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PRINCIPIOS DE LA

MICROBIOLOGIA
Dra. Mabel Pozo
Médico Veterinario
MICROBIOLOGIA
 La Microbiología es la ciencia encargada del estudio y análisis de
los microorganismos o seres vivos pequeños no visibles al ojo humano
también conocidos como microbios.
 Se dedica a estudiar los organismos que son sólo visibles a través
del microscopio : organismos procariotas y eucariotas simples.

 MICRO organismos microscópicos


 LOGOS estudio

• La microbiología comprende el estudio de 4 grupos principales


 BACTERIAS
 HONGOS Y LEVADURAS
 VIRUS
 PARÁSITOS
Ramas de la Microbiología
• Microbiología General : estudio de la estructura, composición, metabolismo,
genética, etc. de los microorganismos
Ramas de la Microbiología
• Microbiología Médica: Estudia los microorganismos que causan
enfermedades en los seres humanos, su transmisión, la patogénesis y su
tratamiento. Se relaciona estrechamente con la epidemiología, la farmacología
y la salud pública.
Ramas de la Microbiología
• Microbiología ambiental : Estudio de la funcionalidad y diversidad de
microorganismos en sus entornos naturales
Ramas de la Microbiología
• Microbiología Industrial : Estudia la explotación de los microorganismos
para su uso en procesos industriales ( minería, etc. ) Ej.: fermentación de
alcoholes y lácteos
Ramas de la Microbiología
• Microbiología Alimentaria : Estudio de los microorganismos que
contaminan los alimentos y que son responsables de enfermedades de
transmisión alimentarias (ETAS)
Ramas de la Microbiología
• Microbiología Agrícola: Estudio de los microorganismos, (especialmente
hongos y bacterias) que se encuentran en los suelos destinados a cultivo
Ramas de la Microbiología
• Microbiología Veterinaria : Estudio de los microorganismos que causan
enfermedades en los animales, principalmente en los domésticos y en los de
interés económico o de producción. (reses de abasto, aves de corral, cerdos
,conejos, ovejas cabras etc.)
CLASIFICACION SERES VIVOS
• Siglo XVII
– A mediados, Van Leeuwenhoek construye el primer microscopio
– Louis Pasteur y Robert Koch estudian y clasifican organismos
microscópicos y los relacionas a ciertas enfermedades

• Siglo XIX
– A mediados, científicos hablaron de 2 reinos; Animal y Vegetal
– En el 1866 el científico Ernest Haeckel descubre que existe un tercer
grupo que reúne las características de ambos grupos y los denomino
Protistas

• Siglo XX
– 1969 Whitaker gracias a la evolución del microscopio pudo conocer mas
características especificas de los microorganismos y entonces se definen 5
reinos
CLASIFICACION SERES VIVOS
CLASIFICACION SERES VIVOS
• Actualmente se han reclasificados los MO en 5
Reinos diferentes:

 REINO MONERA : Organismos Procariontes

 REINO PROTISTA: Organismos Eucariontes


Unicelulares

 REINO FUNGI: Hongos Uni o Pluricelulares

 REINO PLANTAE: Reino Vegetal (hongos no)

 REINO ANIMALIA: Reino animal


CLASIFICACION
 CELULAS EUCARIOTICAS

 Animales, Vegetales, Organismos unicelulares ( Algas, Hongos,


Protozoos )
• Núcleo rodeado por membrana nuclear  núcleo verdadero
• Presentan Nucléolo
• Tienen más de 1 cromosoma
• División por mitosis
• Organelos citoplasmáticos ( Mitocondrias, Retículo Endoplásmico,
Aparato de Golgi, etc )
• Ribosomas de tamaño 80S ( unidades Svedberg  coeficiente de
sedimentación ) ( con excepción de ribosomas de mitocondrias y
cloroplastos que son 70S )
• Estructura compleja
CLASIFICACION
 CELULAS PROCARIOTICAS

 Bacterias
• Organismos unicelulares indiferenciados, estructura más simple
• No tienen un núcleo como tal  sino un área nuclear (nucleoide)
• No tienen membrana nuclear
• No tienen organelos citoplasmáticos ( Mitocondrias, Retículo
endoplásmico, Aparato de Golgi, etc. )
• Tienen Ribosomas citoplasmáticos 70S
• No se dividen por mitosis
• Tienen 1 solo cromosoma
 Presentan estructuras propias: cápsula, pared celular, esporas, etc.
Bacteria: célula procariota
BACTERIOLOGÍA
BACTERIOLOGÍA

