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13652591, 2010, 11, Descargado de https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/j.1365-2591.2010.01757.x por Readcube (Labtiva Inc.), Wiley Online Library el [20/10/2022] . Consulte los Términos y condiciones (https://onlinelibrary.wiley.com/terms-and-conditions) en Wiley Online Library para conocer las reglas de uso; Los artículos de OA se rigen por la Licencia Creative Commons aplicable
doi:10.1111/j.1365-2591.2010.01757.x
Caracterización del infiltrado de células inflamatorias en la

pulpitis dental humana
bruno1, JA Silva1, TA Silva2, A.C. Batista3, AHG Aléncar1& C.Estrela1

1Departamento de Endodoncia de la Universidad Federal de Goiás, Goiânia, GO;2Departamento de Cirugía y Patología Oral, Facultad de Odontología,
Universidad Federal de Minas Gerais, Belo Horizonte; y3Departamento de Estomatología (Patología Oral), Facultad de Odontología, Universidad Federal de
Goiás, Goiânia, Brasil
Resumen ResultadosSe encontraron dos patrones microscópicos de

pulpitis: grupo 1 (G1) (norte =15) tenía un intenso infiltrado
Bruno KF, Silva JA, Silva TA, Batista AC, Alencar AHG,
inflamatorio y leve depósito de colágeno; por el contrario,
Estrela C.Caracterización del infiltrado de células inflamatorias en la
el grupo 2 (G2) (norte =23) presentaba un escaso infiltrado
pulpitis dental humana.revista internacional de endodoncia,43,
inflamatorio y un intenso depósito de colágeno. Los
1013–1021, 2010.
números de CD68+macrófagos (PAG =0,004) y CD20+B (PAG
IntroducciónEvaluar las características microscópicas =0,068) linfocitos y la densidad de los vasos sanguíneos (
y densidades (por mm2) de triptasa+mastocitos, CD4+ PAG =0.002) fueron mayores en G1 que en G2. Sin
Linfocitos T auxiliares, CD45RO+linfocitos T de embargo, un número similar de CD4+y CD45RO+
memoria, foxp3+Linfocitos T reguladores, CD20+ Se encontraron linfocitos T en ambos grupos (PAG >0,05).
Linfocitos B, CD68+macrófagos y CD31+vasos Cuando está presente, la triptasa+los mastocitos se
sanguíneos en la pulpitis dental humana (norte =38) y distribuyeron por igual en G1 y G2, mientras que foxp3+Se
tejido pulpar sano (norte =6). detectaron linfocitos T reguladores en el 59% y 14% de las
MetodologíaLas pulpas de 38 dientes humanos con un muestras de G1 y G2. Los controles exhibieron números
diagnóstico clínico de pulpitis irreversible fueron extraídas por más bajos de células positivas foxp3, triptasa, CD4,
pulpectomía. El tejido pulpar se sumergió en formalina CD45RO, CD68 y CD20 que G1 y G2.
tamponada al 10 % para su evaluación mediante microscopía ConclusionesLa pulpitis irreversible tenía distintas características
óptica. Las expresiones de triptasa, CD4, CD45RO, foxp3, CD20, microscópicas con importantes diferencias cuantitativas y
CD68 y CD31 se analizaron mediante inmunohistoquímica; otras cualitativas en la infiltración de células inflamatorias.
características microscópicas, como la intensidad del infiltrado
Palabras clave:caries, pulpa dental, pulpitis dental, células
inflamatorio y el depósito de colágeno, se evaluaron mediante
inmunológicas, células inflamatorias.
tinción con hematoxilina y eosina. Para el análisis estadístico se
utilizaron las pruebas de Wilcoxon y Mann-Whitney. El nivel de Recibido el 10 de diciembre de 2009; aceptado el 16 de abril de 2010
significación se fijó enun =5%.
1981, Izumiet al.1995, Okjiet al.1997, Nanci 2003,

