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OMS - Manual de Bioseguridad en El Laboratorio

OMS - Manual de Bioseguridad en El Laboratorio

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Durante los más de 20 años transcurridos desde su primera publicación
en 1983, el Manual de bioseguridad en el laboratorio ha proporcionado
orientación práctica sobre las técnicas de bioseguridad a los
laboratorios de todos los niveles. Las técnicas microbiológicas apropiadas
y el uso correcto del equipo de bioseguridad por personal bien
adiestrado siguen siendo los pilares fundamentales de la bioseguridad
en el laboratorio. Sin embargo, la globalización, los importantes avances
tecnológicos, la aparición de nuevas enfermedades y las graves
amenazas que suponen el uso indebido y la liberación intencionados
de agentes microbiológicos y toxinas han hecho necesario revisar los
procedimientos conocidos. En consecuencia, para esta nueva edición
el manual ha sido profundamente revisado y ampliado.
El nuevo manual abarca la evaluación de riesgos y el uso de la tecnología
del ADN recombinante en condiciones de seguridad y ofrece
directrices para la puesta en servicio y la certificación de los laboratorios.
Se presentan conceptos de protección biológica y se reflejan las
normas más recientes para el transporte de sustancias infecciosas.
También se han incorporado materiales sobre la seguridad en los
laboratorios asistenciales que han sido publicados previamente por la
OMS en otros documentos.
Es de esperar que el manual siga sirviendo de estímulo para que los
países implanten programas de seguridad biológica y códigos de
prácticas nacionales para la manipulación sin riesgo de material
potencialmente infeccioso.
Durante los más de 20 años transcurridos desde su primera publicación
en 1983, el Manual de bioseguridad en el laboratorio ha proporcionado
orientación práctica sobre las técnicas de bioseguridad a los
laboratorios de todos los niveles. Las técnicas microbiológicas apropiadas
y el uso correcto del equipo de bioseguridad por personal bien
adiestrado siguen siendo los pilares fundamentales de la bioseguridad
en el laboratorio. Sin embargo, la globalización, los importantes avances
tecnológicos, la aparición de nuevas enfermedades y las graves
amenazas que suponen el uso indebido y la liberación intencionados
de agentes microbiológicos y toxinas han hecho necesario revisar los
procedimientos conocidos. En consecuencia, para esta nueva edición
el manual ha sido profundamente revisado y ampliado.
El nuevo manual abarca la evaluación de riesgos y el uso de la tecnología
del ADN recombinante en condiciones de seguridad y ofrece
directrices para la puesta en servicio y la certificación de los laboratorios.
Se presentan conceptos de protección biológica y se reflejan las
normas más recientes para el transporte de sustancias infecciosas.
También se han incorporado materiales sobre la seguridad en los
laboratorios asistenciales que han sido publicados previamente por la
OMS en otros documentos.
Es de esperar que el manual siga sirviendo de estímulo para que los
países implanten programas de seguridad biológica y códigos de
prácticas nacionales para la manipulación sin riesgo de material
potencialmente infeccioso.

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Organización Mundial de la Salud

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Ó
N

O
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S

ISBN 92 4 354650 3

MANUAL DE
BIOSEGURIDAD EN
EL LABORATORIO

Tercera edición

Durante los más de 20 años transcurridos desde su primera publica-
ción en 1983, el Manual de bioseguridad en el laboratorio ha propor-
cionado orientación práctica sobre las técnicas de bioseguridad a los
laboratorios de todos los niveles. Las técnicas microbiológicas apro-
piadas y el uso correcto del equipo de bioseguridad por personal bien
adiestrado siguen siendo los pilares fundamentales de la bioseguridad
en el laboratorio. Sin embargo, la globalización, los importantes avan-
ces tecnológicos, la aparición de nuevas enfermedades y las graves
amenazas que suponen el uso indebido y la liberación intencionados
de agentes microbiológicos y toxinas han hecho necesario revisar los
procedimientos conocidos. En consecuencia, para esta nueva edición
el manual ha sido profundamente revisado y ampliado.

