CENTRO DE CIENCIAS BÁSICAS

LABORATORIO DE DIVERSIDAD BIOLÓGICA

LICENCIATURA EN BIOTECNOLOGÍA
2º SEMESTRE
ENERO – JUNIO

PRÁCTICA 3
“MORFOLOGÍA DE LOS PROCARIONTES (BACTERIAS)”

PROFESORA: CLAUDIA MONTSERRAT VALLE RODRÍGUEZ

INTEGRANTES:
• MIRANDA JESSALYN FLORES MURGUÍA
• DIEGO SEBASTIÁN ROMO NIETO
• SUANI VILLALPANDO VÁZQUEZ

AGUASCALIENTES, AGS., MÉXICO

20 DE FEBRERO DE 2023

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INTRODUCCIÓN:

Las bacterias son organismos microscópicos que no poseen un núcleo definido o estructurado, a estos
organismos se les denomina procariontes. La célula bacteriana tiene un tamaño promedio que varía
entre 0,5 y 5 µm (1 µm es 0,0001 cm). Posee un citoplasma delimitado por una membrana plasmática.
Por fuera, se ubica la pared celular que varía según el tipo de bacteria. El genoma de las bacterias está
constituido por un filamento largo de ADN, circular y cerrado, que está compactado al interior del
citoplasma denominado nucleoide, que no posee membrana. El citoplasma, además contiene abundantes
ribosomas y, en algunos casos, gránulos de inclusión. Algunas células bacterianas también poseen
cápsula, flagelos y fimbrias (también llamadas pili) Las bacterias pueden clasificarse en diferentes
maneras, patógenas y no patógenas, por su morfología, como se agrupan y también de la temperatura
de eficiente crecimiento, pared celular y respuesta al oxígeno. (Acuña, 2018)

La mayoría de las bacterias son inocuas para el ser humano o forman parte de nuestro microbiota
bacteriano normal, ya sea en la piel o mucosas, protegiendo de enfermedades.

Escherichia coli: es una bacteria presente frecuentemente en el intestino distal de los organismos de
sangre caliente. La mayoría de las cepas de E. coli son inocuas, pero algunas pueden causar graves
intoxicaciones alimentarias. La bacteria se transmite al hombre principalmente por el consumo de
alimentos contaminados, como productos de carne picada cruda o poco cocida, leche cruda, y hortalizas
y semillas germinadas crudas contaminadas. (Cánet, 2016).

Bacillus subtilis: no es considerado patógeno humano; sin embargo, puede contaminar los alimentos,
pero raramente causa intoxicación alimenticia. Sus esporas pueden sobrevivir la calefacción extrema
que a menudo es usada para cocinar el alimento, y es responsable de causar la fibrosidad en el pan
estropeado. no es considerado patógeno humano; sin embargo, puede contaminar los alimentos, pero
raramente causa intoxicación alimenticia. Sus esporas pueden sobrevivir la calefacción extrema que a
menudo es usada para cocinar el alimento, y es responsable de causar la fibrosidad en el pan estropeado.
(Cánet, 2016).

Klebsiella sp: es una bacteria Gram negativa, encapsulada, no móvil, fermenta la lactosa, anaerobio
facultativo. Es encontrada en la flora normal de la boca, la piel y los intestinos. Es miembro importante
del género de las enterobacterias. (Tártara S.G 2013).

OBJETIVOS:

1. Observará la morfología de diferentes cepas bacterianas.

2. Realizará la coloración del Gram a diferentes cepas bacterianas., técnica muy importante como
prueba diagnóstica.

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3. Realizará la tinción diferencial negativa para observar la cápsula.

