UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA

QUÍMICA FARMACÉUTICO BIOLÓGICA

BIOQUÍMICA CELULAR Y DE LOS TEJIDOS II

(LABORATORIO)

“MORFOLOGÍA Y FISIOLOGÍA DEL

LEUCOCITO ”

GRUPO:
2503

EQUIPO:
6

INTEGRANTES:

● GARCÍA VALENCIA ODALYS

● JIMENEZ TAPIA BRENDA ITZEL

PROFESOR RESPONSABLE:

MARÍA DEL ROSARIO BENÍTEZ VELÁZQUEZ

11 DE MARZO, 2023
TABLA DE CONTENIDO

1. Resumen …………………………….. 2
2. Marco Teórico……………………….. 3
3. Objetivos ……………………………… 5
4. Material …………………………………….………………………………………. 5
5. Método …………………………………….……………………………………….. 5
5.1 Recuento manual de leucocitos …………………………………….………… 6
5.2 Frotis sanguíneo y tinción …………………………………….………… 6
6. Resultados …………………………………….…………………………………… 7
7. Discusión …………………………………….……………………………………. 9
8. Conclusión
…………………………………….……………………………………10
9. Referencias …………………………………….…………………………………..
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1
RESUMEN
El recuento de Leucocitos sirve para detectar o diagnosticar diversos trastornos que
pueden afectar a los leucocitos o células de la serie blanca (glóbulos blancos) de la
sangre, como infecciones, inflamaciones o enfermedades en las que se afecta la
producción o la supervivencia de los leucocitos; para monitorizar tratamientos de
enfermedades de la sangre o tratamientos que pueden alterar los leucocitos.

Normalmente forma parte del hemograma y se realiza en cualquier control de

sangre rutinario; cuando existen signos y síntomas asociados a alteraciones de los
leucocitos; cuando pueden alterarse los leucocitos a consecuencia de cualquier otra
enfermedad o de un tratamiento. También conocido como: recuento y fórmula,
recuento celular o recuento celular con diferenciación, el hemograma es una prueba
en la que se evalúan las células que circulan en la sangre; incluidos los hematíes
(eritrocitos o glóbulos rojos), leucocitos (glóbulos blancos) y plaquetas. El
hemograma sirve para evaluar el estado de salud en general y detectar una
variedad de enfermedades y afecciones, como infecciones, anemia y
leucemia.Todas estas células sanguíneas se producen y maduran principalmente en
la médula ósea, y normalmente, se liberan hacia la sangre a medida que se van
necesitando. La determinación se realiza a partir de una muestra de sangre venosa
o a veces por punción en un dedo o en el talón (recién nacidos).
Cuando se ha diagnosticado una enfermedad que se sabe que afecta a las células
sanguíneas, a menudo se solicitará un hemograma completo para controlar el
estado de la enfermedad. Del mismo modo, si se está siendo tratado por un
trastorno relacionado con la sangre, se puede realizar un hemograma completo con
frecuencia para determinar si el tratamiento es eficaz.

MARCO TEÓRICO

Frotis sanguíneo
Un frotis o extendido sanguíneo se hace con la finalidad de teñir las células
sanguíneas con colorantes policromatófilos y poder detectar alteraciones
morfológicas de los eritrocitos. De igual manera es posible identificar leucocitos
(glóbulos blancos) con base a afinidades tintoriales o morfológicas. Los colorantes
policromatófilos son mezclas de compuestos básicos como el azul de metileno y
ácidos como la eosina. La tinción dependerá de la afinidad ácido – base que tengan
los diferentes estructuras celulares. Los componentes ácidos, como el núcleo se
tiñen con el colorante básico, por lo que reciben el nombre de basófilos mientras
que los componentes básicos se tiñen con el colorante ácido (eosinófilos). Algunas
estructuras celulares se tiñen con ambos colorantes y se conocen como neutrófilos.
En la siguiente tabla se resume la información anterior.