El nuevo manual abarca la evaluación de riesgos y el uso de la tecno-
logía del ADN recombinante en condiciones de seguridad y ofrece
directrices para la puesta en servicio y la certificación de los laborato-
rios. Se presentan conceptos de protección biológica y se reflejan las
normas más recientes para el transporte de sustancias infecciosas.
También se han incorporado materiales sobre la seguridad en los
laboratorios asistenciales que han sido publicados previamente por la
OMS en otros documentos.

Es de esperar que el manual siga sirviendo de estímulo para que los
países implanten programas de seguridad biológica y códigos de
prácticas nacionales para la manipulación sin riesgo de material
potencialmente infeccioso.

MANUAL DE BIOSEGURIDAD
EN EL LABORATORIO

Tercera Edición

ORGANIZACIÓN MUNDIAL DE LA SALUD

Ginebra

2005

Catalogación por la Biblioteca de la OMS

Organización Mundial de la Salud.
Manual de bioseguridad en el laboratorio.– 3a

ed.

1.Contención de riesgos biológicos2.Laboratorios – normas
3.Infección de laboratorio – prevención y control4.ManualesI.Título.

ISBN 92 4 354650 3

(Clasificación LC/NLM:QY 25)

Esta publicación ha contado con el apoyo de la Donación/Acuerdo de Cooperación N°
U50/CCU012445-08 de los Centros para el Control y la Prevención de Enfermedades (CDC),
Atlanta,GA (EE.UU.).Su contenido es responsabilidad exclusiva de los autores y no representa
necesariamente la opinión oficial de los CDC.

© Organización Mundial de la Salud, 2005
Se reservan todos los derechos.Las publicaciones de la Organización Mundial de la Salud
pueden solicitarse a Ediciones de la OMS,Organización Mundial de la Salud,20 Avenue
Appia,1211 Ginebra 27,Suiza (tel.: +41 22 791 2476;fax: +41 22 791 4857;correo electrónico:
bookorders@who.int).Las solicitudes de autorización para reproducir o traducir las publica-
ciones de la OMS – ya sea para la venta o para la distribución sin fines comerciales – deben
dirigirse a Ediciones de la OMS,a la dirección precitada (fax: +41 22 791 4806;correo elec-
trónico:permissions@who.int).
Las denominaciones empleadas en esta publicación y la forma en que aparecen presentados
los datos que contiene no implican,por parte de la Organización Mundial de la Salud,juicio
alguno sobre la condición jurídica de países,territorios,ciudades o zonas,o de sus autoridades,
ni respecto del trazado de sus fronteras o límites.Las líneas discontinuas en los mapas repre-
sentan de manera aproximada fronteras respecto de las cuales puede que no haya pleno acuerdo.
La mención de determinadas sociedades mercantiles o de nombres comerciales de ciertos
productos no implica que la Organización Mundial de la Salud los apruebe o recomiende con
preferencia a otros análogos.Salvo error u omisión,las denominaciones de productos patenta-
dos llevan letra inicial mayúscula.
La Organización Mundial de la Salud ha adoptado todas las precauciones razonables para
verificar la información que figura en la presente publicación,no obstante lo cual,el material
publicado se distribuye sin garantía de ningún tipo,ni explícita ni implícita.El lector es respon-
sable de la interpretación y el uso que haga de ese material,y en ningún caso la Organización
Mundial de la Salud podrá ser considerada responsable de daño alguno causado por su
utilización.