MATERIAL Y METODOLOGÍA:

1. Se colocó una gota de agua en el portaobjetos.

2. Se encendió el mechero y se colocó el asa microbiológica para esterilizar
3. Colocando el portaobjetos cerca de la flama del mechero (para no contaminar) y escogiendo la
bacteria que se iba a analizar, se tomó el asa microbiológica. poniéndola también en la flama
del mechero tomando un color rojo vivo
4. Se ladeó el tubo de ensaye y se introdujo el asa tocando levemente las bacterias para no
quemarlas, una vez que hubo contacto se introdujo toda el asa tomando bacterias.
5. El asa se extendió por todo el portaobjetos, tomando varias veces pruebas de la bacteria, una
vez que se creía suficiente la cantidad de bacterias que se tomaron, se cerró el tubo y el asa se
deja otra vez para esterilizar.
6. Sin dejar de estar dentro de la zona de esterilización, se secó la prueba, pasando el portaobjetos
varias veces sobre la flama del mechero.
7. Una vez que se secó, se colocaron gotas de la solución de violeta de genciana por 1 minuto.
8. Pasado el minuto, se escurrió el colorante y se hizo un lavado con agua para quitar el exceso y
una vez más, se pasó por la flema del mechero para que secara nuevamente, posteriormente se
pusieron gotas de Lugol por el frotis, el cual, también se dejó por un minuto y se enjuagó
nuevamente ahora con alcohol y se dejó secar a la flama del mechero una vez más.
9. Para terminar, se puso solución de fucsina por 20 segundos, se escurrió y enjuagó con agua y
se secó.
10. Se observó la prueba final en el microscopio

RESULTADOS:

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 Figura 1. Se observa la
muestra realizada de Bacillus
subtilis, con el objetivo X100
del microscopio óptico. Se
pueden apreciar las bacterias
en forma de cocos y con una
tinción azul oscuro (bacterias
Gram-positivas).
Figura 2. Se observa la
muestra realizada de Klebsiella
sp con el objetivo X100 del
microscopio óptico. Se pueden
apreciar las bacterias en forma
de bacilos y con una tinción
azúl oscuro (bacterias Gram-
positivas).
Figura 3. Se observa la muestra
realizada de Escherichia coli
con el objetivo X100 del
microscopio óptico. Se aprecian
las bacterias en forma de bacilos
y con una tinción rosada tenue
(bacterias Gram-negativas).

DISCUSIÓN:

A través de la práctica se logró, además de reconocer el uso de los materiales y el proceso utilizado para
preparar una muestra fija, observar las bacterias y analizar su forma, así como se le realizó la tinción de
Gram para saber si ésta era positiva o negativa.

La tinción de Gram de acuerdo con López et. al. (2014) “Es definida como una tinción diferencial, ya
que utiliza dos colorantes y clasifica a las bacterias en dos grandes grupos: bacterias Gram negativas y
bacterias Gram positivas. Los principios de la tinción de Gram están basados en las características de
la pared celular de las bacterias, la cual le confiere propiedades determinantes a cada microorganismo.
La pared celular de las bacterias Gram negativas está constituida por una capa fina de peptidoglicano y
una membrana celular externa, mientras que las bacterias Gram positivas poseen una pared celular
gruesa constituida por peptidoglicano, pero no cuentan con membrana celular externa; así pues, la
composición química y el contenido de peptidoglicano en la pared celular de las bacterias Gram
negativas y Gram positivas explica y determina las características tintoriales.” Según los resultados
obtenidos podemos dar una respuesta asertiva según la tinción tomo cada bacteria. Como ejemplo, en
la figura 1 se muestran cocos de un color azul oscuro, al igual que en la figura 2, variando únicamente
la forma de la bacteria que se encuentran como bacilos; por lo tanto, la bacteria Bacillus subtilis y
Klebsiella sp pertenecen a las bacterias Gram positivas las cuales poseen una pared celular gruesa
constituida por peptidoglicano. En la figura 3 se muestran bacilos de un color rosa tenue,
correspondientes a la bacteria Escherichia coli demostrando así que es una bacteria Gram negativa con
una pared celular fina de peptidoglicano y una membrana celular externa.

