CULTIVO DE ABCESOS Y SECRECIONES DE HERIDAS

I. MARCO TEÓRICO
Las bacterias infecciosas se reproducen rápidamente en el organismo y muchas excretan sustancias químicas llamadas toxinas las cuales pueden dañar los tejidos. Las infecciones de piel y tejidos blandos son, junto con las infecciones de las vías respiratorias, las infecciones más frecuentes en clínica humana

Tipos:  Agudas  Crónicas

Microbiología de las heridas
El tejido subcutáneo expuesto es un excelente medio de cultivo para la colonización y proliferación de los microorganismos, que dependen de las características de la lesión. Los microorganismos provienen del entorno ambiental, de la propia microbiotaflora de la piel y de la flora bacteriana comensal de mucosas.

Potencialmente patógenos: Estreptococos beta-hemolíticos, Staphylococcus. aureus, Enterococcus spp., Bacillus anthracis, Pseudomonas aeruginosa y otros bacilos gramnegativos como las Enterobacteriaceae, tanto en las heridas agudas como en las crónicas.

Son factores predisponentes de la infección la edad, la diabetes, la inmunosupresión, la obesidad, la malnutrición y las alteraciones circulatorias.

.INFECCIÓN DE LA HERIDA QUIRÚRGICA Infección que se produce en la herida de una incisión quirúrgica La infección posoperatoria de la herida quirúrgica es la mayor causa de morbilidad infecciosa en el paciente quirúrgico.

Se ha demostrado que cuando el sitio operatorio se encuentra contaminado con más de 105 microorganismos por gramo de tejido. . según el tipo de cirugía.Epidemiología Constituye la segunda causa de infección nosocomial y la desarrollan entre el 2-20% de los enfermos operados. el riesgo de infección de la herida quirúrgica se incrementa significativamente y la cantidad de gérmenes requeridos para producir infección es mucho menor cuando se encuentran materiales extraños presentes en el sitio operatorio.

En las heridas sucias infectadas es frecuente encontrar como colonizadores. . B. como la Pseudomona sp. coli. Klebsiella. Clostridium species y estreptococo anaerobio En los abscesos e infecciones intrahospitalarias la microflora del sitio operatorio es diferente. microorganismos como la E. fragilis. son gérmenes multirresistentes. Enterobacter sp y el Enterococo.

5) 110 187 173 Staphylococcus aureus 240 (16.8) 9 39 21 Otros 59 (4. BGNa no fermentadores 212 (14.Microorganismo Número de aislados (%) Cirugía limpia Cirugía limpiacontaminada Cirugía sucia Enterobacterias 470 (32.6) 63 70 79 197 (9.1) 59 26 33 Anaerobios 69 (4.0) 17 22 3 Total 1456 467 501 488 .4) 13 16 20 42 (3.0) 12 36 11 Levaduras Otros CGPbCGP 49 (3.1) 44 54 99 Staphylococcus epidermidis 118 (8.5) 140 51 49 Enterococcus spp.

Infecciones post-parto .

.Las infecciones que ocurren durante el puerperio son una causa relativamente frecuente de morbilidad. y raramente incluso de mortalidad.

Técnica .

Factores que predisponen a infecciones post parto y Obesidad. . y Nivel económico bajo. y Anemia. y Inmunosupresión. y Enfermedad crónica ( ejm diabetes mellitus). especialmente vaginosis bacteriana. y Infección vaginal.

. y Estas infecciones usualmente se extienden bastante más allá de la delgada capa endometrial limitando con el miometrio adyacente. cirugía laboriosa. y Pacientes con mayor riesgo de infección: aquellas que sufren de desnutricion. con formación de absceso pélvico. los tejidos blandos fibroareolares que se ubican dentro del parametrio. trabajo de parto prolongado. e incluso algunas veces más allá. fiebre intraparto.Complicaciones ENDOMETRITIS y Infeccion al utero y Causa mas frecuente de infeccion despues de una cesarea. obesas.

anemia . material de cirugia. obesidad. y eritema alrededor de la incisión se observa más frecuentemente al tercer o cuarto días después del parto. y Se debe obtener el cultivo del sitio de incision. duracion de cirugia. sensibilidad. malnutricion.INFECCION DE HERIDA y Es poco frecuente y Fiebre acompañada de dolor. luego del cual se inicia con frecuencia el tratamiento antibiótico de amplio espectro. uso de corticoides. y Absceso de la herida operatoria el drenaje del material purulento y el aseo con antisépticos. y Fasctores que aumentan el riesgo: DM.

823 cesáreas .INCIDENCIA 13.

Organismos comúnmente asociados con infecciones pélvicas Staphylococcus Escherichia coli Streptococcus Klebsiella Clostridium Proteus .

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Materiales: y Hisopo de algodón o sintético estéril y Lámina porta objetos .

extractos de Levadura y Carne.Vitaminas. etc) y .Materiales: y Tubo con tapa de rosca estéril conteniendo medio de transporte Medios de cultivo: Caldo Thioglicolato (CTh) caldo de enriquecimiento más utilizado en Microbiología (Caseina.

Medio Hipertónico (MH) y Agar Sabouraud (SAB) .Materiales y Agar Sangre (AS). Agar Mac Conkey (MC).