Diseño:minimum graphics
Impreso en Malta

•iii•

Prefacio

viii

Agradecimientos

x

1.Principios generales

1

Introducción

1

PARTE IDirectrices en materia de bioseguridad

5

2.Evaluación del riesgo microbiológico

7

Muestras para las que se dispone de información limitada

8

Evaluación de riesgos y microorganismos genéticamente modificados

8

3.Laboratorios básicos –niveles de bioseguridad 1 y 2

9

Código de prácticas

9

Diseño e instalaciones del laboratorio

12

Material de laboratorio

15

Vigilancia médica y sanitaria

16

Capacitación

17

Manipulación de desechos

18

Seguridad química, eléctrica y radiológica, protección contra incendios
y material de seguridad

20

4.El laboratorio de contención –nivel de bioseguridad 3

21

Código de prácticas

21

Diseño e instalaciones del laboratorio

22

Material de laboratorio

23

Vigilancia médica y sanitaria

24

5.El laboratorio de contención máxima – nivel de bioseguridad 4

26

Código de prácticas

26

Diseño e instalaciones del laboratorio

27

6.Animalarios

30

Animalarios – nivel de bioseguridad 1

31

Animalarios – nivel de bioseguridad 2

31

Índice

MANUAL DE BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO

•iv•

Animalarios – nivel de bioseguridad 3

32

Animalarios – nivel de bioseguridad 4

33

Invertebrados

34

7.Directrices para la puesta en servicio de laboratorios e instalaciones

36

8.Directrices para la certificación de laboratorios e instalaciones

39

PARTE IIBioprotección en el laboratorio

47

9.Conceptos de bioprotección en el laboratorio

49

PARTE IIIEquipo de laboratorio

53

10.Cámaras de seguridad biológica

55

Cámaras de seguridad biológica de clase I

56

Cámaras de seguridad biológica de clase II

57

Cámaras de seguridad biológica de clase III

60

Conexiones de aire de las cámaras de seguridad biológica

60

Elección de una cámara de seguridad biológica

62

Uso de las cámaras de seguridad biológica en el laboratorio

62

11.Equipo de seguridad

66

Cámaras aislantes de material flexible y presión negativa

66

Dispositivos de pipeteo

68

Homogeneizadores, agitadores, mezcladores y desintegradores
ultrasónicos

69

Asas desechables

69

Microincineradores

69

Ropas y equipo de protección personal

70

PARTE IVTécnicas microbiológicas apropiadas

73

12.Técnicas de laboratorio

75

Manipulación segura de muestras en el laboratorio

75

Uso de pipetas y dispositivos de pipeteo

76

Técnicas para evitar la dispersión de material infeccioso

76

Uso de las cámaras de seguridad biológica

77

Técnicas para evitar la ingestión de material infeccioso y su contacto
con la piel y los ojos

77

Técnicas para evitar la inyección de material infeccioso

78

Separación de suero

78

Uso de las centrifugadoras

78

Uso de homogeneizadores, agitadores, mezcladores y desintegradores
ultrasónicos

79

ÍNDICE

•v•

Uso de trituradores de tejidos

80

Mantenimiento y uso de refrigeradores y congeladores

80

Técnicas para abrir ampollas que contengan material infeccioso liofilizado

80

Almacenamiento de ampollas que contengan material infeccioso

81

Precauciones normalizadas en relación con la sangre y otros líquidos
corporales, tejidos y excreciones

81

Precauciones con materiales que puedan contener priones

83

13.Planes de contingencia y procedimientos de emergencia

85

Plan de contingencia

85

Procedimientos de emergencia para laboratorios de microbiología

86

14.Desinfección y esterilización

89

Definiciones

89

Limpieza del material de laboratorio

90

Germicidas químicos

90

Descontaminación de espacios y superficies

96

Descontaminación de cámaras de seguridad biológica

97

Lavado y descontaminación de las manos

98

Desinfección y esterilización por calor

98

Incineración

101

Eliminación de desechos

101

15.Introducción al transporte de sustancias infecciosas

102

Reglamentación internacional en materia de transportes

102

El sistema básico de embalaje/envasado triple

103

Procedimiento de limpieza de derrames

103

PARTE VIntroducción a la biotecnología

107

16.Bioseguridad y tecnología del ADN recombinante

109

Consideraciones de bioseguridad en relación con los sistemas de
expresión biológica