 BACTERION  diminutivo de bastón

 LOGOS  estudio
BACTERIAS

• Organismos unicelulares
• Células procariotas
• Tamaño microscópico
• Diámetro <5 m (1m=10-3 mm)
• Sin núcleo verdadero
• Sin membrana nuclear
• Poseen MUREINA (glicopéptido de la pared celular)
• Reproducción asexuada
MORFOLOGIA BACTERIANA
• Existen 4 formas básicas de las bacterias:

1. COCOS o COCACEAS
2. BACILOS
3. ESPIRILOS
4. COCOBACILOS
COCOS O COCACEAS

• Son bacterias con forma esférica u ovalada


• Se encuentran en distintas disposiciones dependiendo de sus planos de
división:
– aisladas
– unidas de a 2 células DIPLOCOCCUS
– unidades de a 8 células SARCINA
– cadenas cortas o largas STREPTOCOCCUS
– unidas en forma de racimo STAPHYLOCOCCUS

• Tamaño: 0.5-1.5 µm diámetro


Cocaceas: Microscopía Electrónica
Streptococcus: M. electrónica
Streptococcus
Staphylococcus M. electrónica
Staphylococcus: Tinción Gram
BACILOS
• Son bacterias con forma cilíndrica o de bastón alargado
• Pueden tener bordes redondeados, rectos o con un extremo más fino
que el otro

 DISPOSICION
• en pares  DIPLOBACILOS
• en cadena  STREPTOBACILOS

 TAMAÑO
• pequeño ( 0.2 x 0.5 µm )
• medianos ( 0.5 x 1.3 µm )
• grandes (1-1.3 x 3-8 µm )
Bacilos: M. Electrónica
Bacilos: Tinción Gram
ESPIRILOS
• Corresponden a bacilos con forma curvada o en espiral
• Forma de coma o de “S” : Vibrio sp., Campylobacter sp.
• Forma de espiral: Leptospira sp., Treponema sp.

 TAMAÑO
• Diámetro 0.1 µm Ej. Leptospira sp
• Largo: 3-50 µm Ej. Vibrio sp.
Espirilos en forma de coma o S
Espirilos en forma helicoidal
Espirilos en forma helicoidal
Espirilos en forma helicoidal
COCOBACILOS
• Son bacterias con una forma intermedia entre cocos y bacilos
• Son cocos mas alargados que lo normal o bien bacilos mas redondeados

Cocobacilos: M. Electrónica
COMPOSICION QUIMICA DE LAS
BACTERIAS
Es semejante a la composición de otras células vivas

• AGUA  75-85 %

• MASA SECA  15 – 25%

De la masa seca (MS) el:


• 20-50 % Carbono
• 20% Oxigeno
• 10-12 % Nitrógeno
• 8% Hidrógeno
COMPOSICION QUIMICA DE LAS
BACTERIAS
 CENIZAS  1.5 a 15 % de MS
• Fósforo es el principal : 1 – 45 %
• Na, S, K, Fe, Mn, Ca, Mg, Cl es menor proporción
• Sólo vestigios de Zn, Cu, Al, Mb

 PROTEINAS  50 - 55 % de MS
• Tiene los mismos aminoácidos que las células eucarióticas

 CARBOHIDRATOS  2 - 24 % MS, en forma de:


• Almidón
• Glucógeno
• Polisacáridos libres o asociados a proteínas y/o lípidos
• Son importantes desde el punto de vista inmunológico  ya que
algunos son antígenos
COMPOSICION QUIMICA DE LAS
BACTERIAS
 LIPIDOS  1 - 40 % MS
• Libres o asociados a Proteínas o Carbohidratos
• Se encuentran como Ácidos Grasos Libres, Fosfolípidos,
Grasas neutras y Ceras
• En algunas bacterias los lípidos se almacenan como Gránulos
de poli  hidroxibutirato

 ACIDO NUCLEICO  DNA 3% MS, RNA 10-20%


• El porcentaje varía mucho según las especies

• Pared Celular : 10-20% e MS


ESTRUCTURA BACTERIANA
 ELEMENTOS OBLIGADOS

• Son elementos que SIEMPRE están presentes en la bacterias

 Pared Celular
 Membrana celular ( con Mesosomas )
 Citoplasma ( con Ribosomas )
 Sistema Nuclear ( Nucleoide, sin membrana nuclear )
ESTRUCTURA BACTERIANA
 ELEMENTOS FACULTATIVOS

