Identificación de Candida en CHROMagar y evaluación morfológica

UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA DE LABORATORIO CLÍNICO
GUÍA PAE N° 7-8
ASIGNATURA: Micología Médica
INTEGRANTES: Karen Allo, Alison Hinojosa, Mabel Martínez y Keila Millán
SEMESTRE: Quinto PARALELO: “A”
FECHA: Miércoles 18 de enero de 2023
1. TEMA: Identificación de Candida en CHROMagar Candida y Evaluación de la

micromorfología de las levaduras mediante tubo germinal
2. OBJETIVOS:
2.1.GENERAL:
Identificar las diferentes especies de Candida según su crecimiento en el
medio CHROMagar Candida y mediante la técnica del tubo germinativo.
2.2.ESPECÍFICOS:
 Determinar las ventajas y desventajas de la prueba de tubo germinativo en
la identificación de C. albicans.
 Establecer las características principales de las diferentes especies del
género Candida.
 Conocer la especie más patógena de Candida spp.
3. MARCO TEÓRICO
La prueba de tubo germinal también es conocida como filamentación en suero, se
realiza en un tubo que contiene 0,5 ml de suero, se le inocula la cepa en estudio y
se incuba a 37 ºC, luego de 2 a 4 horas, con un asa en forma de aro se toma una
porción del tubo, se coloca en un portaobjetos junto con un cubreobjetos y se
observa en el microscopio. Esta prueba permite identificar C. albicans, del resto
de las especies de Candida de manera sencilla, rápida, económica y eficaz
mediante la morfología debido a que es la única que puede gemar 1. Otra de las
pruebas utilizadas para identificar hongos son los medios cromogénicos, que
permiten diferenciar especies de Candida de acuerdo con el color de las
colonias, verde para C. albicans/dubliniensis, azul C. tropicalis, café/beis C.

glabrata, C. kefyr, C. parapsilosis, C. lusitaniae y de color morado C. krusei. El
principio del medio cromogénico es detectar determinadas actividades
enzimáticas de las levaduras a través de la hidrólisis específica de un sustrato
cromogénico en presencia de un indicador de la enzima, es una prueba ideal para
diferenciar fácilmente los cultivos mixtos 2. Las especies de Candida pertenecen
a la microbiota del tubo digestivo y en menor cantidad en la piel, pueden provocar
candidiasis de la mucosa del TGI y vaginal, principalmente por C. albicans. Su
aislamiento se realiza en candidiasis orofaríngeas en pacientes HIV (+), los
cultivos crecen en 24 h, las colonias son grandes de color blanco de aspecto
cremoso y rugoso, no forma clamidoconidias y no tienen la capacidad de
metabolizar D-xilosa ni metil-Dglucósido. Por otro lado, C. krusei afecta a
personas inmunodeprimidas y aquellos con neoplasias hematológicas, las colonias
crecen de color rosa, y es más susceptible a las equinocandinas por lo que sería
un indicativo de la presencia de este hongo. C. famata es una levadura saprófita
que se encuentra en materia orgánica en descomposición y en algunos alimentos,
puede ser comensal de la piel y membranas mucosas, además, puede causar
infecciones fúngicas invasivas provocando peritonitis terciaria 3.
C. parapsilosis está relacionado con entornos hospitalarios producto de un
inadecuado manejo de catéteres, contaminación de material quirúrgico o
transmisión horizontal a partir de infecciones del personal en UCI. Es un hongo
levaduriforme, comensal del tejido epitelial, tubo digestivo y mucosas de los
genitales, no es considerado patógeno. C. tropicalis es una levadura tiene gran
capacidad invasiva, el 50-60% de los pacientes colonizados desarrollan CD. No
desarrollan micelio aéreo, a pesar de que pueden aparecer prolongaciones en los
bordes y superficie de las colonias.
C. auris es una levadura que provoca infecciones graves en el torrente sanguíneo
y los órganos, puede contagiarse de una persona a otra o por el contacto con
objetos o equipos, personas que se encuentran en hospitales o en residencias para
ancianos pueden estar colonizados con C. auris y diseminarlo.Incluso individuos
con sondas de respiración o alimentación o catéteres tienen mayor riesgo de
infección por lo que al ser un hongo resistente a múltiples fármacos causa brotes
en hospitales que son difíciles de identificar y tratar 4. Finalmente, C. glabrata es

el segundo hongo más frecuente después de C. albicans, se aísla tanto en
infecciones intrahospitalarias como en superficiales, principalmente en
candidiasis vulvovaginal recurrente, en la cavidad oral se considera un patógeno
oportunista, además, presenta resistencia a fármacos azólicos especialmente a
fluconazol 5.
4. LISTADO DE MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS
MATERIALES REACTIVOS EQUIPOS