110

Consideraciones de bioseguridad en relación con los vectores
de expresión

110

Vectores víricos para la transferencia de genes

110

Animales transgénicos y con genes inactivados (knock-out)

110

Plantas transgénicas

111

Evaluación de riesgos en relación con los organismos genéticamente
modificados

111

Otras consideraciones

112

MANUAL DE BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO

•vi•

PARTE VISeguridad química y eléctrica y protección contra incendios

115

17.Sustancias químicas peligrosas

117

Vías de exposición

117

Almacenamiento de sustancias químicas

117

Normas generales en relación con las incompatibilidades químicas

117

Efectos tóxicos de las sustancias químicas

117

Sustancias químicas explosivas

118

Derrame de sustancias químicas

118

Gases comprimidos y licuados

120

18.Otros peligros en el laboratorio

121

Peligro de incendio

121

Peligros eléctricos

122

Ruido

122

Radiaciones ionizantes

123

PARTE VIIOrganización y formación en materia de seguridad

127

19.El funcionario de bioseguridad y el comité de bioseguridad

129

Funcionario de bioseguridad

129

Comité de bioseguridad

130

20.Reglas de seguridad para el personal de apoyo

132

Mecánicos y personal de mantenimiento del edificio

132

Personal de limpieza

132

21.Programas de capacitación

133

PARTE VIIILista de comprobación de la seguridad

135

22Lista de comprobación de la seguridad

137

Locales del laboratorio

137

Locales de almacenamiento

138

Instalaciones de saneamiento y destinadas al personal

138

Calefacción y ventilación

138

Alumbrado

138

Servicios

139

Bioprotección en el laboratorio

139

Prevención de incendios

139

Almacenamiento de líquidos inflamables

140

Gases comprimidos y licuados

141

Peligros eléctricos

141

ÍNDICE

•vii•

Protección personal

141

Salud y seguridad del personal

142

Material de laboratorio

142

Material infeccioso

143

Sustancias químicas y radiactivas

143

PARTE IXReferencias, anexos e índice alfabético

145

Referencias

147

ANEXO 1Primeros auxilios

151

ANEXO 2Inmunización del personal

152

ANEXO 3Centros Colaboradores de la OMS en materia de bioseguridad

153

ANEXO 4Seguridad del material

154

ANEXO 5Sustancias químicas: peligros y precauciones

158

Índice alfabético

202

•viii•

Hace tiempo que la Organización Mundial de la Salud (OMS) reconoce que la seguri-

dad y,en particular,la seguridad biológica son importantes cuestiones de interés inter-

nacional.La OMS publicó la primera edición del Manual de bioseguridad en el

laboratorioen 1983.En ella se alentaba a los países a aceptar y aplicar conceptos básicos

en materia de seguridad biológica y a elaborar códigos nacionales de prácticas para la

manipulación sin riesgo de microorganismos patógenos en los laboratorios que se

encuentran dentro de sus fronteras nacionales.Desde 1983,muchos países han

seguido la orientación especializada que se ofrece en el manual para elaborar esos

códigos de prácticas.En 1993 se publicó una segunda edición del manual.

En esta tercera edición del manual,la OMS sigue proporcionando liderazgo

internacional en materia de bioseguridad al abordar los aspectos de la seguridad y la

protección biológica que se plantean en el nuevo milenio.A lo largo de toda la pu-

blicación se subraya la importancia de la responsabilidad personal.Se han incluido

nuevos capítulos que se ocupan de la evaluación de riesgos,el uso de las tecnologías

del ADN recombinante en condiciones de seguridad y el transporte de material infec-

cioso.Los recientes acontecimientos mundiales han puesto de manifiesto la existen-

cia de nuevas amenazas para la salud pública derivadas de la liberación o el uso

indebido deliberados de agentes y toxinas microbianos.Por consiguiente,en la pre-

sente edición del manual también se introduce el concepto de bioprotección,es decir,

la protección del material microbiológico contra el robo,la pérdida o la desviación

para evitar que esos agentes se puedan utilizar de forma indebida con el fin de

atentar contra la salud pública.Esta edición también contiene información sobre

seguridad tomada de Safety in health-care laboratories (1),que publicó la OMS

en 1997.