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 Leucocitos
Conocidos también como glóbulos blancos. Su principal función es de defensa
contra agentes externos mediante dos tipos de respuesta: celular y humoral.
Normalmente hay entre 6000 y 10000 leucocitos por mm3 y se habla de leucopenia
cuando se encuentran disminuidos y de leucocitosis cuando están aumentados.
De acuerdo a la presencia o ausencia de gránulos específicos, los leucocitos
pueden ser clasificados como granulocitos (neutrófilos, eosinófilos, y basófilos) y
agranulocitos (linfocitos y monocitos).
Existen valores normales de los diferentes tipos de leucocitos en proporción
porcentual y en valores absolutos. Este parámetro se denomina recuento diferencial
y permite orientar las causas fisiopatológicas de una leucopenia o una leucocitosis.
Las principales características de los diferentes tipos de leucocitos se pueden
resumir en la siguiente tabla:

3
4
OBJETIVOS

● Realizar correctamente un frotis de sangre periférica, utilizando la tinción de

Wright.
● Identificar y describir los diferentes elementos celulares (tamaño, forma,
color) del frotis de sangre observados al microscopio.
● Realizar un recuento diferencial de leucocitos del extendido.

MATERIAL
• Material biológico: o Sangre anticoagulada con EDTA
• Microscopio óptico
• Cámara de Neubauer
• Portaobjetos de vidrio 75 x 25 mm
• Pipetas tipo Pasteur
• Pipeta de Thoma para leucocitos

REACTIVOS
• Colorante de Wright
• Líquido de Turk

MÉTODO

Recuento manual de leucocitos

1. Homogeneizar por mezclado la muestra de sangre anticoagulada.
2. Llenar la pipeta de Thoma para glóbulos blancos, hacer la dilución con el líquido
de Turk. (Seguir la técnica de llenado de pipeta y de la cámara de Neubauer
conforme al Anexo 2 del manual de prácticas)

5
 3. Calcular el número de leucocitos por µL (mm3 ) de sangre.

Frotis sanguíneo
1. En un extremo de un portaobjetos limpio y seco (portaobjetos soporte), con una
pipeta Pasteur se coloca una gota de sangre anticoagulada de aproximadamente 3
mm de diámetro.
2. Otro portaobjetos limpio y seco (portaobjetos extensor) se coloca en un ángulo de
35-45º, delante de la gota de sangre que está sobre el portaobjetos soporte. Figura
1. Importante: Procurar que la sangre se extienda entre el borde del portaobjetos
extensor y el portaobjetos soporte.
3. El portaobjeto extensor se desliza hasta tener contacto con la gota de sangre y se
sostiene en esa posición hasta que la sangre se esparce en todo lo ancho del
portaobjetos. Figura 1
4. El portaobjetos extensor se desliza con rapidez y suavidad hacia el otro extremo
del portaobjetos soporte. Figura 1
5. Dejar secar al aire los frotis sanguíneos preparados antes de teñir.

Figura 1. Técnica del portaobjetos en

cuña.
Tinción
1. Cubrir el frotis con colorante de Wright durante 2 minutos.
2. Sobre el frotis con colorante, añadir agua destilada sin que la mezcla se derrame
y dejar teñir durante 4-5 minutos hasta que aparezca una capa metálica.
3. Enjuagar el frotis con agua destilada y dejarlo secar al aire en posición vertical.
4. Observar al microscopio óptico con objetivo 10x (seco débil) para verificar la
calidad del frotis.

RESULTADOS

TABLA 1. Diferencial de Leucocitos.

TIPO DE FUNCIÓN TAMAÑO TIPO DE CAUSAS DE CAUSAS DE
LEUCOCITO (µm) GRANULO AUMENTO DISMINUCIÓN

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BANDA Trabaja en la 10-14 Infecciones Exposición a
defensa del bacterianas, radiaciones,
cuerpo contra quemaduras, estrés intoxicaciones por
bacterias. Su e inflamación. medicamentos,
función deficiencia de
principal es vitamina B12 y
como fagocitos lupus eritematoso
en los tejidos. sistémico.

