UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE SAN LUIS POTOSÍ

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

LABORATORIO DE FUNDAMENTOS DE
ANALISIS INSTRUMENTAL

NOMBRE DEL ALUMNO: Fernando Mendoza Juarez

NOMBRE DEL MAESTRO_JUANA LISBETH RODRÍGUEZ RODRÍGUEZ_

FECHA 26/08/2022 GRUPO Viernes de 1-3PM

 CROMATOGRAFÍA DE GASES I

VALORES a) Nombre del Laboratorio: Laboratorio de fundamentos de análisis instrumental

b) Nombre del alumno: Fernando Mendoza Juarez

c) Fecha (día y hora): 26/08/2022 desde las 1pm hasta las 3pm

d) Nombre del tema: PARÁMETROS CROMATOGRÁFICOS

e) Objetivos:

▪ Integra los elementos estructurales de un cromatógrafo de gases

▪ Calcula los parámetros cromatográficos a partir de la información experimental

proporcionada.

▪ Interpreta los resultados obtenidos y selecciona las condiciones

experimentales para el análisis de una muestra.

Introducción

La cromatografía de gases es una técnica utilizada para separar los diferentes

compuestos volátiles de una muestra. La muestra se volatiliza y se inyecta en
la cabeza de una columna cromatográfica (fase estacionaria). La elución se
produce por el flujo de una fase móvil de un gas inerte, el cual no interacciona
con las moléculas de la muestra; su única función es la de transportar el analito
a través de la columna. En cromatografía de gases se usan dos tipos de
columnas, las empaquetadas, o de relleno y las tubulares abiertas, o capilares.
Entre los detectores más usados se encuentra el detector FID (ionización de
llama) y el detector TCD (conductividad térmica).
Procedimiento

Inicio

1
Montar las columnas

Cambiar septum

Abrir el gas de arrastre

(presión de salida del
Nitrógeno 8.5 Kg/cm2 ).

4
Encender el regulador del
laboratorio

1
 1

5
4
Encender el regulador del
cromatógrafo.

PROTECT SWITCH Y
HEATER SWITCH deben
estar en ON.

7
4
Encender el aparato.

8
La entrada del gas de
arrastre al aparato debe
estar abierta y el
manómetro PRIMARY
debe estar en 5 Kg/cm2 .

9
4
Colocar la presión del gas
de arrastre en 40 ml/min.

2
 2

10
4
Colocar las condiciones:

11
Presionar START para
comenzar
Cuando se alcanzan las
condiciones establecidas el
aparato debe marcar
READY. Para saber el valor
que va teniendo la columna
y el inyector:
12 MONITOR INJ MONITOR
COLUMNA
Encender el registrador
(Inyectar 2 microlitros de
muestra en cada caso.)

Los valores de ambos

deben estar en 100. Si la
línea base no está entre
estos valores, ajustar con
el botón CURRENT
13 ZERO FINE para ajustes
pequeños y con el botón
Encender el registrador COARSE (Ajuste grueso)
para ajustes más
grandes. (Girar el botón
indicado según se
requiera aumentar o
disminuir).

13
Colocar
SPEED 30 ENTER
METHOD 40 ENTER
ATT 3 ENTER

3
 3

14
Inyectar 2 microlitros de
muestra en cada caso.

15
Inyectar la muestra de
debe presionar al mismo
tiempo START en el
registrador.

16

Para terminar, cambiar las

temperaturas del
programa a 25°C

17
Esperar a que la
temperatura de la
columna, el inyector y el
TCD alcancen la
temperatura programada

18 19

Apagar el aparato, el Cerrar tanque de

registrador y el regulador Nitrógeno

FIN
f) Resumen de la Investigación Teórica:

1. Fundamento de la cromatografía y su clasificación con respecto a la fase móvil

y a la estacionaria.

