Cromatografía de Gases

Lo Básico
(tomado de Shimadzu)
 Descripción general del análisis de GC
● La cromatografía de gases (GC) es una técnica analítica aplicable a muestras gaseosas, líquidas y
sólidas (componentes que se vaporizan por calor). Si se analiza una mezcla de compuestos mediante
el sistema GC, cada compuesto se puede separar y cuantificar.
● Cuando se inyecta una muestra de solución mixta en el sistema GC, los compuestos contenidos en la
muestra, incluidos los componentes del solvente, se calientan y vaporizan dentro de la unidad de
inyección de muestra.
● Con el sistema GC, la fase móvil, denominada gas portador, siempre fluye en secuencia desde la
unidad de inyección de muestra a la columna y luego al detector. Los componentes objetivo que se
vaporizaron en la unidad de inyección de muestra son transportados por el gas portador a la columna.
Una vez en la columna, la mezcla de compuestos se separa en los diversos componentes y luego el
detector mide la cantidad de cada compuesto.
● El detector convierte la cantidad de cada compuesto en una señal eléctrica y envía estas señales a una
unidad de procesamiento de datos. Los datos obtenidos permiten determinar los compuestos
contenidos en la muestra y en qué cantidades.
Descripción General de la Cromatografía de
Gases
 Separación por cromatografía de gases
● La separación por GC ocurre dentro de la columna.
● La muestra que contiene múltiples compuestos se inyecta en la columna junto con la fase
móvil. (En GC, la fase móvil es un gas denominado gas portador. El Helio se usa con
frecuencia). Tanto la muestra como la fase móvil viajan a través de la columna, pero la
velocidad de progresión dentro de la columna difiere según el compuesto. En consecuencia,
surgen diferencias en los tiempos en los que los respectivos compuestos llegan a la salida de
la columna. Como resultado, se produce una separación entre cada compuesto.
● La fila de picos dibujada cuando las señales eléctricas emitidas por el detector de GC se
trazan en el eje vertical y el tiempo transcurrido después de la inyección de la muestra se traza
en el eje horizontal se denomina cromatograma.
● Los componentes que pasan a través de la columna son transportados por la fase móvil (fase
gas) mientras se reparten y se adsorben en la fase estacionaria (fase líquida y fase sólida).
La separación se logra en la columna
● Aquí se muestra un cromatograma típico.
● El eje horizontal muestra el tiempo hasta que
el componente llega al detector. El eje vertical
muestra la intensidad de la señal.
● La parte en la que no se detecta nada se
denomina línea base y la parte en la que se
detecta un componente se denomina pico.
● El tiempo desde que se inyecta la muestra en
el sistema hasta que aparecen los picos se
denomina tiempo de retención.
● Como los tiempos de elución de cada
componente difieren, cada componente puede
separarse y detectarse.
 Compuestos adecuados para análisis por GC
● Los componentes que se pueden analizar con GC tienen las
siguientes tres características principales.
– Compuestos con punto de ebullición hasta 400 °C
– Compuestos que no se descomponen a su temperatura de
vaporización
– Compuestos que se descomponen a su temperatura de
vaporización, pero siempre en la misma cantidad. Esto se llama
pirólisis GC.
 Compuestos que no pueden analizarse o son
difíciles de analizar con GC
● Compuestos que no se pueden
analizar:
– Compuestos que no se vaporizan
(metales inorgánicos, iones y
sales)
– Compuestos altamente reactivos y
compuestos químicamente
inestables
– (ácido fluorhídrico y otros ácidos
fuertes, ozono, NOx y otros
compuestos altamente reactivos)
● Compuestos que son difíciles de
analizar
– Compuestos altamente
adsorbentes (compuestos que
contienen un grupo carboxilo, un
grupo hidroxilo, un grupo amino o
azufre)
– Compuestos para los cuales las
muestras estándar son difíciles de
obtener (los análisis cualitativos y
cuantitativos son difíciles).
 Información Obtenida de los Resultados del
Análisis
● El tiempo (tiempo de retención) hasta
que la muestra inyectada llega al
detector es un valor característico de
cada componente.
● Investigar el tiempo de retención en
determinadas condiciones de análisis
permite determinar qué es un
componente (análisis cualitativo).
● Además, el tamaño del pico del
componente, es decir, su área y altura,
permite determinar la cantidad del
componente (análisis cuantitativo).
 Analisis cualitativo

