Presenta : Aridaith Parra Reyes

• REACCIONES CON MÚLTIPLES SUSTRATOS

• REACCIONES COMPLEJAS

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 REACCIONES CON MÚLTIPLES SUSTRATOS
Fibrinógeno
¿Cuándo?
FpA (Aα 1-16)
Cuando una enzima une dos o más
sustratos y libera múltiples productos Trombina
FpB
(Bβ 1-14)

Fibrina

❖ Unión aleatoria de los sustratos

Se reconocen varias clases principales de
mecanismos para las reacciones con ❖ Unión ordenada de los sustratos
múltiples sustratos.
❖ Mecanismo “ping-pong”

Mathews et al., (2002) 2

 fructosa-6-fosfato

❖Unión aleatoria de los sustratos

gliceraldehído-3-
fosfato

En la unión aleatoria de los sustratos, cualquiera de

los sustratos puede ser el primero en unirse a la
enzima, aunque en muchos casos se favorecerá la sedoheptulosa-7-fosfato.
transcetolasa
ribosa-5-fosfato
unión inicial de uno de los sustratos, y su unión eritrosa-4-fosfato
puede promover luego la unión del otro.

xilulosa-5-fosfato

transcetolasa transcetolasa

ribulosa-5-fosfato

gliceraldehído-3-
xilulosa-5-fosfato
fosfato

fructosa-6-fosfato

Mathews et al., (2002) 3

❖Unión ordenada de los sustratos

En algunos casos, un sustrato debe unirse

antes de que un segundo sustrato pueda
unirse significativamente.

Mathews et al., (2002) 4


1. El sustrato polipeptídico se une de
forma no covalente con las cadenas
laterales del bolsillo hidrófobo.
4. Una molécula de agua se une a
la enzima en lugar del polipéptido
separado.
Mathews et al., (2002)
❖Mecanismo “ping-pong”
Se une un sustrato, se libera un producto,
entra un segundo sustrato y se libera un
segundo producto.
3. Se transfiere H+ al fragmento C-terminal, que
2. Se transfiere H+ desde Ser a His. El
se libera por la ruptura del enlace C—N. El
sustrato forma un estado de transición
péptido N-terminal está unido a través de un
tetraédrico con la enzima.
enlace acilo a la serina. E* es una forma modificada de la enzima que
lleva un fragmento de S1
5. La molécula de agua transfiere su 6. Se libera el segundo fragmento
protón a His 57 y su —OH al fragmento de peptídico: se rompe el enlace acilo, el
sustrato restante. De nuevo se forma un protón se transfiere de nuevo desde His a
estado de transición tetraédrico. Ser, y la enzima vuelve a su estado inicial.
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 REACCIONES COMPLEJAS
¿Cómo analizamos realmente el mecanismo de una reacción
compleja catalizada por una enzima?

¿Como determinamos las constantes de velocidad para los distintos pasos de la reacción?

• La velocidad del estado estacionario para esta reacción • La cinética de Michaelis-Menten

Mathews et al., (2002) 6

 Pre-estado estacionario

cinética de la hidrólisis del p-nitrofenilacetato catalizada por

la quimotripsina.

La producción del primer producto de la reacción (p-nitrofenol) se

sigue espectrofotométricamente tras la mezcla de la enzima y el
sustrato. El estallido inicial de formación de producto cesa cuando
la enzima está casi toda unida en el intermediario acilo.) que es el
estallido inicial de producción del primer producto (A). Su
explicación es la siguiente:

k3 <k2
La disociación del intermediario acilo es el paso limitante de la velocidad.

Mathews et al., (2002) 7

 Flujo detenido

Mathews et al., (2002) 8

 Referencias

Mathews, C. K. , Van Holde, K. E. , Ahern, k. G. (2002). Bioquímica. Madrid, España: Pearson educación.

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