 Placas portaobjetos  Cepas de Candida  Microscopios
albicans, tropicalis,
 Placas cubreobjetos  Estufa microbiológica
krusei en crecimiento en
 Cinta scotch caldo.  Centrifuga
 Asas microbiológicas  Agar Sabouraud en placa
Petri
 Papel óptico para limpiar  Agar Biggy en placa Petri
lente de inmersión  Agar Mycosel en placa
Petri
 Mechero bunsen
 Agar Papa dextrosa en
 Pinzas placa
 Tubos de ensayo  Placas con CHROMagar
Candida
 Gradilla  Solución salina suero
 Diferentes especies de
Candida crecidas en Agar
Sabouraud
5. ACTIVIDADES POR DESARROLLAR
Identificación bioquímica enzimática
Entre estas metodologías tenemos a los medios de cultivo que emplean sustratos
cromogénicos que permiten el aislamiento e identificación de algunas especies del
género Candida.
Entre los medios cromogénicos comercialmente disponibles tenemos al:

CHROMagar Candida, Cromogen albicans, Candida ID, Albicans ID2,
CandiSelect, Fluoroplate Candida, Agar SDCA - MUAG.
Se describen sistemas enzimáticos que usan un sustrato cromogénico para detectar

las enzimas MUGAL y PRO por lo que no requieren el uso de lámpara ultravioleta,
entre ellos tenemos a Candida albicans Screen, Murex C. albicans CA50. También
hay sistemas enzimáticos disponibles que permiten la identificación rápida de C.
albicans a partir de una colonia desarrollada sobre cualquier medio de cultivo
convencional, estos sistemas detectan una o dos enzimas β – galactosaminidasa y L
– prolina aminopeptidasa, presentes sólo en C. albicans. Para detectar estas enzimas
los sistemas comerciales pueden utilizar sustratos fluorogénicos y cromogénicos.
Entre otras metodologías de identificación se encuentran los sistemas enzimáticos

que emplean sustratos fluorogénicos, requiriendo para ello el uso de una lámpara
ultravioleta de 365 nm, es el caso del BactiCard Candida.
El medio CHROM agar Candida, es importante para identificar las especies del
género Candida en función de los colores como: C. albicans, C. tropicalis, C. krusei
y C. glabrata.
 La siembra se realiza a partir de cepas muestras biológicas con asa
microbiológica y se incuban a temperaturas de 30 a 37 ºC durante 48 horas.
 Si no posee muestras biológicas se tomará de las cepas entregadas como
muestras biológicas y se sembrará por separado cada una de las cepas de
candida en los cinco diferentes medios de cultivo.
 Luego del tiempo de incubación se diferenciará de la siguiente manera:
 C. albicans, son lisas y de color verde esmeralda.
 C. dubliniensis, de color verde oscuro.
 C. tropicalis colonia de color azul oscuro con un halo púrpura marrón en el
medio de cultivo.
 C. krusei. colonias rugosas con el centro rosado y el borde blanco.
 C. glabrata, colonia de color violeta morado.
Identificación de especies del género Candida Morfología de las colonias

