CROMATOGRAFIA DE GASES

Mikhail Tswett
Inventa la cromatografía en 1901 durante su
investigación con pigmentos vegetales.
Utilizó la técnica para separar varios pigmentos
vegetales como clorofilas, Xantofilas y los
carotenoides

2
Cromatografía

3
 Problemas de Sorción

Absorción Adsorción

4
 Introducción

Se usa cromatografía de
El cromatógrafo de gases, utiliza
gases (GC) para separar y
una fase móvil y una fase
analizar compuestos que pueden
estacionaria. Es decir, un gas
evaporar sin descomponerse. Se Los científicos usan la
móvil transporta
emplean la GC para analizar la GC para realizar análisis
la muestra a lo largo de un
pureza de una sustancia o para cuantitativos y cualitativos
soporte estacionario (una pieza
separar los componentes de una de analitos volátiles.
de vidrio o metal a la que se
mezcla y determinar la cantidad
conoce como columna) ubicado
relativa presente de cada uno de
en el interior del instrumento.
ellos.

5
 Introducción
Separación de compuestos

Los compuestos se separan debido a sus diferentes afinidades a la columna durante la

fase estacionaria. Los compuestos con menor afinidad eluirán antes de la columna,
mientras que aquellos que posean una mayor afinidad eluirán más tarde.

6
 Introducción
¿Qué sucede en el interior de la columna?

En la cromatografía de gases se utiliza una fase móvil

gaseosa para transportar la muestra a través de la
columna, que puede estar rellena o tener revestida la
superficie interior.

Al calentar la columna GC, los compuestos

comienzan a separarse en función de su punto de
ebullición. Si se cambia la columna por otra que
contenga una fase estacionaria polar, se modificará la
capacidad de separación. Los compuestos se
separarán de acuerdo con su punto de ebullición y su Columnas GC
polaridad.

7
 Introducción
¿Qué sucede en el interior de la columna?

8
 Parámetros clave

tri Tiempo de retención del

compuesto "i"
W1/2 Anchura de pico a la mitad de la
altura
Wbi Anchura de pico en la línea de
base

El tiempo de retención de un compuesto no retenido (tM o t0) también

se conoce como tiempo muerto. Las moléculas del soluto no retenido avanzan por la
columna a la misma velocidad que el gas portador.

9
 Parámetros clave
Factor de retención (k')
El factor de retención (también conocido como coeficiente de reparto o factor
de capacidad) es la relación entre los tiempos que un soluto pasa en las fases
estacionaria y móvil. Se calcula dividiendo el tiempo de retención entre el
tiempo de un pico no retenido (tM). Para un compuesto no retenido, tiene un
valor nulo (k = 0).

tr Tiempo de retención
tM Tiempo de retención del pico no retenido

10
La selectividad es una medida del tiempo o la distancia entre dos picos.
Si α = 1, ambos picos tendrán el mismo tiempo de retención y coeluirán. Selectividad o factor de
La selectividad se define como la relación de los factores de capacidad. separación (α)
Parámetros que influyen sobre el factor de retención:

Fase
estacionaria

Fase móvil
a Selectividad
k1 Factor de retención del primer pico

Temperatura k2 Factor de retención del segundo pico

11
 Eficiencia o número de platos teóricos (N)

La eficiencia de la columna se utiliza para comparar el rendimiento de diferentes

columnas. Se expresa por medio del número de platos teóricos (N).

Las columnas con un número alto de platos son más eficientes. Una columna con
un valor N alto generará picos más estrechos para un determinado tiempo de
retención que una columna con un valor N más bajo

Parámetros que influyen sobre la eficiencia de la columna:

Longitud de la columna (a mayor longitud, mayor eficiencia).
Tamaño de partícula (a menor tamaño de partícula, mayor eficiencia).

12
 Altura equivalente a un plato teórico (H)

Cuanto menor sea cada plato

Otra medida de la eficiencia de la
teórico, más platos "contendrá" una
columna es la altura equivalente a un
determinada longitud de columna.
plato teórico, que se representa
Esto se traduce en un mayor número
como "H". Habitualmente, se expresa
de platos por metro y una mayor
en milímetros.
eficiencia de la columna.

L Longitud de la columna (mm)

N Número de platos teóricos

13
 Resolución: separación en la línea de base

La resolución indica la capacidad de una

columna para separar los picos de interés.

Debe tener como mínimo un valor igual a 1

para conseguir una separación medible y una
cuantificación suficiente.

Se necesita un valor de a 0,6 para distinguir un

valle entre dos picos de la misma altura.

Para los métodos más robustos normalmente

se requieren valores iguales o superiores a 1,7.

14
La cromatografía de gases es una técnica
cromatográfica en la que la muestra se
volatiliza y se inyecta en la cabeza de una
columna cromatográfica. La elución se
produce por el flujo de una fase móvil de gas
inerte. Su única aplicación es la separación
de especies gaseosas de bajo peso
molecular. La GLC utiliza como fase
estacionaria moléculas de líquido
inmovilizadas sobre la superficie de un sólido
inerte.

