren en la solución mismo que es influenciado
enormemente por la temperatura a la que se lleve a cabo la medición (Martinez. U. 2009).

El funcionamiento de un potenciómetro se basa en el mecanismo de una celda electroquímica

donde se involucran lones H+ en la reacción química de la celda para determinar la
concentración de estos iones en la solución y, de esta manera, obtener el pH de la misma.
Cuando se desea medir el pH de una solución mediante la potenciometría se emplea un
potenciómetro y un electrodo; el primero es el dispositivo que determina el pH, mientras que el
segundo se basa en la combinación de un electrodo de referencia y otro de medición que es
sensible a los analitos.

OBJETIVO GENERAL
Determinar los niveles de pH de una solución de glicina mediante la medición
de su potencial de electrodo con un potenciómetro, utilizando ácido clorhídrico y hidróxido de
sodio para ajustar el pH.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS
 Preparar una solución de glicina de concentración conocida.

 Calibrar el potenciómetro antes de realizar las mediciones.

 Ajustar el pH de la solución de glicina utilizando soluciones de ácido clorhídrico y hidróxido

de sodio de concentración conocida.

 Medir el potencial de electrodo de la solución de glicina en diferentes valores de pH.

 Construir una curva de titulación para la solución de glicina.

 Determinar el punto de equivalencia de la curva de titulación y calcular la concentración de la

solución de glicina.

 Comparar los resultados obtenidos con los valores.

 MARCO TEÓRICO

La titulación de un aminoácido es un proceso químico mediante el cual se mide el punto

isoeléctrico (pI) del aminoácido. El pI es el pH en el cual el aminoácido tiene una carga neta
igual a cero. Este proceso es importante en la bioquímica, la biología molecular y la
farmacología ya que nos permite entender las propiedades ácido-base de los aminoácidos y
cómo afectan la estructura y función de las proteínas.
Los aminoácidos son moléculas que contienen un grupo carboxilo (-COOH) y un grupo amino
(-NH2). Estos grupos pueden ser protonados o desprotonados dependiendo del pH del medio.
El punto isoeléctrico de un aminoácido se puede calcular a partir de su pKa, que es la
constante de disociación ácida del grupo carboxilo y del grupo amino. El pKa del grupo
carboxilo es de aproximadamente 2,2, mientras que el pKa del grupo amino es de
aproximadamente 9,4. Por lo tanto, a pHs menores de 2,2 el grupo carboxilo está protonado,
a pHs mayores de 9,4 el grupo amino está desprotonado, y entre estos dos valores el
aminoácido puede tener una carga neta positiva, negativa o cero.
La titulación de un aminoácido se puede realizar mediante una curva de titulación, que
representa la variación del pH en función de la cantidad de ácido o base que se añade a una
solución del aminoácido. La curva de titulación típicamente muestra tres regiones: una región
ácida, una región básica y una región de taponamiento. En la región ácida, el grupo carboxilo
del aminoácido está protonado, por lo que el aminoácido tiene una carga neta positiva. A
medida que se añade una base, el pH aumenta y el grupo carboxilo pierde un protón, lo que
conduce a una disminución de la carga neta del aminoácido.En la región básica, el grupo
amino del aminoácido está desprotonado, lo que conduce a una carga neta negativa. A medida
que se añade un ácido, el pH disminuye y el grupo amino se protona, lo que conduce a una
disminución de la carga neta del aminoácido. En la región de tamponamiento, el aminoácido
actúa como un tampón y mantiene el pH relativamente constante a medida que se añade ácido
o base. En esta región, el aminoácido tiene una carga neta cercana a cero y se encuentra en
su punto isoeléctrico.