Introducción
Costaet al.2009).
Las bacterias que se encuentran en la caries dental son los La respuesta inflamatoria consiste en mecanismos de
agentes etiológicos más frecuentes de lesión de la pulpa dental. defensa no específicos e inmediatos, que involucran
Las reacciones inflamatorias e inmunológicas ocurren en fenómenos vasculares-exudativos, como vasodilatación y
respuesta a microorganismos o sus productos, que penetran en aumento de la permeabilidad, así como la infiltración de
la pulpa a través de los túbulos dentinarios (Bergenholtz células inflamatorias, como mastocitos, neutrófilos y
macrófagos (Bergenholtz 1990, Izumiet al. 1995, Avery
2002, Abbas y Lichtman 2003). Si bien estas células juegan
Correspondencia: Profesor Carlos Estrela, Centro de Ensino
un papel importante en la defensa de la pulpa, también
e Pesquisa Odontológica do Brasil (CEPOBRAS), Rua C-245,
Quadra 546, Lote 9, Jardim América, Goiânia, GO, CEP: participan en la degradación de la matriz extracelular
74.290–200, Brasil (e-mail: estrela3@ terra.com.br ). mediante la liberación de metaloproteinasas de la matriz.
ªRevista Internacional de Endodoncia 2010 revista internacional de endodoncia,43,1013–1021, 2010 1013

