“Año de la Universalización de la Salud”

TECNICAS DE COLORACIÓN
OBSERVACIÓN DE CÉLULAS
PROCARIOTAS

DOCENTE: Flores Quispe Roció Esperanza

CURSO: Biología - practica
GRUPO: rfloresq-3
 ROMANI PALOMINO JIRO SAMIR 2019222744
 ROMERO PUMA DINA MERCEDES 2019219772
 ROMERO ORTEGA GRECIA VALERIA 2019219768
 ROSALES LLACSHUANGA JULIETTE 2019219794

13 de Julio 2020
 TABLA DE CONTENIDO

1.-Dibuje lo observado en las muestras preparadas en la práctica.

Diferencie entre el preparado en Fresco de un preparado en seco. .3

2. ¿Cuáles son los pasos de la preparación de muestra seca?........4

3.- ¿Cuál es la característica de la preparación de la muestra

fresca?....................................................................................................5

4. ¿Por qué es importante conocer las técnicas de coloración?......6

5. CONCLUSIONES................................................................................7

6. REFERENCIAS...................................................................................7
1.-Dibuje lo observado en las muestras preparadas en la práctica.
Diferencie entre el preparado en Fresco de un preparado en seco

DIFERENCIAS Preparado en fresco Preparado en seco

Preparación Requiere medio acuoso Requiere proceso:

extensión, fijación y
coloración
Relación con el
portaobjeto Móvil Adherido a la superficie

Puede ser manipulada En una sola posición Diferentes posiciones

Se puede perder la Si No
muestra

PREPARADO EN SECO

Muestra: Lactobacillus burgaricus

Muestra: Epitelio bucal

PREPARADO EN FRESCO

Muestra: Agua estancada

2. ¿Cuáles son los pasos de la preparación de muestra seca?

1. Elegir un portaobjetos limpio. Sostener el portaobjetos en frente de una fuente de

luz y mira a través de este para asegurarte de que no tenga manchas o
suciedad. La mayoría de los portaobjetos para microscopio son planos en la
parte superior e inferior, y cuentan con una forma rectangular. Son
transparentes, lo cual permite que la luz del microscopio pase a través de ellos e
ilumine la muestra transparente del espécimen. Si el portaobjetos se encuentra
sucio, o tiene manchas, no se podrá examinar con eficacia el espécimen.

2. Revisar el espécimen y determina si necesita rebanarse. La muestra del

espécimen deberá ser translúcido o semitransparente, o llegar a ser transparente
por completo, para que la luz pueda atravesarlo. Si la luz no es capaz de
atravesar por completo el espécimen y dirigirse hacia dentro del ocular del
microscopio, entonces no podrás observar el espécimen a través del
microscopio.

3. Rebanar un pedazo delgado de la muestra del espécimen. Utilizar una cuchilla

de afeitar para cortar el material del espécimen hasta obtener una rebanada
delgada y translúcida. Los montajes en seco son los más sencillos de preparar,
debido a que no requieren del uso de ningún líquido que vaya entre el
 portaobjetos y el espécimen. Un montaje en seco resulta ideal para el análisis de
aquellas muestras que no se encuentren en riesgo de secarse por completo.
Entre los materiales que se utilizan comúnmente en los montajes en seco.

4. Colocar la muestra del espécimen sobre el portaobjetos. Utilizar un par de fórceps

para recoger la rebanada delgada de la muestra del espécimen. Recuestarla de una
manera delicada sobre uno de los lados del portaobjetos. Si vamos a utilizar un
portaobjetos cóncavo, el cual tiene un lado hundido, coloca el espécimen en el
centro de la zona cóncava.

5. Colocar un cubreobjetos encima de la muestra del espécimen. El cubreobjetos

evitará que la muestra del espécimen se deslice fuera del portaobjetos. El
cubreobjetos también protegerá a la muestra del espécimen, en el caso de que
uno de los usuarios del microscopio baje accidentalmente el lente, y termine
presionando el espécimen.
3. ¿Cuál es la característica de la preparación de la muestra
fresca?