1. Visualice la placa entregada e identifique colonias cremosas de color blanco
amarillento, lustrosas, poco elevadas y de bordes bien definidos.
Examen microscópico
2. Realice un fresco y observe células redondas u ovaladas de tres a siete micras
de diámetro, que se reproducen por blastoconidias y forman pseudomiceto en
la mayoría de las especies.
Tubo germinativo
Permite diferenciar las especies de Candida albicans de la no albicans.
3. Suspender un inóculo de la cepa pura de Candida con 24 horas de desarrollo

en 0,5 mL de suero humano o de conejo.
4. Incubar a 35-37 °C por 2-4h
5. Colocar 2 ó 3 gotas de la suspensión en una lámina portaobjeto y cubrir con
lámina cubreobjetos y observar al microscopio con objeto de 40X,
6. La prueba es positiva al visualizar una estructura elongada que se origina a
partir de la levadura.
7. Realizar esta prueba empleando cepas controles en paralelo a la cepa en
estudio.
Desarrollo a 42 °C
C. albicans y C. dubliniensis tienen comportamiento fisiológico y morfológico

similar y la prueba que los va a diferenciar en el laboratorio de microbiología es
el desarrollo a 42 °C en agar papa dextrosa.
8. Sembrar la cepa aislada en tubo o placa Petri que contenga agar papa dextrosa
o incubar a 42 °C por 48 horas.
9. Realizar un fresco y verificar siendo Positivo: C. albicans con desarrollo
óptimo y Negativo: C. dubliniensis sin desarrollo.
6. IMÁGENES
TINCIÓN GRAM
Figura 1. Colocación de una gota de solución Figura 2. Adición de una pequeña porción de la
salina en un portaobjetos colonia con ayuda del asa microbiológica.
Figura 3. Secado de la placa con ayuda del Figura 4. Colocación de cristal violeta por 1 min
mechero. y después lo lavamos.
Figura 5. Adición de Lugol por 1 min. Figura 6. Adición de alcohol acetona por 30 seg.
Figura 7. Adición de safranina por 1 min y dejamos secar a temperatura ambiente.

PREPARACIÓN EN FRESCO
Figura 8. Tomar una gota pequeña de la muestra Figura 9. Colocación de la gota sobre el
del tubo germinativo con ayuda del asa cubreobjetos.
microbiológica.
Figura 10. Esterilización del asa microbiológica Figura 11. Colocación del cubreobjetos sobre la
con ayuda del mechero. muestra.
7. RESULTADOS Y DISCUSIÓN:
TUBO GERMINATIVO
Candida spp.
Figura 12. Tubos germinales de C. albicans, C. qlabrata, C. formata, C. parapsilosis y C,

Krosei,
MEDIO CROMOGÉNICO
Candida albicans
Observación macroscópica Observación microscopica
C. albicans Levaduras
Figura 13. Crecimiento de colonias de Candida Figura 14. Levaduras de Candida albicans
albicans
Color específico: Verde claro Se observaron levaduras ovales con paredes
Se observó que las colonias de C. albicans en finas, sin embargo, según Bonilla11 en tejidos
medio cromogénico presentan un color verde infectados también se han observado formas
claro. Sin embargo, según Bonifaz10 en agar filamentosas, con extremos redondos y
dextrosa de Sabouraud las colonias presentan pseudohifas alargadas. Esta especie coloniza
un color crema o blanquecinas, lisas y la vagina, los tractos digestivos y
cremosas. respiratorios, puede infectar piel, uñas y
mucosas, pero en pacientes
inmunodeprimidos es la complicación más
seria de la enfermedad.
Candida krusei
Observación macroscópica Observación microscópica
C. krusei
Levaduras
Figura 15. Crecimiento de colonias de Candida krusei Figura 16. Levaduras de Candida krusei
Color específico: rosa claro Se observaron celulas cilindricas, las colonias

Las colonias de C. krusei en el medio separadas exceden los 5 mm. Según Figueras12
cromogénico presenta un color rosado claro Candida krusei es un microorganismo
con borde blancuzo. De acuerdo con Bonifaz10 dimorfico que se puede presentar en forma de
la superficie es lisa con algunos pliegues y levaduras y pseudohifas.
margen irregular bordeado con
pseudomicelios.
Candida famata
C. formata Levaduras
s
Figura 17. Crecimiento de colonias de Candida famata Figura 18. Levaduras de Candida famata.
Color especifico: rosa pálido
Hongo que puede originar colonias rosas más Es muy raro que se presente pues se encuentra
o menos intensas. Linares1 menciona que C. en menos del 1% de las micosis. Presenta
famata, C. humicola, y Cryptococcus forma de levaduras por lo que según
neoformans pueden generar la coloración Buitrago13 es un hongo comensal asociado a la
rosa, mientras que el resto de las especies cavidad nasal de los humanos y diferentes
producen un color blanco-crema, por lo que se animales.
requiere de una identificación bioquímica
posterior.
Candida parapsilosis