Aspectos inmunológicos de la pulpitis dentalBruno et al.
(Tjaderhaneet al.2001, Gusmánet al.2002, Wahlgren antígeno 4 de linfocitos T citotóxicos (CTLA-4), y el factor
et al.2002). de transcripción forkhead (Foxp3) (Akbaret al. 2003,
Los mastocitos liberan varias sustancias biológicamente Chenet al.2003, Zheng y Rudensky 2007). De estos, la
activas responsables de la modulación de las respuestas expresión de foxp3 puede ser el marcador más
inflamatorias e inmunológicas y de la angiogénesis (Holzer específico de las células Treg. (Chenet al.2003, Zheng y
1988, Jontellet al.1998, Rodiniet al.2004, Freitas et al.2007). Rudensky 2007).
Este último es extremadamente importante en los procesos A pesar de la alta frecuencia de pulpitis dental en las
de inflamación y reparación, en los que la proteína de clínicas de endodoncia, pocos estudios han descrito sus
membrana endotelial CD31 representa un marcador perfiles inflamatorios e inmunológicos (Bergenholtz
vascular fiable (Woodfinet al.2007). Los macrófagos son 1981, Izumiet al.1995, Jontellet al.1998). Por lo tanto,
células mononucleares responsables de la fagocitosis, la nuevos estudios deben investigar la patogenia de la
presentación de antígenos y la inmunomodulación (Jontell enfermedad pulpar para poder desarrollar terapias más
et al.1998, Abbas y Lichtman 2003, Hahn y Liewehr 2007a); eficientes.
también contribuyen a la reparación pulpar al inducir la Para comprender mejor la patogénesis y las
proliferación de fibroblastos (Brodyet al.1992) y características microscópicas de la pulpitis dental
neovascularización (Polverini 1995). humana, este estudio investigó la presencia de varias
La respuesta inmune es un mecanismo de defensa más células inflamatorias inmunes (mastocitos, linfocitos T
específico que se activa después de la respuesta inflamatoria. auxiliares, linfocitos T de memoria, linfocitos T
Las reacciones inmunitarias se caracterizan por el reguladores, linfocitos B y macrófagos).
procesamiento, la presentación y el reconocimiento de
antígenos (Avery 2002, Abbas y Lichtman 2003). En la pulpa
materiales y métodos
dental, las células presentadoras de antígenos (APC), que
expresan moléculas del complejo mayor de histocompatibilidad
Muestras de pulpa dental
de clase II (MHC de clase II), capturan proteínas antigénicas y
presentan fragmentos peptídicos a los linfocitos T auxiliares Este estudio fue aprobado por el comité de ética de la
específicos de antígeno en los linfocitos. Linfocitos T auxiliares Universidad Federal de Goiás, Brasil, y se obtuvo el
activados (CD4+linfocitos T auxiliares) se multiplican consentimiento informado de todos los pacientes.
rápidamente, crean muchos clones, se diferencian en células T Treinta y ocho dientes humanos fueron seleccionados al azar
de memoria (CD45RO+linfocitos T de memoria) (Jontellet al. (19 incisivos maxilares y 19 molares maxilares, cuyas pulpas
1998), y, a través de corrientes sanguíneas o linfáticas (Pimenta fueron extraídas de sus raíces palatinas) con diagnóstico clínico
et al.2003), migran al tejido pulpar, donde las APC nativas de pulpa inflamada de pacientes (edad media, 29,8 ± 13; 20
comienzan la fagocitosis y presentan los antígenos hombres) atendidos en el Dental Servicio de Urgencias de la
directamente a estas células T. Una vez activado, CD4+ Facultad de Odontología, Universidad Federal de Goiás, Brasil.
Los linfocitos T helper desencadenan una respuesta Estos pacientes no tenían antecedentes de enfermedades
inmunitaria eficaz ante cualquier nueva entrada del agresor sistémicas ni habían consumido ningún medicamento en los
en la pulpa. Según el perfil de producción de citoquinas, últimos 3 meses. El diagnóstico clínico de pulpitis irreversible se
CD4+/CD45RO+Los linfocitos T pueden estimular la basó en los siguientes criterios: sintomatología espontánea;
migración y activación de macrófagos, otros CD4+ respuesta positiva a la prueba de sensibilidad pulpar (PST;
linfocitos T auxiliares y CD20+Linfocitos B (Jontellet aerosol de tetrafluoroetano); ausencia de exposición pulpar
al.1998, Abbas & Lichtman 2003), que producen asociada con la caries dental. Los dientes no estaban asociados
anticuerpos contra antígenos específicos (Abbas & con enfermedades periodontales o periapicales.
Lichtman 2003).
Los subconjuntos de linfocitos T, conocidos como células Tras el diagnóstico clínico de pulpitis irreversible, los
T reguladoras (Treg), desempeñan un papel importante en pacientes fueron derivados a un especialista para tratamiento
la regulación de las respuestas inmunitarias e inflamatorias de conducto. El primer paso fue la pulpectomía, de acuerdo con
a través de la secreción de citocinas antiinflamatorias, como las siguientes pautas: anestesia, aislamiento del diente,
la interleucina-10 y el factor de crecimiento transformante.b antisepsia del campo operatorio con hipoclorito de sodio al 1%
(TGF-b) (Abbas y Lichtman 2003, Akbaret al.2003, Chenet al. y preparación de la cavidad de acceso en la cara oclusal del
2003). Estas células se caracterizan por la expresión diente utilizando una fresa esférica con punta de diamante a
constitutiva de una proteína transmembrana, la cadena alfa alta velocidad y bajo refrigeración agua-aire. La longitud de
del receptor de la interleucina-2 (CD25), el trabajo se fijó a 1 mm de la
1014 revista internacional de endodoncia,43,1013–1021, 2010 ªRevista Internacional de Endodoncia 2010