• Son elementos que pueden estar PRESENTES O AUSENTES,


dependiendo del tipo de bacteria

 Cápsula – Glucocalix
 Flagelos
 Pilis o fimbrias
 Esporas
Elementos Obligados
1) PARED CELULAR
• Debido a la alta concentración de solutos disueltos
al interior de la bacteria, se desarrolla una gran
turgencia por la presión
• Para resistir esta presión elevada las bacterias
presentan una Pared Celular:
- Protege a la bacteria del shock osmótico
- Le da la forma a la bacteria (cocáceas,
espirilo, etc.)
- Le confiere rigidez a la bacteria

• TODAS las bacterias tienen Pared Celular,


que es una de las características que las
distinguen a los procariotas de los eucariotas
• Existen 2 excepciones:
 Los Mycoplasmas
 Las bacterias de formas L (Lister) :bacterias
que han perdido la PC bajo determinadas
condiciones ambientes, aún cuando luego la
pueden recuperar
Elementos Obligados
• La PC no se observa en una preparación
fresca, sino que mediante una tinción
especial  TINCION DE GRAM

• Según esta tinción las bacterias de


dividen en 2 grupos
 Bacterias GRAM POSITIVAS  se
tiñen de color violeta
 Bacterias GRAM NEGATIVAS  se
tiñen de color rojo

• La diferencia entre ellas esta dada por


una composición química diferente de la
PC  existe por tanto una distinta
afinidad por los colorantes
• La PC de las bacterias GRAM
NEGATIVAS es una estructura
compleja de múltiples capas
• La PC de las bacterias GRAM
POSITIVAS es mucho mas simple y
mas gruesa
TINCION GRAM
Elementos Obligados
 FUNCION DE LA PARED CELULAR:

1. Protege a la bacteria del shock osmótico


2. Confiere rigidez a la bacteria
3. Confiere la forma a la bacteria
4. Confiere el carácter Tóxico
5. Confiere el carácter Antigénico
6. Actúa como barrera semipermeable (por las Porinas)
Elementos Obligados
2) MEMBRANA
CITOPLASMATICA o
CELULAR (MC)

• Es una estructura delgada que rodea la


célula por completo
• Es una barrera que separa el interior de la
célula ( citoplasma ) del medio externo
• Similar a la MC eucariótica  bicapa
fosfolipídica y proteínas
• Composición:
 LIPIDOS  es el principal constituyente, mantienen
la integridad estructural de la MC.
 PROTEINAS  responsable de las funciones
especializadas de la MC
 HIDRATOS DE CARBONO
Elementos Obligados
 FUNCIONES DE LA MEMBRANA CITOPLASMÁTICA
1. Permeabilidad selectiva y transporte de soluto

2. Transporte de electrones y fosforilación oxidativa enzimas oxidativas se


encuentran en la MC, semejante a la membrana interna de mitocondrias
de células eucarióticas

3. Excreción de enzimas hidrolíticas hacia el exterior y degradación de las


macromoléculas

4. Biosíntesis  enzimas para la síntesis de fosfolípidos y enzimas que


participan en la síntesis de la pared celular

5. Actúa como motor del movimiento de los flagelos  posee sustancias


quimiotácticas que le permiten avanzar hacia las sustancias que le
interesan
Elementos Obligados
3) CITOPLASMA BACTERIANO

 RIBOSOMAS
• Los ribosomas son complejos de RNA y
proteínas que se encuentran en el
citoplasma
• En ocurre en ellos la síntesis de proteínas

 GRANULOS E INCLUSIONES
• Su naturaleza difiere según la bacteria
• Su presencia depende de la etapa funcional
de la bacteria
• Corresponden a reservas de nutrientes Se
acumulan cuando existe escasez de algún
nutriente, como por ejemplo N o C
Elementos Obligados
4) REGION NUCLEAR O
NUCLEOIDE

• La región nuclear de las bacterias es


primitiva en comparación con el
núcleo de las células eucarióticas
• Las bacterias no tienen un núcleo
verdadero
• Tiene una región nuclear donde se
encuentra el DNA, también llamado
nucleoide
• No tienen Nucléolos
• No tiene Membrana Nuclear
Elementos Obligados
 PLASMIDIO
• Algunas bacterias tienen además DNA
extracromosómico, denominado
PLASMIDIO
• Corresponde a DNA de doble hebra, circular.
• Tamaño 20 veces inferior con respecto al
tamaño del cromosoma bacteriano.
• Esta relacionado con la Resistencia a los
antibióticos.
• Codifican la producción de toxinas.
• Se puede transmitir de una bacteria a otra.
Elementos Facultativos
1) CAPSULA