C. parapsilosis
Levaduras
Figura 19. Crecimiento de colonias de Candida Figura 20. Levaduras de Candida parapsilosis
Parapsilosis
Color específico: café/beis
Presentan gran cantidad de levaduras, sin

Las colonias son lisas, brillantes y de borde
embargo, Hernández2 considera que también
regular, normalmente se encuentran en la piel se pueden observar colonias de pseudohifas.
y con menor frecuencia en la mucosa vaginal1.
Candida tropicalis
C. tropicalis Levaduras
Figura 22. Observación de levaduras. Tinción Gram

Figura 21. Observación de colonias de C. tropicalis en (40x).
agar cromogénico.
Color específico: colonias verdosas Se observaron levaduras gram positivas.

Según Vásquez15, la infección por C.
La casa comercial Becton Dickinson14 indica
tropicalis se presenta en pacientes
que pueden ser de azul verdoso a azul metálico
hospitalizados en UCI debido a biofilms
o gris azulado, así como presentar o no halos
provenientes del uso de catéteres. Así mismo,
violetas.
la administración previa de antibióticos
reduce la microbiota intestinal que controla su
proliferación.
TINCIÓN GRAM
Candida tropicalis Candida albicans
Levaduras Levaduras
Figura 23. Observación microscópica de C. tropicalis. Figura 24. Observación microscópica de C. albicans.
Tinción Gram (40x). Tinción Gram (40x).
CARACTERÍSTICAS
Se observaron levaduras gram positivas,

Se observaron levaduras gram positivas redondas, de tamaño mediano y agrupadas.
redondas, de tamaño variable y agrupadas en Según Bonifaz10, C. albicans forma parte de la
racimos. De acuerdo con Santos16, este microbiota y causan alteraciones endógenas
microorganismo es el responsable de las por cierto factor de predisposición; aunque
infecciones de tracto urinario y no suelen también puede ser adquirida de manera
presentar síntomas. exógena por medio de inoculación traumática
de levaduras o cateterismo.
CASO CLÍNICO
Candida auris
Figura 25. Presencia de placas blanquecinas en la

cavidad bucal. Figura 26. Coloración
amarillenta en el pulgar.
Paciente femenina de 10 años acompañada de su tutor, acude

Datos Informativos a consulta externa en el área de Dermatología de un hospital
privado.
En el examen físico, se observó en la cavidad oral y labios una
placa blanquecina que cubre los bordes de la lengua por lo que
Signos y síntomas al ser removida se observan fisuras en las mucosas, mientras
que, en la uña del pulgar derecho de la mano existe
inflamación acompañada de una coloración amarillenta.
En un cultivo de CHROM agar Candida se observó colonias
blanquecinas con un halo azulado. Por otro lado, en el agar
dextrosa de Sabouraud el cultivo de la uña se observó el
Diagnóstico crecimiento de Tricophyton spp. sin embargo, en los estudios
clínicos microscópicos se encontraron levaduras, por lo que se
confirma candidiasis patógena crónica dada por la especie de
Candida auris debido al déficit de linfocitos T.
Para destruir las paredes de las levaduras se indica administrar
antimicóticos orales como Itraconazol (100 mg) 1 vez al día
Tratamiento por dos meses, al igual que la nistatina (1000000 U/ml) 4
veces al día para eliminar lentamente las micosis cutáneas y
orales.
6, 7, 8, 9
8. CONCLUSIONES
 La siembra de especies de Candida en el medio BBL CHROMagar presentaron