● El tiempo de elución cuando se analiza en condiciones dadas es una característica de cada

componente. En otras palabras, cuando se analiza el mismo componente en las mismas
condiciones, se confirma un pico al mismo tiempo.
● Por ejemplo, imagine una muestra desconocida que se sabe que contiene el componente A y el
componente B.
● El cromatograma obtenido de la muestra desconocida tiene el siguiente aspecto. No es posible
saber qué pico es el componente A y qué pico es el componente B.
 Usando estándares se identifican los
compuestos
●
Sin embargo, si se preparan muestras
estándar de A y B y se analizan en las
mismas condiciones, los tiempos de
retención para A y B se vuelven
evidentes.
● Al comparar estos cromatogramas, se
pueden determinar los picos de A y B en
el cromatograma de la muestra
desconocida.
●
Cuando se analiza en las mismas
condiciones, el mismo componente
siempre eluye al mismo tiempo.
●
(Los tiempos de retención son
equivalentes.)
 Con GC, el tiempo de retención es la única información
cualitativa.
→ Para el análisis cualitativo, se requiere una muestra estándar (en principio).
● Con GC, el tiempo de retención es la única información cualitativa.
● Por esta razón, si no se dispone de una muestra estándar, no es posible determinar qué es un pico.
● En consecuencia, se podría decir que este método está destinado al análisis de muestras para las
cuales los componentes que contienen son razonablemente seguros. Para investigar muestras con
contenido desconocido, es necesario utilizar métodos de análisis con mayor capacidad cualitativa
como GCMS.
● Al mismo tiempo, es importante tener en cuenta que los componentes existen con los mismos
tiempos de retención en determinadas condiciones de análisis. En otras palabras, un pico
aparentemente único podría indicar múltiples componentes. En este caso, se deben realizar
comprobaciones cruzadas cambiando la columna o las condiciones de temperatura.
● Por este motivo, al realizar un análisis de GC, es muy importante separar completamente los picos.
 Análisis cuantitativo
● En un cromatograma de GC, el tamaño y el área del pico del componente son proporcionales a la cantidad del
componente que llega al detector.
●
Aquí, describimos un análisis cuantitativo que investiga la concentración del componente A en una muestra
desconocida.
● En primer lugar, se analiza 1 μL de la muestra desconocida y el área del pico del componente A en el
cromatograma obtenido tiene un recuento de 700.
● A continuación, se prepara una muestra estándar con una concentración de componente A de 100 ppm. Se
analiza 1 μL de esto en las mismas condiciones, y se obtiene un recuento de 1000 como área del pico.
● El área del pico es proporcional a la cantidad del componente, por lo que si una concentración de 100 ppm tiene
un recuento de 1000, un recuento de 700 significa una concentración de 70 ppm.
● Al igual que con el análisis cualitativo, se podría decir que también se requiere una muestra estándar para el
análisis cuantitativo.
● El área (altura) del pico del componente es proporcional a la cantidad de componente que llega al detector.
● (Nota: en el modo FPD S, es proporcional al cuadrado de la cantidad del componente).
Cuantificación
 Métodos cuantitativos
● Método de área de pico porcentual
– El método del porcentaje del área del pico utiliza el área del pico del
componente objetivo (componente A) como una proporción del área total
de todos los picos detectados para analizar la cantidad.
– Este método se utiliza para determinar cambios en la concentración de
una mezcla de muestra conocida o para determinar una concentración
aproximada de una mezcla de muestra.
– Ventajas: Análisis simple ya que no se utiliza una muestra estándar.
– Desventajas: Precisión de cuantificación reducida debido al efecto de la
sensibilidad relativa de los componentes.
 Método de área de pico porcentual

La concentración del componente A es 1000/ 4500 = 22,2 %

*Notas
Todos los componentes de la muestra deben ser detectados.
Todos los componentes deben tener la misma sensibilidad relativa.
Método de área de pico de porcentaje corregido
● El método de porcentaje de área de pico corregido es el
método de porcentaje de área de pico con compensación para
las sensibilidades relativas de cada componente.
● Ventajas: Realiza análisis cuantitativos por el método de
porcentaje de área de pico pero con compensación por la
sensibilidad relativa de los componentes.
● Desventajas: Requiere una muestra estándar que contenga
todos los componentes en concentraciones conocidas.
Método de área de pico de porcentaje corregido

La concentración del componente A es 500/ 2417 = 20,7 %

 Método de curva de calibración absoluta
(método estándar externo)
● El método de la curva de calibración absoluta usa una muestra estándar de
concentración conocida para preparar una curva de calibración, luego usa
esta curva para cuantificar los componentes en una muestra desconocida.
● El análisis puede ser relativamente simple ya que solo se necesita detectar
el componente objetivo para determinar la cantidad. Este es también el
método más popular de análisis cuantitativo.
● Ventajas: el análisis cuantitativo requiere solo la separación y detección del
componente objetivo.
● Desventajas: Los errores de volumen de inyección de muestra se trasladan
como errores en los resultados cuantitativos.
Método de curva de calibración absoluta
(método estándar externo)