Agar Sangre usada para ver la capacidad hemolítica de los microorganismos patógenos .

transparentes Incoloras. lactosa en muestras clínicas. incoloras. opacas .Agar Mac Conkey Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos de fácil desarrollo. aerobios y anaerobios facultativos. Los organismos no fermentadores de lactosa producen colonias incoloras Microorganismos Escherichia coli Klebsiella pneumoniae Salmonella typhimurium Shigella flexneri Proteus mirabilis Enterococcus faecalis Colonias Rojas con halo turbio Rosadas mucosas Incoloras. de agua y alimentos. transparentes Diminutas. Permite diferenciar bacterias que utilizan o no. transparentes Incoloras.

Se usa para identificar la tolerancia salina de las bacterias .5% de cloruro de sodio.Medio Hipertónico Es un medio de cultivo conteniendo 6.

También es útil para el cultivo de levaduras. identificación y conservación de hongos patógenos y saprófitos.Agar Sabouraud Medio utilizado para el aislamiento. Microorganismos Saccharomyces cerevisiae Aspergillus niger Candida albicans ATCC 10231 Crecimiento Bueno Bueno Bueno .

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.Obtención de la muestra y La muestra fue tomada de una paciente mujer de 37 años de edad la cual fue sometida a un parto por cesárea el 25 de octubre del presente año. estuvo hospitalizada durante 5 días debido a la cesárea y por propias complicaciones producidas en el parto.

y Se tuvo en cuenta además. que la paciente no se encontraba en tratamiento con antibiótico y que la única recomendación dada por su doctor para el tratamiento de la herida fue el de higiene diaria con agua y jabón. y . todavía presentaba los puntos realizados tras la operación.Obtención de la muestra La muestra de la herida que fue obtenida dos días después de su último día de hospitalización.

y El hisopo con la muestra se colocó dentro del tubo con medio de transporte y se conservó a 5°C durante 1 día. y . el cual se humedeció con la secreción y teniendo el cuidado necesario para no tocar superficie de piel evitando así la contaminación con la microbiotaflora normal. para el cual se empleó un hisopo de algodón esterilizado.Obtención de la muestra Para poder obtener una muestra de buena calidad se le pidió a la paciente que no realizara la limpieza de la herida 24 horas previas al examen realizado.

al cual luego se le aplicó la técnica de coloración Gram .Coloración Gram y Con el hisopo se hizo un pequeño frotis en el portaobjetos.

. y luego con el asa de siembra se distribuyó la muestra por agotamiento. Luego se incubaron las placas a 37°C por 48 horas.Siembra y Con el hisopo se hizo un pequeño frotis en un ángulo de cada medio de cultivo.

.Siembra y Al tubo con el medio de transporte se le añadió +/.3 ml de caldo thioglicolato y también se incubó a 37°C.

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oEn el medio de cultivo. disminuye el pH alrededor de la colonia. y la mezcla de sales biliares y el cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora Gram positiva. Esto produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro). las peptonas. la lactosa es el hidrato de carbono fermentable. la absorción en las colonias. y la precipitación de las sales biliares. aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano. Los microorganismos no fermentadores de lactosa producen colonias incoloras. . o Por fermentación de la lactosa.

 Indica: Fermenta Lactosa o no Resultado: Positivo Posibles bacterias: Escherichia coli Klebsiella .

oLos estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio. Los estafilococos coagulasa negativos. posteriormente. presentan colonias rodeadas de una zona roja o púrpura.oSe trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentración salina. . la prueba de la coagulasa. Las colonias sospechosas. las colonias aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante. se repicarán en un medio sin exceso de cloruro de sodio para efectuarles.

oLas bacterias que crecen en un medio con alta concentración de sal y fermentan el manitol. el extracto de carne y la pluripeptona. producen ácidos. .oEn el medio de cultivo. el cloruro de sodio (que se encuentra en alta concentración) es el agente selectivo que inhibe el desarrollo de la flora acompañante. vitaminas y minerales. oLos estafilococos crecen en altas concentraciones de sal. y pueden o no fermentar el manitol. con lo que se modifica el pH del medio y vira el indicador de pH del color rojo al amarillo. el manitol es el hidrato de carbono fermentable. y el rojo fenol es el indicador de pH. nitrógeno. constituyen la fuente de carbono.

 Indica: Metaboliza manitol o no Desarrolla en medio salado o no Resultado: Positivo Posible bacteria: Staphylococcus aureus .

o Observando los halos hemolíticos alrededor de las colonias se determina el tipo de hemólisis que posee: alfa: halos verdosos beta: halos incoloros gamma: inexistencia de halos . para cultivos en una placa de Agar. también puede usarse sangre humana. o El Agar sangre aporta muchos factores de enriquecimiento. oSe usa también para ver la capacidad hemolítica de los microorganismos patógenos (que es un factor de virulencia).oEs una combinación de un Agar base (Agar nutritivo) con el agregado de 5 % de sangre ovina.

 Indica: Capacidad hemolítica de microorganismos patógenos Resultado: Gamma hemolíticos ( no hemolíticos) Posibles bacterias: Streptococcus fecales .

oEl pH acido (5.6) del medio inhibe muchas especies de bacterias. . oLa adición de cloranfenicol hace el medio más selectivo. en particular de levaduras y dermatofitos.oMedio selectivo para el cultivo de hongos patógenos y no patógenos. o Diagnóstico características tales como estructuras de esporas y la pigmentación están bien desarrollados en este medio.

40 g / L de dextrosa 10 g / L de peptona 20 g/L agar pH 5.6 .6 pH 5.

 Indica: Presencia de hongos o no Resultado: Positivo Posibles bacterias: Candida albicans .