mayor crecimiento en comparación a los medios normalmente empleados, así
mismo este medio se caracteriza por diferenciar los tipos de Candida según la
coloración del medio en donde C. albicans presentó colonias verde claro, C.
krusei colonias planas y grandes de color rosa claro y con bordes blanquecinos,
C. famata presentó colonias pequeñas de color púrpura, C. parapsilosis pequeñas
colonias blanquecinas y C. tropicalis colonias azul verdosas. Por otro lado, la
técnica del tubo germinal produjo hifas y levaduras, sobre todo en C. albicans,
mientras en otras especies se observaron pseudohifas. Dicha técnica es más
económica que la anterior, por ello es de utilidad para confirmar la presencia de
Candida.
 La producción de tubos germinativos para la identificación de la especie C.
albicans es una prueba sencilla, rápida y económica. La prueba del tubo
germinativo consiste en incubar la levadura en suero a 37 °C durante 2 horas, al
cabo de las cuales, se observará microscópicamente la formación de un tubo
germinal sin constricción en su punto de origen. Solo C. albicans es capaz de
formar un brote del micelio, sin embargo, los inconvenientes de esta prueba están
dados a que C. dubliniensis, especie de características fenotípicas casi similares,
también producen tubos germinales, por lo que esta prueba no discrimina ambas
especies, solo puede orientar en la identificación y es necesario complementarla
con otros estudios. De la misma forma, pueden obtenerse resultados falsos
positivos en otras especies del género como C. tropicalis y C. parapsilosis que
producen estructuras semejantes a un tubo germinativo.
 C. albicans se caracteriza por presentar clamidosporas, el pseudomicélio es
abundante y ramificado, además, los blastosporos son ovoides y la hifa posee
varios septos, por el contario en la especie de C. parapsilosis el pseudomicélio
forma células gigantes, generalmente es ramificado, verificándose en sus
constricciones pocos blastosporos ovoide ligeramente alongados. La especie de
C. tropicalis produce pseudomicélio abundante y ramificado, con verticilos de
blastosporos en cadenas simples, irregulares o ramificadas y ovoides, mientras
que, el clamidosporo tiene forma de gota. La especie C. krusei presenta
pseudomicélio constituido de células alargadas y delgadas ramificadas, los

blastosporos son ovoides, cilíndricos que se desintegran fácilmente
permaneciendo a los lados del pseudomicélio en pequeños aglomerados.
 Candida spp. afecta mucosas, piel, uñas generalmente, y en casos clínicos graves,
pulmones e intestinos. La especie causante de micosis más frecuente es C.
albicans, sin embargo, C. auris es considerada la más patógena al estar
relacionada con infecciones graves a nivel hospitalario debido a la fácil
diseminación, es resistente a los principales antimicóticos y su identificación es
compleja.
9. RECOMENDACIONES:
 Considerar la prueba del tubo germinativo como método principal para la
identificación de C. albicans ya que a diferencia de las otras especies es la única
que tiene la capacidad de gemar.
 Para identificar los aislados falsos positivos y falsos negativos, se recomienda
utilizar pruebas adicionales a las del tubo germinal, como son la producción de
clamidosporas, medios cromogénicos, aislamiento de azucares, termotolerancia,
resistencia frente a la cicloheximida y la genotipificación.
 Utilizar el medio CHROMagar debido a que por su alta sensibilidad y
especificidad será un método fácil para una correcta identificación de Candida
spp.
10. CUESTIONARIO:
1. Analice la composición del medio CHROMagar Candida y establezca la

función de cada uno y por qué en este medio no crecen bacterias
El medio CHROMagar Candida presenta un pH de 6 ± 0,3 y está compuesto
por 10 g/L de cromopeptona que proporciona nitrógeno, minerales, vitaminas
y aminoácidos para el desarrollo de las colonias, 20 g/L de glucosa, un
carbohidrato fermentable que brinda carbono y energía, 2 g/L de mezcla
cromógena para identificar y diferenciar las especies según su color y
morfología, 0,5 g/L de cloranfenicol, un antibiótico bacteriostático anfenicol
que inhibe el crecimiento de bacterias contaminantes y 15 g/L de agar que es
el agente solidificante. Como fue mencionado anteriormente, en el medio no

crecen bacterias por la presencia de cloranfenicol 14 17.
2. ¿Qué color poseen Candida albicans, krusei y tropicalis en CHROMagar