R= Método utilizado para la separación, identificación y determinación de los

componentes de mezclas complejas donde se emplea una fase estacionaria
y una móvil. La fase estacionaria está fijada en la columna o en una superficie
plana, mientras que la fase móvil se desplaza sobre la fase estacionaria
acarreando una mezcla en la que se encuentra el analito, la fase móvil puede
ser desde gases hasta líquidos o fluidos supercríticos. La separación está
basada en la diferencia de velocidades de migración entre los componentes
de la fase móvil.

Se clasifican en:
En la fase estacionaria
• Liquida (C. partición) y solida (C. adsorción)
En fase móvil
• Gas(C. de Gas) y Liquido(C. de líquidos)

2. a) Clasifica las columnas cromatográficas.

• Columnas capilares o Tubulares: Son tubos de gran longitud y poco
diámetro, en su superficie se fija fase liquida (estacionaria). Los tubos se
enrollan helicoidalmente dentro del horno termostatizado.
• Columnas de relleno o empaquetadoras: Columnas que se fabrican de
algún metal como el acero inoxidable o el cobre o incluso teflón; en
longitudes de 1 a 3 m y diámetros de 4mm (internos). Los tubos se rellenan
con un material compacto y solido (Partículas esféricas normalmente
como las diatomeas), cuya finalidad es retener la fase estacionaria con el
fin de conseguir la mayor superficie de contacto con la fase móvil.
• Columnas cromatográficas para gases: Están recubiertas internamente de
sílice fundido, contiene muy poco contenido en oxido de metales. La fase
solida se encuentra polimerizada por lo cual tiene un alto grado de
estabilidad. Muy útil para mezclas o compuesto químicos (volátiles) con
una temperatura menor a los 300°C.
• Columna cromatográfica para líquidos: La fase estacionaria se encuentra
compuesta por polímeros, por lo común de dieciocho carbonos. En este
caso la mezcla permanecerá liquida durante la separación.
b) Menciona por lo menos cinco características para las columnas
cromatográficas.

• Exactitud en la identificación de componentes

• Tiempos de retención precisos
• Resolución eficiente
• Alto grado de selectividad
• Poseen una fase estacionaria y una móvil
3. Para los métodos de cromatografía de gases:
a) ¿Cómo se selecciona una columna?
R=Se deben de tomar en cuenta algunos factores como la selectividad, la
polaridad de la muestra, también la ya conocida retención, esta última también
se ve afectada por la longitud de la columna o el diámetro de esta.
También podemos tomar en cuenta las velocidades de flujo.
b) Describe el proceso de medición de los diferentes tipos de muestras:
sólidas, líquidas y gaseosas
Solidos: Se disuelven las muestras en un disolvente adecuado para la
misma, después se colocará la solución en una jeringa que posteriormente
se inyectará.
Líquidos: Se utilizan válvulas rotatorias y jeringas de inyección que
controlan el flujo suministrado a la columna.
Gases: Se emplean válvulas rotatorias que facilitan la reproducibilidad.
Cuando la válvula está en posición normal y cuando el embolo esta hacia
afuera, la muestra entra por el conducto en la válvula, llenando el bucle de
muestra y sale por el conducto a la atmosfera, mientras que el gas portador
entra por él y va hacia la columna. En la posición de muestras el embolo
esta pasado, de forma que el gas portador fuerza a la muestra que estaba
en el bucle a dirigirse hacia la columna.
c) ¿Cómo se selecciona un detector?
Se selecciona a través de la sensibilidad que es la efectividad para convertir el
analito en una señal eléctrica, la linealidad que es la concentración de muestra
sobre el cual el detector mantiene una sensibilidad constante sin una desviación
arbitraria., el ruido y el rango dinámico lineal. También podríamos considerar
un rango de temperatura operante.

4. La temperatura de la columna, el flujo del gas de arrastre, el volumen de muestra

y la naturaleza de la fase estacionaria, son algunos de los factores en las
separaciones por cromatografía de gases; explica la influencia de cada uno de
ellos.
R=En la columna la temperatura influye en el punto de ebullición de las muestras
o mezclas presentes, una temperatura ligeramente superior al punto de
ebullición correspondiente causa un periodo de elución de consideración
razonable (de un par de minutos a 30 minutos). Para muestras con una amplia
escala de ebullición es conveniente a menudo aumentar la temperatura de la
columna, continuamente o por pasos amedida que avanza la separación.

