DAD DE GUA

AS UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS
CARRERA: BIOQUÍMICA Y FARMACIA
GUÍA DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO

Datos del Grupo 1

Samaniego Olivares Diana Adamaris
estudiante: 6to semestre
Partes y funcionamiento de un cromatógrafo de gases y Evaluación del
No. 7-8 práctica
efecto de temperatura.

Objetivos de la práctica de laboratorio:

 Conocer las partes principales de un equipo de cromatografía de gases previo al estudio de su funcionamiento.
 Establecer el trabajo en conjunto de cada parte del equipo y su importancia en el proceso de análisis y
cuantificación para la selección de las condiciones analíticas.
 Identificar tipos de analitos, muestras y campos de aplicación en los que puede ser utilizado en un cromatógrafo
de gases.
 Reconocer los componentes del sistema cromatográfico de gases.
 Identificar los parámetros de optimización cromatográfica por GC.
 Determinar el efecto de aplicación de programación de temperatura para la separación cromatográfica.

Introducción: Marco teórico:

La cromatografía de gases (GC) es una técnica de separación que nos
permite determinar los diferentes componentes de una muestra compleja
formada por compuestos volátiles. Esta técnica utiliza como fase móvil
una gas inerte que arrastra los diferentes componentes de la muestra a
través de la columna cromatográfica donde son separados por la
combinación de diversos procesos de interacciones físicas y/o químicas
entre los componentes de la muestra y la fase estacionaria.
Los componentes fundamentales de un cromatógrafo de gases son:
 Fuente de gas
 Sistema de inyección
 Horno y columna cromatográfica
 Sistema de detección
 Sistema de registro.

Inyección con división de muestra

Este tipo de inyección (más conocida como inyección “split”), es el más sencillo de los que se utilizan en cromatografía
capilar. El inyector de “split” (figura 4), consta básicamente de los mismos elementos que un inyector normal, con la
única adición de un sistema de división de flujo a la salida de la cámara de mezcla. Por medio de este tipo de inyector,
el flujo de gas portador que pasa a través del inyector (y por lo tanto también la muestra vaporizada), se divide en dos;
una parte es introducida en la columna y la otra escapa fuera del sistema a través de una válvula de aguja que permite
regular la proporción de gas que es introducido en la columna.
Inyección “splitless”
En la técnica de inyección “splitless”, la totalidad de la muestra inyectada es dirigida hacia la columna, que se mantiene
durante la inyección a una temperatura inferior al punto de ebullición del componente más volátil de la muestra. La
totalidad de la muestra inyectada, lógicamente condensa en la cabeza de la columna, actuando en este caso el disolvente
condensado en la columna a modo de trampa donde se concentran los componentes a analizar (efecto solvente).
Transcurrido un tiempo adecuado, se abre en el inyector una válvula de purga con el fin de barrer a la atmósfera el
disolvente vaporizado que pudiera quedar en el inyector; al mismo tiempo, se comienza un programa de calentamiento
de la columna para realizar el análisis.

Tipos de detectores
Los detectores usados en cromatografía de gases, pueden dividirse de forma genérica en detectores universales y
detectores específicos; los primeros ofrecen la ventaja de responder prácticamente ante cualquier compuesto que pueda
eluir de la columna, no obstante, esta misma propiedad puede convertirse en un serio inconveniente cuando se procede
al análisis de mezclas muy complejas; en este último caso, la utilización de detectores específicos resulta muy ventajosa
ya que, al responder únicamente frente a un grupo limitado de compuestos, los cromatogramas que ofrecen resultan
muy simplificados.
Detector de conductividad térmica
Uno de los primeros detectores utilizados para el trabajo de rutina en cromatografía de gases, ha sido el detector de
conductividad térmica o detector de hilo caliente. Este tipo de detector responde a la diferencia de conductividad
térmica existente entre el gas portador puro y el gas portador mezclado con alguna otra substancia; la magnitud de la
respuesta dependerá de la diferencia de conductividad térmica entre el compuesto que eluye de la columna y el gas
portador.

Detector de ionización de llama

El detector de ionización de llama es tal vez el más ampliamente utilizado en cromatografía de gases. Este tipo de
detector es en la práctica de respuesta universal, ya que es selectivo hacia los compuestos que presenten enlaces C-H,
por lo que son muy pocos los compuestos que no dan señal en él. En un detector de ionización de llama, el gas
procedente de la columna se mezcla con hidrógeno y esta mezcla se quema en una cámara con exceso de aire. Por
encima de la llama, se dispone un colector cilíndrico polarizado con el fin de recoger los iones generados; sobre este
dispositivo, se mide la corriente iónica que se establece entre la punta del quemador y el electrodo colector.