“Por lo general, las bacterias presentan tres formas básicas: las bacterias esféricas se denominarán
cocos, las alargadas serán bacilos, las bacterias curvadas y las que tienen forma de espiral serán los
espirilos, espiroquetas, comas o vibriones; cada una de ellas presentará distintas características” (Vargas
y Kuno, 2014). En la figura 1 se presentan los cocos de las bacterias Bacillus subtilis los cuales
presentan formas casi esféricas y sus agrupaciones son homogéneas. El tamaño de los cocos oscila entre
los 0,8 a 1,0 m. y pueden presentar y tomar diversas formas, producto de dos factores importantes como

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son la tendencia de las células a mantenerse unidas, una vez sucedida la división y el o los planos de
división celular. Por otro lado, tenemos las figuras 2 y 3 que presentan bacterias en forma de bacilos,
las cuales son la Klebsiella sp y la Escherichia coli, los cuales forman agrupaciones bastante
heterogéneas por su variedad de subtipos morfológicos, que pueden ser cilíndricos, en forma de bastón,
largos y delgados, pequeños y gruesos, también pueden presentar variaciones en sus extremos pudiendo
ser rectos, afilados o redondeados. Al igual que los cocos, pueden presentar varias formas según la
tendencia que tengan células hijas para mantenerse unidas.

CONCLUSIONES:

Se lograron observar cepas bacterianas con ayuda del microscopio y se pudo realizar la tinción de gram
a las tres cepas que se nos otorgaron.

REFERENCIAS:

Acuña, G. (2018). Bacterias: ¿Por qué me enferman? (2.a ed.). AGR Servicios Gráficos. Pp 8

Canet, J. (2016). Echerichia Coli (2. A. ed.) Betelgeux Pp. 22,24.

López, L., Hernández, M., Colín, C., Ortega, S., Cerón, G., y Franco, R. (2014) Las tinciones básicas

en el laboratorio de microbiología. Pp 12 y 13.

Tártara, S. (2013) Patógenos Emergentes – Tercera Parte Pp. 103,109

Vargas, T., y Kuno, A. (2014) Morfología bacteriana

ANEXOS:

CUESTIONARIO:

1) Mencione las diferentes formas y tamaños que pueden presentar las bacterias dando un
ejemplo de cada una.
Por lo general entre 0,5 y 5 μm de longitud y diversas formas como esferas (cocos) Bacillus
subtilis, barras (bacilos) E. coli, filamentos curvados (vibrios) Sphaerotilus natans y
helicoidales (espirilos y espiroquetas) Spirillum volutans.
2) ¿Cuándo se dice que una bacteria es Gram positiva y cuando Gram negativa?
Se considera Gram positiva cuando se tiñen de color azul oscuro o violeta. En cambio, se
considera Gram negativa cuando se tiñe de un color rosado tenue.

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3) Dé dos ejemplos de bacterias Gram positivas y dos bacterias Gram negativas.
Gram negativa: E coli, Hemophilus influenzae.
Gram positiva: Staphylococcus aureus, Bacillus antracis.
4) Composición química de la cápsula.
Polisacárido, ya sea homopolisacárido (p. ej., celulosa, dextrano, levano) o heteropolisacárido
(p. ej., alginato, ácido colánico, ácido hialurónico).
5) Mencione dos géneros que presenten cápsula.
Escherichia, bacillus.
6) ¿Cuál es la función de la cápsula?
Protegen a las bacterias de la fagocitosis, participa en la adherencia bacteriana, protegen a la
bacteria frente a distintos agentes nocivos, protege a las bacterias frente a la desecación.
7) Mencione la razón por la cual las bacterias pueden alimentarse de diferentes tipos de
sustrato.
El mundo bacteriano, como conjunto, exhibe una gigantesca versatilidad metabólica de uso de
nutrientes: desde autótrofos que obtienen su carbono por reducción del CO2 y los demás
elementos a partir de fuentes igualmente inorgánicas, hasta heterótrofos capaces de usar amplia
gama de fuentes orgánicas de carbono.
8) ¿Qué relación tienen la fisiología y el lugar donde viven las bacterias?
Dependiendo de las necesidades que requiera la bacteria y su medio de obtención de energía,
esta está adaptada al entorno en el que vive para captar estos requerimientos.

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