 Es una sustancia superficial que


presentan algunas bacterias, de
contextura amorfa, polimérica o
gelatinosa, que se localiza en la
parte exterior de la pared celular
• La cápsula puede ser independiente
para una sola bacteria o común para
varias
Elementos Facultativos
 FUNCION DE LA CAPSULA

1. Contribuye a la invasividad de una bacteria patógena  ya que la


protege de la fagocitosis
2. Protección contra células fagocitarias ( antifagocítica )
3. Permite la adherencia de las bacterias a las mucosas (adhesinas)
4. Enmascara u oculta los antígenos somáticos O de la pared celular
5. Actúa como antígeno
6. Protección contra la desecación
7. Protección contra agentes antibacterianos ( metales pesados,
detergentes, anticuerpos, etc. )
Elementos Facultativos
• La Cápsula es difícil de observar en una preparación fresca. Se debe
teñir con técnicas especiales:
 TINCIÓN NEGATIVA : la cápsula se ve blanca sobre un fondo
oscuro ( es decir no se tiñe ). Se utiliza Tinta China, Safranina,
Nigrosina, etc.
 TINCIÓN DE OLT : la cápsula se tiñe de color naranja (Safranina) y
el cuerpo bacteriano de color rojo (Fucsina)  Bacillus anthracis
 Cuando la cápsula además contiene glucoproteínas.se denomina
GLUCOCALIX
Cápsula bacteriana
Cápsula: Tinta china
Cápsula bacteriana
Elementos Facultativos
2) FLAGELOS ( del latin flagellus: “batir”)

 Son apéndices filamentoso de estructura


helicoidal, largos y delgados, libres en un
extremo y unidos a la bacteria por el otro
• Son estructuras de locomoción  permiten que la
bacteria se desplace
• Son muy delgados (10 - 20 nm diámetro )  no
se observan al microscopio óptico  requiere de
técnicas de tinción especiales que aumentan su
grosor para ser visualizados

• Los flagelos están compuestos principalmente


por una proteína llamada FLAGELINA
Elementos Facultativos
• La disposición de los flagelos en la superficie de la bacteria tiene
importancia taxonómica.

• ATRICAS : sin flagelos


• MONOTRICAS : 1 solo flagelo polar
• LOFOTRICAS : varios flagelos en 1 polo ( lofos = penacho)
• ANFITRICAS : 1 o varios flagelos en ambos polos
• PERITRICAS : varios flagelos alrededor de la bacteria

 Bacterias G + móviles  tienen sólo flagelos Perítricos


 Bacterias G - móviles  tienen flagelos Polares o Perítricos
Tipos de Flagelos
• MONOTRICAS

• LOFOTRICAS

• ANFITRICAS

• PERITRICAS
Elementos Facultativos
3) PILIS - FIMBRIA O PELOS

 Estructuras delgadas, rectas y rígidas, semejantes a pelos, que


atraviesan la pared celular y se unen a la membrana citoplasmática.

• Son semejantes a los flagelos, aunque no participan en la motilidad


• Son mucho más cortos y más abundantes que los flagelos
• Sólo visibles al microscopio electrónico.
• Están formados por una proteína  denominada PILINA
• Algunos tienen además tienen otra proteína  ADHESINA
Elementos Facultativos
• Existen 2 tipos diferentes de Pilis:

 PILIS SEXUALES
• Son más largos
• Presentes en menor cantidad (entre 1- 4 por
bacteria )

• Presentes en algunas bacterias: función de


traspaso de material genético
• Este proceso se denomina CONJUGACION
Elementos Facultativos
 PILIS COMUNES
• Son más abundantes ( 100-200 por bacteria )
• Rodean completamente a la bacteria
• Generalmente presentes en bacterias Gram
negativas, especialmente
Enterobacterias
• Participan en la adherencia a la células
epiteliales (Ej.: Pilis K88 y K99 de E.coli ).
• Son por lo tanto un factor de virulencia
bacteriano ( Ejemplo: Pilis de
E. coli enteropatógena en mucosa del
intestino delgado )
• Son antigénicos  inducen la formación
de Anticuerpos que interfieren
con la adherencia a los epitelios celulares (
Vacunas en base a pilis )
• Los pilis pueden ser codificados por genes
cromosomales y plasmidiales
Pilis bacterianos
Elementos Facultativos
4) ESPORA o ENDOSPORA