Detector de captura electrónica

El detector de captura electrónica ocupa probablemente el segundo lugar entre los detectores de más alta utilización,
debiéndose este hecho a su excepcional sensibilidad (el detector de captura electrónica es probablemente el dispositivo
analítico más sensible que se conoce). Este hecho junto a su selectividad hacia compuestos de enorme interés
(fundamentalmente en los campos de medio ambiente y toxicología), hacen que sea enormemente utilizado para la
detección y cuantificación de trazas. En un detector de captura electrónica se utiliza una fuente de radiación βpara
bombardear el gas portador que pasa a través de una cámara de ionización, generándose de esta forma un plasma de
iones positivos, radicales libres y electrones térmicos.
Aplicaciones

 La aplicación general es la determinación cualitativa y cuantitativa de compuestos orgánicos volátiles. Algunas

aplicaciones concretas que se pueden realizar con estos aparatos son:

 Estudios medioambientales (en aguas o suelos):

o Análisis de pesticidas organoclorados.
o Análisis de pesticidas organonitrogenats y organofosforados.
o Análisis de PCBs.
o Análisis de nonilfenoles.
o Análisis de VOCs.

 Higiene industrial: análisis de ambientes industriales.

 Análisis de moléculas de interés bioquímico como por ejemplo ácidos grasos.
 Análisis de productos derivados del petróleo: gasolinas, gasóleo, fuel, aceites ....
 Análisis de disolventes.
 Análisis de estupefacientes.
 Análisis de moléculas de interés farmacéutico.

Reactivos de laboratorio:
 Dimetil sulfóxido (calidad reactiva)
 Benceno (estándar certificado)
 Butanol (estándar certificado)

Materiales de laboratorio:
 Columna Capilar del tipo Zebron ZB-5ms (30 m x 0.25 mm x 0.50 um)
 Equipos de laboratorio:
 Cromatógrafo de gases
 Detector FID
 Gas de arrastre Helio
 Inyector Split

Método, técnica operatoria o procedimiento: (Diagrama de flujo)

Resultados obtenidos
 Indicar las condiciones de temperatura para la columna en el horno que procura el artículo científico
objeto de la práctica para las 4 inyecciones de la mezcla benceno-butanol.
Temperatura inicial: 30ºc
Tiempo inicial: 0 min
Velocidad de la rampa: Isotérmica
Temperatura final: 30ºc
Tiempo final: 0.5 min

Temperatura inicial: 30ºc

Tiempo inicial: 0 min
Velocidad de la rampa: 10ºc/min
Temperatura final: 60ºc
Tiempo final: 0.5 min

Temperatura inicial: 30ºc

Tiempo inicial: 0 min
Velocidad de la rampa: 20ºc/min
Temperatura final: 74ºc
Tiempo final: 0.5 min

Temperatura inicial: 30ºc

Tiempo inicial: 0 min
Velocidad de la rampa: 30ºc/min
Temperatura final: 93ºc
Tiempo final: 0.5 min
  Indicar los tiempos de retención para los 4 ensayos realizados.

Tiempo de retención (min)

COMPUESTO
Ensayo 1 Ensayo 2 Ensayo 3 Ensayo 4
Benceno 3,75min 2,62min 2,19min 2,06min
Butanol 3,94min 2,62min 2,16min 2,03min

 Explicar a qué se debe el cambio de orden de elución de los dos compuestos analizados.
Se debe a que como el benceno se elude primero y luego el butanol se aumenta la rampa de la temperatura, los
dos compuestos se coeluyen y al finalizar se separan en elución inversa.

 Explicar la fase estacionaria utilizada en la columna y sus características.

 Columna robusta muy popular de uso general para GC
 Acondicionada completamente en 35 minutos
 De alta respuesta para ácidos y bases igual a muy baja actividad
 Resolución aumentada de hidrocarburos poli aromáticos y otros compuestos de multi-anillo
aromático
 Altamente inerte

Discusión de los resultados:

Los compuestos deben tener un nivel suficiente de volatilidad y estabilidad térmica en el cual el punto de ebullición y
la capacidad en la que interaccionan en la fase estacionaria puedan ser analizadas por GC.
El orden de la elución después de algún cambio se debe comprobar, ya que el orden de elución no se reorganiza
inadvertidamente.

Conclusiones:
La cromatografía de gases es una técnica de una mezcla de compuestos (solutos) en componentes individuales para
facilitar la identificación, en esta practica pudimos conocer los componentes del cromatógrafo.
Se definió que uno de los requisitos es la volatilidad y sus condiciones analíticas.
Pudimos deducir lo que es el efecto de la temperatura en las separaciones cromatográficas y como ella puede influir
incluso en el orden elución de los compuestos.

Recomendaciones:
 Seguir las instrucciones dictadas por el docente.
 Aprender las partes del cromatógrafo de gases.
 Utilizar de manera correcta los reactivos o compuestos.

Bibliografía

(s.f.). Cromatografia de gases. Obtenido de

https://www.mncn.csic.es/docs/repositorio/es_ES/investigacion/cromatografia/cromatografia_de_gases.pdf
UIB. (s.f.). Obtenido de Universitat: https://sct.uib.es/Instruments-i-equips-dels-Serveis-Cientificotecnics/Area-de-
cromatografia/Cromatografia-de-gases.cid108074

Harris, D. (2001), Análisis Químico Cuantitativo, Editorial Reverté S.A., Barcelona-España.

Skoog, D. A. (2008), Principios del Análisis Instrumental, Cengage Learning Editores, México