• Punto Isoeléctrico: El punto isoeléctrico (pI) de un aminoácido es el pH en el cual la

molécula tiene una carga neta igual a cero. Es decir, es el punto en el que el aminoácido se
encuentra en su forma neutra y no tiene carga eléctrica.
• Constante de disociación ácida: La constante de disociación ácida (pKa) es una medida
de la fuerza de un ácido. En el caso de un aminoácido, el pKa se refiere a la tendencia del
grupo carboxilo (-COOH) y del grupo amino (-NH2) a perder un protón y convertirse en sus
formas disociadas (-COO- y -NH3+).
• Curva de titulación: La curva de titulación es un gráfico que muestra la variación del pH en
función de la cantidad de ácido o base que se añade a una solución de aminoácido. La curva
de titulación es una herramienta importante para determinar el pI de un aminoácido y
entender su comportamiento ácido-base.
• Región ácida: En la región ácida de la curva de titulación, el grupo carboxilo del aminoácido
está protonado y la molécula tiene una carga neta positiva. A medida que se añade base, el
pH aumenta y el grupo carboxilo pierde un protón, lo que conduce a una disminución de la
carga neta del aminoácido.
• Región básica: En la región básica de la curva de titulación, el grupo amino del aminoácido
está desprotonado y la molécula tiene una carga neta negativa. A medida que se añade
ácido, el pH disminuye y el grupo amino se protona, lo que conduce a una disminución de la
carga neta del aminoácido.
 La titulación de un aminoácido es importante en la bioquímica y la biología molecular ya que
permite entender la química de los sistemas biológicos. Los aminoácidos son los bloques de
construcción de las proteínas, que son moléculas esenciales para la vida. La titulación de los
aminoácidos es fundamental para entender cómo la variación del pH puede afectar la
estructura y función de las proteínas. La titulación de los aminoácidos es importante en la
industria alimentaria y farmacéutica, ya que los aminoácidos se utilizan como suplementos
alimentarios y en la producción de medicamentos. La titulación permite determinar la pureza
y calidad de los aminoácidos utilizados en estos productos.
En resumen, la titulación de un aminoácido es importante para comprender su
comportamiento químico, determinar su punto isoeléctrico, entender la estructura y función
de las proteínas y aplicarlos en diversas industrias.

CÁLCULOS

• Preparar 50ml una disolución de glicina a 0.1M con una pureza del 98.5%

M=75.07gr/mol
M=n/v → n=(0.1mol/L) (0.05L) = 0.005

m=M*n→(0.005mol) (75.07gr/mol) = 0.375

0.375gr Gli pura * 100gr Gli frasco / 98.5gr Gli pura = 0.381 gr Gli

• Preparar 100 ml una disolución de ácido clorhídrico a 1M con una pureza del
37%

M=36.463 gr/mol

M=n/v → n=(1mol/L) (0.1L) = 0.1 mol

m=M*n→(0.1 mol) (36.463 gr/mol) = 3.6463 gr

3.6463 gr HCl pura * 100 gr HCl frasco / 37 gr HCl pura = 9.86 gr HCl

• Preparar 50 ml una disolución de NaOH a 2 M con una pureza del 97%

M=39.98 gr/mol

M=n/v → n=(2mol/L) (0.05L) = 0.1 mol

m=M*n→(0.1 mol) (39.98 gr/mol) = 3.998 gr

3.998 gr NaOH pura * 100 gr NaOH frasco / 97 gr NaOH pura = 9.86 gr N

GRÁFICOS
DESARROLLO EXPERIMENTAL

1. Lavamos el material.

2. Calibramos el potenciómetro utilizando las disoluciones buffer de pH4 y pH 7 (cada equipo

calibro el potenciómetro antes de haberlo utilizado).

3. Preparamos 50 mL de una disolución de glicina 0.1 M, al pesar tomamos en cuenta que el

reactivo se encontrara al 98.5%, agregamos agua destilada hasta aproximadamente la
mitad del vaso de precipitados de 50 mL y disolvimos en ella la glicina previamente pesada,
(realizamos previamente el cálculo de la cantidad a pesar) utilizando la espátula para agitar,
agregamos esta mezcla al matraz aforado de 50 mL y aforamos. Medimos el pH de esta
disolución.

4. Preparamos 100 mL de disolución de ácidoclorhídrico 1M, para ello, tomamos en

cuenta que el reactivo estuviera al 37 % p/v, hicimos los cálculos antes de llegar a la práctica,
utilizamos protector facial. De esta disolución utilizamos sólo 25 mL para agregarlos a la
solución de la glicina y el resto para neutralizar al finalizar la práctica.
5. Preparamos 50 mL una disolución de NaOH 2 M, para ello consideramos que el reactivo se
encontrara al 97%. Llegamos previamente al laboratorio con los cálculos hechos para la
preparación de las disoluciones.