Candida?
De acuerdo con el inserto correspondiente a la casa comercial BD (x) y a la
práctica realizada, C. albicans presenta colonias de color verde claro a
mediano, C. krusei colonias rosadas con bordes blanquecinos, mientras C.
tropicalis, colonias azul grisáceo a azul verdoso o metálico, además puede o
no presentar halos color violeta.
3. ¿Cómo se observan las colonias de levaduras de Candidas, Cryptococcus,

Rhodotorulas en agar Sabouraud?
Levaduras en Agar Sabouraud

Macroscópica: Se observan colonias
Levaduras de Candida spp
blancas, blandas, cremosas y lisas.
Microscópica: forma de levadura,
presenta un aspecto de células redondas
u ovaladas, agrupadas en pequeños
grupos, sin embargo, se observan
también en forma de filamentos, células
alargadas, pseudohifas o
pseudomicelio18.
Levaduras de Cryptococcus
Macroscópica: se observaron colonias
lisas, blanquecinas, de consistencia dura,
superficie seca y de aspecto mucoso.
Microscópica: Los Cryptococcus son
levaduras redondas u ovales, alargadas y
pseudohifas19.
Macroscópica: las colonias de

Rhodotorulas son visibles a las 24 horas
Levaduras de Rhodotorulas del comienzo de su incubación y
presenta colonias mucosas brillantes que
pueden variar de color anaranjado, coral
a salmón.
Microscópica: Son células mucoides,
encapsuladas y fermentan azúcar.
Raramente producen micelios, no
forman seudohifas, se observan células
levaduriformes ovaladas, en racimos
irregulares y laxos20.
4. Indique las diferencias entre colonias de diferentes levaduras (color,

textura, elevación, margen, forma, pigmento en el anverso, etc) en agar
Sabouraud y cromegénicos.
DIFERENCIAS
Agar Sabouraud Cromogénicos
Componentes del medio

- Es un medio de peptona - El cultivo cromogénicos con
suplementado con dextrosa para sustratos enzimáticos permite separar
favorecer el crecimiento de los dos o más cepas juntas de diferentes
hongos. especies en función de la coloración,
textura y morfología de las colonias.
Selectividad
- Es un medio no selectivo para el - Es un medio selectivo y de
cultivo y mantenimiento de hongos diferenciación para el aislamiento de
no patógenos y patógenos en especial C. albicans, C. tropicalis y C. krusei.
dermatofitos. - Inhibe el crecimiento de bacterias
- Logra selectividad mediante la - La mezcla cromógena está formada
adición de cloranfenicol y de sustratos artificiales, que liberan
gentamicina que inhiben una amplia compuestos de colores diferentes al
variedad de bacterias gran negativas ser degradados por enzimas
y gran positivas21. especificas14.
5. ¿Cuál es la diferencia fundamental de un tubo germinativo de un falso

positivo?
Se pueden obtener resultados falsos positivos en especies del género como C.
tropicalis y C. parapsilosis que producen estructuras semejantes a la del tubo
germinativo, por lo que la diferencia radica en la presencia de una zona de
constricción característica adyacente al punto de origen del mismo, ubicada
en la célula madre 22.
6. ¿Con sus palabras describa el procedimiento para la realización de la

prueba de tubo germinal?
Para la prueba de tubo germinal primero se coloca en un tubo 0,5ml de suero
del paciente, luego se le inocula la colonia de un hongo y se incuba a 37 º C
durante 2 a 4 horas, posteriormente con un asa de aro se toma una porción del
contenido del tubo y se coloca en un portaobjetos junto con un cubreobjetos,
finalmente se observa en el microscopio la forma del hongo.
7. ¿Por qué se realiza la prueba de tubo germinal en suero y no en caldo de

cultivo?
Esta prueba se realiza en suero debido a que por su composición se puede
observar fácilmente el aspecto filamentoso o la producción de tubo germinal
de diferentes cepas de Candida spp. sin embargo, no se realiza en caldo de
cultivo debido a que está compuesto por pluripeptonas y extracto de carne,
además, para realizar dicha prueba es necesario suero humano o de conejo 23.
8. ¿Todas las cepas de Candida albicans dan positivo a la prueba de tubo