BASÓFILOS Trabaja en la 10-14 Granuloci Reacciones Embarazo,

defensa del tos alérgicas, procesos ovulación, estrés e
cuerpo contra inflamatorios hipertiroidismo.
los agentes crónicos (leucemias,
alérgicos e cáncer e
inflamatorios. hipotiroidismo).

EOSINÓFILOS Trabaja en la 12-17 Granuloci Reacciones Intoxicación por

defensa del tos alérgicas, medicamentos y
cuerpo contra infestaciones estrés
los parásitos parasitarias y
tisulares y la enfermedades
reacción autoinmunes
alérgica.

LINFOCITOS Trabaja en la 7.8 Agranulo Infecciones virales y Enfermedades

defensa del citos algunas leucemias y crónicas (falla
cuerpo contra linfomas renal),
las infecciones inmunosupresión y
virales. tratamiento con
cortisol

MONOCITOS Trabaja en la 12-20 Agranulo Infecciones virales y Depresión de

defensa del citos micóticas, médula ósea y
cuerpo contra tuberculosis, tratamiento con
las infecciones algunas leucemias y cortisol.
bacterianas y otras enfermedades
fúngicas. crónicas.

NEUTRÓFILOS Trabaja en la 10-15 Granuloci Infecciones Exposición a

defensa del tos bacterianas, radiaciones,
cuerpo contra quemaduras, estrés intoxicaciones por
las bacterias. e inflamación. medicamentos,
deficiencia de
vitamina B12 y
lupus eritematoso
sistémico.

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Tabla 2. Resultados del conteo de 100 Leucocitos, clasificados por el tipo de
leucocito y morfología.
TIPO DE # DE CÉLULAS % DE CÉLULAS VALOR
LEUCOCITO REFERENCIA

BASÓFILOS 0 0 0 - 3%

EOSINÓFILOS 0 0 0 - 3%

LINFOCITOS 47 47 13-50%

MONOCITOS 10 10 2-13%

NEUTRÓFILOS 43 43 40-82%
Los valores obtenidos entran en los rangos establecidos teóricamente por lo que se asume
que el paciente está sano sin embargo los resultados deben ser interpretados por un
médico.
Observación de células sanguíneas

Imagen 1. Linfocito 100X.

Células pequeñas con núcleo circular oscuro y escaso citoplasma de color
azul.

Imagen 2. Neutrófilo 100X:

tienen núcleo fragmentado, con 3 o 5 lóbulos. En el citoplasma poseen
gránulos teñidos de azul. Monocitos 100X: células circulares de mayor
tamaño. Tienen un núcleo en forma de “U” o de frijol.

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 Figura 3. Sangre periférica
con tres neutrófilos 100X.

Conteo de leucocitos en cámara de Neubauer.

Total: 205 leucocitos

11−1
FD= 0.5
= 20

205 𝑥 20 3
2 = 10250 𝑙𝑒𝑢𝑐𝑜𝑐𝑖𝑡𝑜𝑠/𝑚𝑚
4 (1𝑚𝑚) (0.1 𝑚𝑚)

Los valores de referencia varían ligeramente según la población estudiada, y deben

ser establecidos por cada laboratorio. En la Ciudad de México, los valores normales
promedio de leucocitos en adultos sanos son de 3800 a 11000/ µL (mm3 ) de
sangre.

DISCUSIÓN
Se realizó por medio de punción venosa la recolecta y almacenamiento de sangre
para análisis hematológico, bioquímico y clínico-patológico.
Debido a que para los diferentes análisis se trabajó con la sangre anticoagulada fue
necesario el uso del anticoagulante EDTA pues este actúa como quelante de Ca++,
y permite una mejor preservación de los componentes celulares en la sangre.
Se hizo la toma de frotis sanguíneo tomando una gota de sangre anticoagulada con
una pipeta pasteur dejándola caer sobre el portaobjetos soporte para que después
esta entrara en contacto con el portaobjetos extensor y en un solo movimiento
suave y continuo se extendiera hasta el otro extremo del portaobjetos para así
obtener una buena distribución de células. Se dejaron secar los frotis al aire y
posteriormente se les realizó la tinción de Wright, esta es la más utilizada debido a
que contiene eoisa y azul de metileno lo que hace que se puedan distinguir las
distintas estructuras celulares. Una vez teñidos y secos se procedió a la lectura del