6. Colocamos los 50 mL de disolución de aminoácido en un vaso de precipitados de 150

mL y agregamos 25 mL de disolución de HCl y mezclamos. Medimos el pH inicial de la mezcla
de Glicina con disolución de HCl.

7. Colocamos la bureta en el soporte universal agregando 25 mL de NaOH 2 M en ella,

mientras alguien más debía calibrar el potenciómetro.
8. Llevamos a cabo la titulación agregando disolución de NaOH en fracciones de 1 mL y
agitando antes de tomar la lectura del pH, no era necesario retirar la muestra del electrodo
(procuramos no tardar más de 30 segundos entre lecturas).

9. Cuando agregamos los 25 mL de disolución de NaOH, agregamos disolución de NaOH

adicional a la bureta para continuar titulando.

10. Anotamos en una tabla el pH y volumen de NaOH correspondiente, continuamos

agregando disolución de NaOH hasta llegar a pH por arriba de 13.

11. Finalmente vertimos los residuos en la garrafa correspondiente (asignada por el laboratorio
para esa función) al igual que se podía neutralizar.
RESULTADOS

Al medir el pH de las disoluciones que utilizamos al realizar este experimento obtuvimos los
siguientes datos:

DISOLUCIONES pH
Glicina 6.85
Hidróxido de sodio (NaOH) 13.03
Ácido clorhídrico (HCl) 0.80
Mezcla (Glicina y Ácido clorhídrico) 2.60

La mezcla una vez saturada alcanzo un pH de 13, después de 22 repeticiones tal y como se
muestra en la tabla:

REPETICIONES pH
1 ml 2.73
2 ml 7.29
3 ml 9.45
4 ml 10.07
5 ml 11.19
6 ml 12.16
7 ml 12.31
8 ml 12.34
9 ml 12.45
10 ml 12.54
11 ml 12.60
12 ml 12.68
13 ml 12.71
14 ml 12.78
15 ml 12.82
16 ml 12.86
17 ml 12.88
18 ml 12.90
19 ml 12.95
20 ml 12.97
21 ml 12.98
22 ml 13
CONCLUSIONES

En esta práctica de medición de PH utilizamos un potenciómetro que fue un equipo nuevo

para nosotros, lo cual, calibrarlo fue muy tedioso ya que era nuestra primera vez, sin
embargo, logramos medir las disoluciones de una manera correcta, así como el pH de la
mezcla a través de la titulación; por consiguiente, pudimos culminar la titulación con el PH
esperado, con un total de 22 repeticiones.

En conclusión, podemos decir que fue muy interesante tanto el proceso como en el
aprendizaje realizar esta práctica de medición de PH con ayuda de un potenciómetro,
además observamos la importancia que conlleva medir y pesar debidamente los reactivos
para no generar resultados erróneos ni perdidas de productos, así como también tener una
buena organización en el equipo, para no tener contratiempos a la hora de realizar la
práctica.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

TITULACIÓN DE AMINOÁCIDOS CON 3PK.docx - MARCO TEORICO TITULACIÓN DE

AMINOÁCIDOS CON 3PK Los Aminoácidos “Las proteínas son macromoléculas formadas por |

Course Hero. (2016). Coursehero.com.

https://www.coursehero.com/file/69942907/TITULACI%C3%93N-DE-AMINO%C3%81CIDOS-

CON-3PKdocx/

De, T. (2012, June 11). Titulacion De Aminoacidos - Trabajos - JorgeEnsayo. Clubensayos.com.

https://www.clubensayos.com/Ciencia/Titulacion-De-Aminoacidos/212981.html

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Prácticas del laboratorio de bioquímica 1. PRACTICA 4. (2021). Studocu; Studocu.

https://www.studocu.com/es-mx/document/universidad-autonoma-de-ciudad-juarez/bioquimica-

general/practicas-del-laboratorio-de-bioquimica-1-practica-4/2994318