15
 Instrumentación
La GC se lleva a cabo en un cromatógrafo de gases. Éste consta de diversos
componentes como el gas portador, el sistema de inyección de muestra, la columna
(generalmente dentro de un horno), y el detector.

16
 Instrumentación

Gas portador
• Sistemas de inyección
• Horno
• Columnas
• Detectores
• Factores que influyen en las
separaciones
• Aplicaciones cualitativas y
cuantitativas

17
 Gas portador

El gas portador debe ser un gas inerte, que no

reaccione con el analito o la columna.
Generalmente se emplean: helio, argón, nitrógeno,
hidrógeno o dióxido de carbono, y la elección
depende del tipo de detector empleado.

Generalmente la regulación de la presión se hace

a dos niveles: un primer a la salida del generador
del gas y el otro a la entrada del cromatógrafo,
donde se regula el flujo. Las presiones de entrada
varían entre 10 y 25 psi, lo que da lugar a caudales
de 25 a 150 mL/min en columnas de relleno y de 1
a 25 mL/min en columnas capilares.

18
Gas portador

19
 Sistema de inyección de muestra

La inyección de muestra es un apartado

crítico, pues debe inyectar una cantidad
adecuada, y debe introducirse de tal forma que
sea rápida para evitar fugas. Se emplea una
microjeringa (microlitros) para introducir el
analito en una cámara de vaporización
instantánea.

20
 Sistema de inyección de muestra

Esta cámara está a 50ºC por encima del

punto de ebullición del componente
menos volátil, y está sellada por una
junta de goma de silicona. Si la
columna empleada es ordinaria, el
volumen a inyectar será de unos 20 μL,
y en el caso de las columnas capilares
dicha cantidad es menor, de 10-3 μL.

21
Columnas y sistemas de control de temperatura

En GC se emplean dos tipos de

columnas: las empaquetadas o de
relleno y las tubulares abiertas o
capilares. La longitud de estas
columnas es variable, de 2 a 50
metros, y están construidas en
acero inoxidable, vidrio, sílice
fundida o teflón. Debido a su
longitud y a la necesidad de ser
introducidas en un horno, las
columnas suelen enrollarse en una
forma helicolidal con diámetros de
10 a 30 cm, dependiendo del
tamaño del horno.

23
24
25
26
27
 Horno

La temperatura se
Se mantiene a una puede mantener
temperatura constante
suficientemente alta (condiciones
para volatilizar una isotermas) o puede
porción de aumentar durante el
moléculas de la desarrollo
muestra. cromatográfico (tª
programada)

28
29
 Detector

El detector es la parte
del cromatógrafo que
se encarga de
determinar cuándo ha
salido el analito por el
final de la columna.

30
 Respuesta
Alta fiabilidad y
Sensibilidad semejante para
manejo sencillo
todos los analitos

Respuesta selectiva
y altamente
Respuesta lineal al Estabilidad y
predecible para un
analito reproducibilidad
reducido número de
analitos

Intervalo de
Tiempo de
temperatura de
respuesta corto
trabajo amplio

31
 Clasificación de detectores
Detectores según su Modo de
Según su Grado de Selectividad Respuesta:
: Dependientes del Flujo Másico.
Universales. Responde a la Producen una señal proporcional
Detectores según el
mayoría de los solutos que a la cantidad de soluto que pasa
Detectores proceso de detección
pasan por él. a través de él en la unidad de
Destructivos y No Ionización, Óptico-
Específicos ó Selectivos. tiempo pero es independiente del
destructivos espectroscópico,
Exhibe una gran respuesta a un volúmen de gas portador.
Electroquímico, etc.
grupo particular de substancias Dependiente de la Concentración.
con un mínimo de respuesta a Dan una señal proporcional a la
otras. cantidad de soluto por unidad de
volúmen de gas.

32
Detector termoiónico (TID, ThermoIonic Detector)

33
Detector de conductividad térmica (TCD, Thermical
Conductivity Detector)

34
Detector de captura de electrones (ECD, Electrón-Capture
Detector)

35
Detector de ionización de llama (FID, Flame Ionization Detector)

36
Detector de emisión atómica (AED, Atomic Emission Detector)

37
Respuestas
39
40
41
42
 Aplicaciones

La GC tiene dos importantes campos de aplicación. Por una parte su capacidad para
separar mezclas orgánicas complejas, compuestos organometálicos y sistemas
bioquímicos. Su otra aplicación es como método para determinar cuantitativa y
cualitativamente los componentes de la muestra. Para el análisis cualitativo se suele
emplear el tiempo de retención, que es único para cada compuesto dadas unas
determinadas condiciones (mismo gas portador, rampa de temperatura y flujo), o el
volumen de retención. En aplicaciones cuantitativas, integrando las áreas de cada
compuesto o midiendo su altura, con los calibrados adecuados, se obtiene la
concentración o cantidad presente de cada analito.

43
44
GRACIAS! GRACIAS!

45