La concentración del componente A es de 70 PPM

 Método estándar interno
● El método del estándar interno calcula la concentración del componente objetivo en función de la relación
entre la relación del área del pico y la relación de concentración del componente objetivo y un estándar
interno.
● ventajas:
● – La cantidad se puede calcular siempre que se detecten el componente de destino y el estándar interno.
● – La relación de concentración no depende del volumen de inyección, por lo que este método compensa los
errores de volumen de inyección.
● – No susceptible a diferentes densidades de muestra causadas por diferentes composiciones de muestra.
● Desventajas:
● – Requiere una muestra estándar que contenga una concentración conocida del componente objetivo y el
estándar interno.
● – El patrón interno debe agregarse a todas las muestras desconocidas para obtener una concentración
precisa.
 Selección del Estándar Interno
● Seleccionar el patrón interno puede ser difícil ya que debe
cumplir con todos los requisitos que se muestran a
continuación.
– Se separa casi por completo de todos los componentes de la
muestra.
– Se eluye cerca del componente objetivo.
– Tiene propiedades químicas similares al componente objetivo
(homólogo, etc.).
– Es químicamente estable
 Método estándar interno

Concentración del componente objetivo en muestra desconocida

100 ppm (concentración de patrón interno en muestra desconocida) × 0,7 / 1,2 = 58 ppm
La concentración del componente A es de 58 PPM
 Método de adición estándar
● El método de adición estándar analiza una muestra
desconocida y la misma muestra desconocida enriquecida con
una cantidad conocida del componente objetivo, luego usa la
diferencia entre las áreas de los picos detectados (altura de los
picos) para determinar la cantidad. Este método cuantitativo se
usa a menudo para analizar muestras que contienen un
componente objetivo afectado por la concentración de otros
componentes en la muestra, como el análisis de componentes
de olor y el análisis de espacio de cabeza.
 Método de Adición de Estándar
●
Ventajas：Otros componentes en la muestra (matriz) pueden
mitigar el efecto (efecto matriz) de los cambios en la
composición de la muestra cuando se introducen en un
cromatógrafo de gases.
● Desventajas: se requiere trabajo adicional para agregar el
componente objetivo a la muestra desconocida. Debido a que
se agrega un componente objetivo a la muestra desconocida (a
veces, varias cantidades), no se pueden usar muestras raras.
 Método de Adición de Estándar

La concentración (ppm) del componente A en la muestra desconocida se muestra mediante el valor absoluto
valor en la intersección con el eje horizontal (cantidad añadida).
La concentración del componente A es de 50 PPM
 Tipos de gas portador
● El gas portador es un gas inerte que se utiliza para transportar muestras. helio (He),
nitrógeno (N 2 ), hidrógeno (H 2 ) y argón (Ar). A menudo se utilizan
● El helio y el nitrógeno son los más comúnmente usados ​y el uso de helio es deseable
cuando se usa una columna capilar.
● Dado que el gas portador fluye constantemente hacia el detector, se debe utilizar un gas de
alta pureza de al menos el 99,995 %. (El uso de gas de alta pureza reduce el ruido de
referencia).
Helio Aunque caro, es seguro y tiene un rango de velocidad lineal óptimo relativamente
amplio.
Nitrógeno Aunque es seguro y su costo es razonable, tiene desventajas como un rango de
velocidad lineal óptima estrecho y una velocidad lineal óptima baja que requiere más
tiempo de análisis.
Relaciones entre la eficiencia de la columna (HETP), los tipos
de gas portador y la velocidad lineal (diagrama conceptual)

*HETP: Altura equivalente a un plato teórico (parámetro que indica la eficiencia de separación de una columna)
Velocidad lineal promedio: valor promedio de la velocidad de un gas portador que fluye en una columna
Las Condiciones de análisis varían de acuerdo
al gas portador usado
● La eficiencia de la columna varía de acuerdo con la combinación del
tipo de gas portador utilizado y las condiciones de análisis (velocidad
lineal).
● Cuando se utiliza un gas portador, se debe especificar una velocidad
lineal adecuada en función de las relaciones entre la eficiencia de la
columna (HETP), el tipo de gas portador y la velocidad lineal que se
muestran en la figura anterior. En el análisis convencional que utiliza
una columna capilar, se utilizan alrededor de 30 cm/s de velocidad
lineal porque a menudo se utiliza helio como gas portador.
 Métodos de control de gas portador
● Para controlar el gas portador, existen métodos para controlar
la presión, el caudal (flujo) de la columna y la velocidad lineal.
● (El método para controlar la velocidad lineal está patentado por
Shimadzu Corporation).
● En la mayoría de los análisis, uno de estos parámetros se
controla en un cierto valor durante el análisis. Sin embargo,
también se puede utilizar el control programado, como el
aumento de la presión durante un análisis.
 Control de presión Control de caudal de Control de velocidad lineal
columna
La presión en el puerto de El caudal del gas portador dentro La velocidad lineal promedio del
inyección se controla para que de la columna se controla para gas portador dentro de la columna
coincida con el ajuste que coincida con el ajuste. se controla para que coincida con
programado. la configuración.
Generalmente se utiliza para el Se utiliza cuando se inyecta la Solo se puede usar en unidades
análisis capilar. cantidad total mediante una del sistema GC que se pueden
columna empaquetada o de controlar electrónicamente.
calibre ancho.
La presión fluctúa mientras la El caudal fluctúa a medida que La presión se ajusta de acuerdo
temperatura aumenta. cambia la resistencia de la con los cambios en la resistencia
columna. de la columna.