Para la preparación de cualquiera muestra se necesita del portaobjetos, que es una

pequeña pieza de vidrio con unas dimensiones de aproximadamente 76 x 26
milímetros y entre 1 y 1.5 milímetros de espesor. Su función es servir de soporte
para la muestra ya que es sobre él que colocaremos el espécimen que
queremos observar mientras que el cubreobjetos es pequeña pieza de vidrio con
unas dimensiones menores que el portaobjetos tiene una forma cuadrada con un
lado de entre 18 y 20 milímetros y un espesor de entre 0.13 y 0.17 milímetros. La
función del cubreobjetos es mantener la muestra en su sitio y protegerla de
posibles contaminaciones. Además, es también una medida de protección para
evitar que la lente del objetivo entre en contacto con la muestra.
La preparación en fresco es ideal para la observación de microorganismos o de
tejidos biológicos que requieren ser hidratados, se caracteriza por qué no hay
necesidad de echar una tinción, este solo requiere de colocar la muestra que
deseamos observar en el portaobjetos ya se ha liquido o sólido y luego
posicionar el cubreobjetos en un ángulo de 45 grados.

4. ¿Por qué es importante conocer las técnicas de coloración?

Porque la coloración ayuda en la principal dificultad que es la falta de contraste

entre la célula y el medio que la rodea, esta coloración puede emplearse para
distinguir diferentes tipos de célula, revelar su forma y tamaño, permite ver
estructuras internas y externas, genera reacciones químicas específicas. Además,
las diferentes coloraciones o tinciones en el laboratorio microbiológico tienen una
utilidad fundamental para el diagnóstico y tratamiento oportuno de múltiples
patologías de etiología infecciosa.
Una de las técnicas utilizadas en el laboratorio es la tinción de Gram, este es un
procedimiento diferencial que permite estudiar la bacteria, diferenciarla fácilmente
según sus características morfológicas:
 Su tamaño
 Forma
 Agrupación bacteriana
 Germen predominante en u infección o en muestras contaminadas con
biota normal

5. CONCLUSIONES

La preparación en fresco se caracteriza porque la sustancia examen no está

adherida fijamente a la lámina portaobjeto, en cambio, en la preparación en seco
sufren un procesamiento previo para adherir a la sustancia a la lámina
portaobjetos.
Al realizar un preparado fresco es para materiales que necesitamos ver su
movimiento y no necesitamos fijar como el agua estancada y al realizar un
preparado en seco es para muestras biológicas como de sangre o sarro dental
que necesitan ser fijadas.
La coloración ayuda a encontrar un mejor contraste del microorganismo que
observamos por el microscopio, conocer y diferenciar mejor las características
de este.
La ventaja de las muestras en seco es que no tienen problemas de
deshidratación y pueden mantenerse preparadas para una observación
posterior, además de que todo su procedimiento no implica pasos más
complicados como con las muestras preparadas en fresco.
6. REFERENCIAS
Elaboración de preparaciones microscópicas [Internet]. Mundo Microscopio.
2020 [citado 12 julio 2020]. Disponible en:
https://biologiacomociencia.weebly.com/elaboracioacuten-de-preparaciones-
microscoacutepicas.html

Preparación de muestras para microscopio óptico [Internet]. Mundo Microscopio.

2020 [citado 12 julio 2020]. Disponible en:
https://www.mundomicroscopio.com/preparacion-de-muestras/

Métodos y técnicas de tinción [Internet]. Microbiología [citado 12 julio 2020].

Disponible en: http://microbiologia3bequipo5.blogspot.com/2014/10/metodos-y-
tecnicas-de-tincion.html
Cómo preparar un portaobjetos para microscopio [Internet].WikiHow [citado 12
julio 2020]. Disponible en: https://es.wikihow.com/preparar-un-portaobjetos-para-
microscopio