La tercera edición del Manual de bioseguridad en el laboratoriode la OMS será de

utilidad como referencia y orientación para los países que acepten el reto de elaborar

y establecer códigos nacionales de prácticas con miras a proteger esos bienes micro-

Prefacio

PREFACIO

•ix•

biológicos y al mismo tiempo garantizar su disponibilidad para fines clínicos,de inves-

tigación y epidemiológicos.

Dr.A.Asamoah-Baah

Subdirector General

Enfermedades Transmisibles

Organización Mundial de la Salud

Ginebra (Suiza)

•x•

La preparación de la presente edición del Manual de bioseguridad en el laboratorioha

sido posible gracias a las contribuciones de las siguientes personas,a las que se

reconoce con gratitud la aportación de sus conocimientos especializados:

Dr.W.Emmett Barkley.Instituto Médico Howard Hughes,Chevy Chase,MD

(EE.UU.).

Dr.Murray L.Cohen (jubilado).Centros para el Control y la Prevención de

Enfermedades,Atlanta,GA (EE.UU.).

Dra.Ingegerd Kallings.Instituto Sueco de Lucha contra las Enfermedades Infecciosas,

Estocolmo (Suecia).

Sra.Mary Ellen Kennedy.Consultora especializada en bioseguridad,Ashton,Ontario

(Canadá).

Sra.Margery Kennett (jubilada).Laboratorio de Referencia de Victoria para las

Enfermedades Infecciosas,North Melbourne (Australia).

Dr.Richard Knudsen.Oficina de Salud y Seguridad,Centros para el Control y la

Prevención de Enfermedades,Atlanta,GA (EE.UU.).

Dra.Nicoletta Previsani.Programa de Bioseguridad,Organización Mundial de la

Salud,Ginebra (Suiza).

Dr.Jonathan Richmond (jubilado).Oficina de Salud y Seguridad,Centros para el

Control y la Prevención de Enfermedades,Atlanta,GA (EE.UU.).

Dr.Syed A.Sattar.Facultad de Medicina,Universidad de Ottawa,Ottawa,Ontario

(Canadá).

Dra.Deborah E.Wilson,División de Salud y Seguridad Ocupacional,Institutos

Nacionales de la Salud,Washington D.C.(EE.UU.).

Dr.Riccardo Wittek,Instituto de Biología Animal,Universidad de Lausana,Lausana

(Suiza).

La OMS expresa asimismo su gratitud a las siguientes personas por su asistencia:

Sra.Maureen Best,Oficina de Seguridad en el Laboratorio,Health Canada,Ottawa

(Canadá).

Dr.Mike Catton,Laboratorio de Referencia de Victoria para las Enfermedades

Infecciosas,North Melbourne (Australia).

Agradecimientos

AGRADECIMIENTOS

•xi•

Dra.Shanna Nesby,Oficina de Salud y Seguridad,Centros para el Control y la

Prevención de Enfermedades,Atlanta,GA (EE.UU.).

Dr.Stefan Wagener,Centro de Ciencias de la Salud Humana y Animal del Canadá,

Winnipeg (Canadá).

Los redactores y revisores desean reconocer también las aportaciones originales de los

numerosos profesionales cuya labor quedó recogida en las ediciones primera y

segunda del Manual de bioseguridad en el laboratorioy en Safety in health-care labo-

ratories (1),publicada por la OMS en 1997.

•1•

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