En consideración de el flujo del gas de arrastre se considera inerte a la muestra

o mezcla, para no afectar la fase liquida de la columna, por esto mismo el
cromatograma a mayor peso molecular el proceso de arrastre será mucho más
lento y por esto mismo más efectivo (también a la inversa).

El volumen de la muestra indica la eficacia de las columnas requiere que la

muestra sea de tamaño adecuado, la inyección lenta de las muestras de
excesivo tamaño produce ensanchamiento de las bandas y una resolución
realmente pobre, si se usa una micro jeringa para inyectar las muestras a través
de un diafragma del caucho, mientras menor es la cantidad de la muestra, mejor
es la resolución del cromatograma, la forma del pico tendrá una mejor simetría
y se verán mucho más separados.

La naturaleza de la fase estacionaria representa la separación exitosa y clara

de los compuestos, depende de las interacciones de la muestra con la fase
estacionaria, que tienen lugar en la columna, las polaridades de la fase
 estacionaria y el soluto deben ser parecidos.

5. ¿Qué es un cromatograma, cómo se elabora y qué información analítica

proporciona?
R=Diagrama donde se representa la separación de una mezcla, mediante
las técnicas cromatográficas previamente definidas. En la parte de las
ordenadas se mide, normalmente, la magnitud de una propiedad física
presente en la muestra, mientras que en las abscisas se mide el
tiempo. Proporciona un análisis cualitativo (tiempo de retención) y
análisis cuantitativo (altura y área de los picos del cromatograma).

4 g) Define los siguientes parámetros cromatográficos, y expresa la ecuación para su

cálculo a partir de un cromatograma.

1. Tiempo de retención y tiempo muerto.

R=El tiempo de retención es aquel trascurrido desde la inyección de la muestra
hasta que se obtiene el máximo de un pico, mientras el tiempo muerto es aquel
necesario para que a especie no retenida pase a través de una columna y
avance al detector.
2. Tiempo de retención corregido.
R= Es el incremento del tiempo que transcurre desde que aparece el pico del
trazado y el del analito Tr = tr– tm
Donde tr es tiempo de retención y tm es tiempo muerto.
3. Factor de capacidad
R= Es un parámetro que describe la velocidad de migración de los analitos en la
columna 𝑙´𝑖 − 𝑙´𝑚
𝑘=
𝑖´𝑚

4. Número de platos teóricos:

R=Sirve para medir la eficacia en la columna y se da ´por el tiempo de retención
y el ancho de la base del pico
N=16( tg/Wb)^2

5. Altura equivalente de cada plato teórico

R= Mide la velocidad de ensanchamiento de la banda y este dado por a longitud
de la columna dividida entre el número de platos teóricos
H= L/N
6. Selectividad o retención relativa: Es la relación de la constante de distribución
de soluto retenido con menos fuerza α = k2 / k1

7. Factor de asimetría (T o As): Es la relación entre distancia desde la línea central

del pico a la pendiente de bajada T= W0,05 (ancho del pico al 5% de la
altura)/2f (distancia del máximo pico hasta el borde inicial del pico)
 Bibliografía

1. Skoog, D. A., (2001). Principios de Analisis Instrumental. 5a ed. McGraw Hill

2. ¿Cómo funciona un Detector de Conductividad Térmica (TCD)? | AGS ANALÍTICA [en línea]. (sin
fecha). AGS ANALÍTICA. [Consultado el 25 de agosto de 2022]

3. BURGET,C.A.; GREEN,L.E. and BONELLI, E.J. Chromatographic Methods in Gas Analysis. Hewlett
Packard. USA. 1979
4. CRIPPEN, Raymond C. Identification of Organic Compounds with Aid of Gas Chromatography. Mc Graw-
Hill. USA. 1973.