MÓDULO: FISIOPATOLOGÍA GENERAL.

PRÁCTICA: OBSERVACIÓN DE MICROORGANISMOS EN AGUA

ESTANCADA MEDIANTE PREPARACIÓN EN FRESCO SIMPLE O
PREPARACIÓN HÚMEDA

1. Introducción

Esta técnica es la más sencilla y rápida dentro de la observación de

microorganismos. Permite visualizar a los microorganismos vivos y siendo
posible detectar su morfología “in vivo”, así como, su movilidad.

El objetivo es la visualización microscópica, sin teñir , de microorganismos 1

eucariotas pluricelulares de agua dulce. Uno de los objetivos es verlos con
vida, y poder clasificarlos según su morfología .

2. Material
- Portaobjetos
- Cubreobjetos
- Pipeta Pasteur
- Papel de filtro
- Vaselina
- Pincel
- Muestras de agua estancada
- Microscopio óptico
- Centrífuga

3. Procedimiento

Las muestras se observarán al microscopio óptico de dos formas:

a. Preparación húmeda sin concentración de microorganismos.
b. Preparación húmeda con concentración de microorganismos mediante
centrifugación

Técnica de preparación húmeda para observación de microorganismos:

1. Tomar un portaobjetos y un cubreobjetos limpios.

2. Tomar una gota con una pipeta Pasteur y colocarla en el centro del
portaobjetos.
3. Cubrir la muestra con un cubreobjetos formando inicialmente un ángulo de
45º para evitar la formación de burbujas.
4. Sellar los borde del cubreobjetos con vaselina para evitar corrientes en la
preparación que pudieran mover accidentalmente los microorganismos y ser
confundida con movilidad propia.
5. Observar al microscopio utilizando el objetivo de 40x y trata de determinar
las especies que observes utilizando el anexo que se adjunta.

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Técnica de preparación húmeda para observación de microorganismos

tras concentración mediante centrifugación:

1. Añadir en un tubo de centrífuga 5 mL de la muestra líquida.

2. Centrifugar a 2300rpm durante 3 minutos
3. Tomar un portaobjeto y un cubreobjetos limpios.
4. Tomar una gota con una pipeta Pasteur del fondo del tubo y colocarla en el
centro del portaobjetos.
5. Cubrir la muestra con un cubreobjetos formando inicialmente un ángulo de 2
45º para evitar la formación de burbujas.
6. Sellar los borde del cubreobjetos con vaselina para evitar corrientes en la
preparación que pudieran mover accidentalmente los microorganismos y ser
confundida con movilidad propia.
7. Observar al microscopio utilizando el objetivo de 40x y trata de determinar
las especies que observes utilizando el anexo que se adjunta.

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4. Modus operandi :

- Para la preparación sin centrifugar:

- Marcamos un cubreobjeto con el tipo de agua a observas.
- Con una pipeta Pasteur cogemos una gota de agua y la colocamos en el
centro del porta .
- Cubrimos con un cubre objetos, anteriormente cubriendo los bordes de este
con vaselina para evitar desplazamientos .
- Y ya podemos observar al microscopio

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Para la preparación en centrifuga

- Añadimos en un tubo con una pipeta 5ml de agua
- Centrifugamos a 2300rpm durante 3 minutos
- Una vez centrifugado vertemos el sobrenadante y cogemos una gota del
sedimento.
- Marcamos un porta objeto con la muestra a observar
- Con una pipeta Pasteur cogemos una gota de agua y la colocamos en el
centro del porta .
- Cubrimos con un cubre objetos, anteriormente cubriendo los bordes de este
con vaselina para evitar desplazamientos .
- Y ya podemos observar al microscopio

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5. Resultados y conclusiones:

Esta practica fue muy divertida. Logramos ver diferentes tipos de

microorganismo. Me llamo mucho la atención como se movían e incluso a
algunos fuimos capaz de verles como se le movía el aparato digestivo. La
verdad que fue una práctica muy entretenida.

6. Fotografía:

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