germinal? Justifique
Sí, debido a que es uno de los métodos más utilizados como prueba
confirmatoria con un 90-95% de aislamiento de C. albicans y C. dubliniensis,
considerada como prueba de filamentación en suero o filamentación precoz
por lo que resulta ser positivo para esta prueba. Sin embargo, tienen como
desventaja que un 5% a 10% de las cepas de C. albicans no producen tubo
germinal, además, puede brindar resultados falsos positivos con cepas de C.
tropicalis y C. parapsilosis por la formación de estructuras similares en el tubo
germinal24.
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23. Linares M, Solís F. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en
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Disponible en: http://www.guia.reviberoammicol.com/Capitulo11.pdf
24. Duarte A, Márquez A, Araujo C, Pérez C. Modalidades de la Prueba del Tubo
Germinal. Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiología. [Internet].
2009 [citado 17 de diciembre de 2022]; 29 (1): 66 – 68. Disponible en:
https://www.redalyc.org/pdf/1994/199416353014.pdf

Identificación de Candida en CHROMagar y evaluación morfológica

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Identificación de Candida en CHROMagar y evaluación morfológica

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UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

GUÍA PAE N° 7-8

ASIGNATURA: Micología Médica

INTEGRANTES: Karen Allo, Alison Hinojosa, Mabel Martínez y Keila Millán

SEMESTRE: Quinto PARALELO: “A”

FECHA: Miércoles 18 de enero de 2023

1. TEMA: Identificación de Candida en CHROMagar Candida y Evaluación de la

colonias, verde para C. albicans/dubliniensis, azul C. tropicalis, café/beis C.

en hospitales que son difíciles de identificar y tratar 4. Finalmente, C. glabrata es

4. LISTADO DE MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS

MATERIALES REACTIVOS EQUIPOS

5. ACTIVIDADES POR DESARROLLAR

Identificación bioquímica enzimática

Entre los medios cromogénicos comercialmente disponibles tenemos al:

Se describen sistemas enzimáticos que usan un sustrato cromogénico para detectar

Entre otras metodologías de identificación se encuentran los sistemas enzimáticos

Identificación de especies del género Candida Morfología de las colonias

Permite diferenciar las especies de Candida albicans de la no albicans.

3. Suspender un inóculo de la cepa pura de Candida con 24 horas de desarrollo

C. albicans y C. dubliniensis tienen comportamiento fisiológico y morfológico

Figura 7. Adición de safranina por 1 min y dejamos secar a temperatura ambiente.

Figura 12. Tubos germinales de C. albicans, C. qlabrata, C. formata, C. parapsilosis y C,

Color específico: rosa claro Se observaron celulas cilindricas, las colonias

Observación macroscópica Observación microscópica

Observación macroscópica Observación microscópica

Presentan gran cantidad de levaduras, sin

Figura 22. Observación de levaduras. Tinción Gram

Color específico: colonias verdosas Se observaron levaduras gram positivas.

Candida tropicalis Candida albicans

Se observaron levaduras gram positivas,

Figura 25. Presencia de placas blanquecinas en la

Paciente femenina de 10 años acompañada de su tutor, acude

 La siembra de especies de Candida en el medio BBL CHROMagar presentaron

pseudomicélio constituido de células alargadas y delgadas ramificadas, los

1. Analice la composición del medio CHROMagar Candida y establezca la

el agente solidificante. Como fue mencionado anteriormente, en el medio no

2. ¿Qué color poseen Candida albicans, krusei y tropicalis en CHROMagar

3. ¿Cómo se observan las colonias de levaduras de Candidas, Cryptococcus,

Levaduras en Agar Sabouraud

Macroscópica: las colonias de

4. Indique las diferencias entre colonias de diferentes levaduras (color,

Componentes del medio

5. ¿Cuál es la diferencia fundamental de un tubo germinativo de un falso

6. ¿Con sus palabras describa el procedimiento para la realización de la

7. ¿Por qué se realiza la prueba de tubo germinal en suero y no en caldo de

8. ¿Todas las cepas de Candida albicans dan positivo a la prueba de tubo

9. Comité de Medicamentos de la Asociación Española de Pediatría. Itraconazol.

22. Duarte A, Márquez A, Araujo C, Pérez C. Modalidades de la Prueba del Tubo

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