9
extendido por medio del microscopio, la zona a estudiar se encuentra cercana a la
terminación del extendido, por lo que los eritrocitos de la zona de lectura se
observaron en su mayoría esparcidos y unos cuantos agregados o juntos, esta zona
se buscó con los objetivos de 10x y 40x y una vez localizada se procedió a la lectura
empleando un recorrido en el frotis con el patrón de guarda griega o almena.
a 100x, por medio de este método se pudieron observar los diferentes tipos de
leucocitos.
Después se llevó a cabo el conteo de glóbulos blancos por medio de la cámara de
Neubauer; comenzamos trabajando con una pipeta de Thoma en la cual se ocupó la
muestra de sangre anticoagulada, se succionó hasta llegar a la marca de 0.5
indicada en la pipeta, posteriormente de la misma manera se tomó el diluyente Turk
pero en esta ocasión hasta llegar a la marca 11 siendo este el volumen total para
eritrocitos; se mezclaron los dos componentes dentro de la pipeta durante 10 min y
ya pasado el tiempo correspondiente pasamos a la cámara de Neubauer en la que
colocamos la pipeta en el borde del cubreobjetos y la cámara, dejamos desechar las
primeras tres gotas y hasta la cuarta gota dejamos caer la mezcla hasta que se
distribuyera uniformemente sin derramarse a los lados. Inmediatamente pasamos al
microscopio a hacer el recuento, localizamos la cuadrícula desde el objetivo 10X,
nos posicionamos en el primer cuadro superior izquierdo del cuadrante,se ubica el
cuadrante correspondiente con el objetivo 100X usando aceite de inmersión e
iniciamos el conteo de izquierda a derecha y de arriba abajo y así consecutivamente
hasta contar los cuatro cuadrantes. Una vez contabilizadas las células en los
cuadrantes correspondientes, aplicamos la fórmula para calcular la concentración de
células por milímetro cúbico (mm3) y anotamos resultados.

CONCLUSIONES

Se pudieron observar los distintos tipos de leucocitos tales como neutrófilos,

monocitos y linfocitos que fueron los que se presentaron en mayor cantidad y se
hizo el conteo de estos mismos por medio del recorrido en el frotis con el patrón de
guarda griega o almena. Los valores normales promedio de leucocitos en adultos
sanos son de 3800 a 11000/ μL (mm3) de sangre y haciendo una comparativa con
3
nuestros resultados obtenidos 10250 𝑙𝑒𝑢𝑐𝑜𝑐𝑖𝑡𝑜𝑠/𝑚𝑚 pudimos concluir que entra
dentro del rango establecido por lo que se trata de un paciente sano.

REFERENCIAS

1. Hematopoyesis [Internet]. Mhmedical.com. [citado el 6 de marzo de 2023].

Disponible en:
https://accessmedicina.mhmedical.com/content.aspx?bookid=1995&sectionid
=150301032.

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2. Morfologia de celulas sanguineas [Internet]. prezi.com. [citado el 7 de marzo
de 2023]. Disponible en:
https://prezi.com/pcyc_1jyekki/morfologia-de-celulas-sanguineas/?fbclid=IwA
R1bi_UN5kmrOy6vZV9_dItVr7TJUF7EvR09n5ewXvGtkSM_AHqTZn5r_sY.
3. Amador SAS. Glóbulos blancos o leucocitos: características, tipos y funciones
[Internet]. Muy Salud. 2021 [citado el 7 de marzo de 2023]. Disponible en:
https://muysalud.com/bioquimica/globulos-blancos-leucocitos-caracteristicas-t
ipos-funciones/
4. Unam.mx. [citado el 7 de marzo de 2023]. Disponible en:
http://www.ete.enp.unam.mx/IntroAnaCl.pdf
5. Ruiz Arguelles, Guillermo J. Fundamentos de hematología. 2a ed. México,
DF: Médica Panamericana, 1998.

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