 Son elementos de resistencia, provistos de una gruesa pared, producida


por ciertos géneros bacterianos
• Se llama endospora ya que se forman dentro de la célula
• Se observan al microscopio óptico como cuerpos refractiles
• Son impermeables a la mayoría de los colorantes  se observan como
regiones no teñidas dentro de la bacteria teñida con Gram
• Para teñir las esporas se debe utilizar tinciones especiales
• Tienen una composición química semejante a la célula vegetativa  pero
NO contienen agua libre ( son deshidratadas )
• La espora es capaz de permanecer en latencia o dormancia durante mucho
tiempo ( meses, años ) protegiendo a la bacteria de las condiciones adversas
• En Medicina Veterinaria existen 2 géneros bacterianos que producen esporas
 Bacillus y Clostridium
Bacillus anthracis
Clostridium tetani
Elementos Facultativos
• La estructura de la espora es diferente y más
compleja que una bacteria vegetativa. Posee
varias capas:

1. EXOSPORIUM  es la capa más externa,


delgada y delicada, formada por
Lipoproteínas y Glúcidos

2. CAPA CORTICAL O CUBIERTA 


compuesta por una proteína semejante a la
Queratina

3) CORTEZA  la capa más gruesa,


constituida por Peptidoglicano

4) NUCLEO O CORAZON  comprende la


Pared Celular, Membrana Citoplasmática, y
Región Nuclear o Nucleoide
• En el núcleo existe una molécula
característica de la espora y que no existe en
las bacteria vegetativa  ACIDO
DIPICOLÏNICO (DAP)
• El DAP está asociado a iones de Ca 
responsable de la gran resistencia al calor
que posee la espora
Elementos Facultativos
• Las esporas son muy resistentes a :
 DESECACION  por la presencia de la proteína Queratina-like
 RADIACION UV e IONOZANTES  dada por la gran cantidad
 de enlaces di-Sulfuros de la Cistina presentes en su envoltura
 PRESION OSMOTICA ELEVADA
 SUSTANCIAS QUIMICAS  Ácidos, Desinfectantes
 ANTIBIOTICOS  por la presencia de la proteína Queratina-like
 ALTA TEMPERATURA
• la termoresistencia de la espora se debe en parte e su estado deshidratado
y también a la presencia de DIPICOLINATO de CALCIO
• de alguna forma desconocida estas propiedades estabilizan las enzimas
de la espora y hacen que las proteínas y Ácidos Nucleicos sean mas
resistentes a la denaturación por acción de la temperatura
Elementos Facultativos
 ESPORULACIÓN: conversión de célula vegetativa  en Espora

• La esporulación ocurre cuando las condiciones nutricionales son adversas,


principalmente el agotamiento de las fuentes de Carbono y Nitrógeno
• Se producen cambios morfológicos, fisiológicos, genéticos y bioquímicos
• Se producen nuevas estructuras, enzimas y metabolitos y desaparecen otros,
es un proceso de diferenciación  se expresan genes que estaban reprimidos
y otros genes asociados a funciones vegetativas se inactivan
• Por aparecer envolturas diferentes a las células vegetativas  aparecen
antígenos diferentes y nuevos.

 Las bacterias patógenas del género Bacillus forman esporas en


condiciones aeróbicas y las del género Clostridium en anaerobiosis
Elementos Facultativos
PROCESO DE ESPORULACIÓN:

1) Disposición del cromosoma


2) Duplicación del cromosona ( Replicación )
3) Formación de un septum a partir de una invaginación de la
membrana citoplamática  produciendo una estructura
membranosa doble que envuelve el material genético y parte del
citoplasma  aparece la PRE-ESPORA
4) Formación de capas alrededor de la pre-espora  síntesis de
glucopéptidos y proteínas semejante a queratina  formación
de las envolturas de la espora
5) Liberación de la espora, por desintegración de la envoltura de la
célula vegetativa  con pérdida de agua y Calcio
Esporulación

  

  
Elementos Facultativos
• Las esporas pueden permanecer mucho tiempo viable (hasta 300 años)

• La formación de las esporas tarda entre 4 – 8 horas aproximadamente

La espora mantiene el poder patógeno  a pesar de ser diferente a la


célula vegetativa
Elementos Facultativos
 GERMINACIÓN: conversión de espora  Célula Vegetativa

• Ocurre cuando la espora encuentra condiciones favorables  cesa la


latencia o dormancia  sobre crecimiento  da lugar a una nueva
célula vegetativa.
1) ACTIVACION
• La germinación se activa con la eliminación de las capas más
superficiales de la espora
2) INICIACION
• Se activa y liberan las capas restantes de la espora  se capta agua,
se libera el Dipicolinato de calcio y otros constituyentes de la espora
son degradadas por enzimas hidrolíticas
3) EXTRUSION
• Biosínteis activa, división celular  célula vegetativa

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