Bruno et al.Aspectos inmunológicos de la pulpitis dental
ápice según radiografías periapicales. Se introdujo una lima El depósito de colágeno se caracterizó por un área eosinofílica
K de pequeño diámetro entre la pared del conducto con celularidad reducida y densidad de vasos sanguíneos o
radicular y el tejido pulpar para crear espacio y liberar el incluso una región eosinofílica acelular sin vasos sanguíneos. La
tejido, y luego se extirpó cuidadosamente el tejido con una deposición de colágeno se clasificó como leve, cuando la
lima Hedström. Después de la pulpectomía, la preparación mayoría de los campos (>7) tenían <35% del espacio del retículo
y el empaste del conducto radicular se realizaron en la lleno de colágeno e intensa, cuando la mayoría de los campos
misma cita. (>7) tenían más del 35% del espacio del retículo lleno de
Además, pulpas dentales sanas (control) (norte =6) se colágeno.
recolectaron de dientes humanos permanentes La calcificación se puntuó como ausente, leve e
erupcionados (sin caries de dentina clínica) extraídos por intensa, y las áreas necróticas se consideraron
razones de ortodoncia. presentes o ausentes.
Los tejidos pulpares se sumergieron en formalina
tamponada al 10% para su posterior evaluación mediante
inmunohistoquímica
microscopía óptica en el Laboratorio de Patología Oral de la
Universidad Federal de Goiás, Brasil. Secciones de 3yom fueron desparafinados y deshidratados. La
peroxidasa endógena se bloqueó mediante incubación con
peróxido de hidrógeno al 3%. Las secciones se sometieron a
microscopía de luz
recuperación de antígenos (Tabla 1). A continuación, las
Todas las muestras de tejido pulpar se fijaron en formalina secciones se bloquearon mediante incubación con suero de
tamponada al 10% (pH 7,4) y se incluyeron en bloques de cabra normal al 3% durante 20 min. Se detectaron mastocitos,
parafina. Las características microscópicas, incluida la linfocitos T auxiliares, linfocitos T de memoria, linfocitos T
intensidad del infiltrado inflamatorio, el depósito de colágeno, reguladores, linfocitos B, macrófagos y vasos sanguíneos
la calcificación y las áreas necróticas, se evaluaron mediante usando antitriptasa, anti-CD4, anti-CD45RO, anti-foxp3, anti-
una escala de 5yom sección de cada muestra teñida con CD20, anti-CD68, y anticuerpos anti-CD31, respectivamente
hematoxilina y eosina (HE). (Tabla 1). A continuación, los portaobjetos se incubaron con los
Se determinó la intensidad del infiltrado inflamatorio anticuerpos primarios durante 18 ha 4 °C. Después del lavado
asociado (ausente, leve o intenso) para cada muestra de en TBS, los cortes fueron tratados con el Sistema Novolink
pulpa dental. Después de analizar 10 campos microscópicos (Novocastra, Newcastle, UK) o el LSAB-+sistema, HRP Peroxidase
representativos de alta potencia (400·aumento) utilizando Kit (Dako, Carpinteria, CA, EE. UU.) (Tabla 1), y luego se
una retícula (Carl Zeiss, Göttingen, Alemania), las muestras incubaron en 3,3¢-diaminobencidina (DAB) (Dako) durante 2–5
se clasificaron según la inflamación: a) sin inflamación, min. Finalmente, las secciones se tiñeron con hematoxilina de
cuando la mayoría de los campos (> 7) no tenían células Mayer y se cubrieron. Se usaron muestras de tejido de
inflamatorias; b) inflamación leve, cuando la mayoría de los amígdalas como controles positivos para todos los marcadores.
campos (>7) tenían <35% del espacio de la retícula ocupado Los controles negativos se obtuvieron omitiendo los
por células inflamatorias; c) inflamación intensa, cuando la anticuerpos primarios y utilizando PBS-BSA al 1 % y suero de
mayoría de los campos (>7) tenían más del 35% del espacio conejo no inmune (X0902, Dako) o de ratón (X501-1, Dako).
de la retícula ocupado por células inflamatorias.
tabla 1Anticuerpos y protocolos de reacciones inmunohistoquímicas
anticuerposa(clon) Dilución Recuperación de antígenos Anticuerpo secundario
Antitriptasab(AA1) 1: 2000 Sin exposición Kit-LSABb

anti-CD4C(4B12) 1: 100 Tampón EDTA (pH = 9,0 durante 30 min a 95 -C) Kit-NovolinkC
Anti-CD45ROC(UCHL1) 1: 300 Tampón citrato (pH = 6,0 durante 30 min a 95 -C) Kit-NovolinkC
Anti-foxp3d(236A/E7) 1: 400 Tampón citrato (pH = 6,0 durante 30 min a 95 -C) Kit-LSABb
anti-CD20b(L26) 1: 2000 Tampón citrato (pH = 6,0 durante 45 min a 95 -C) Kit-LSABb
Anti-CD68C(KP1) 1: 1000 Tampón de citrato (pH = 6,0 durante 45 min a 95 -C) Kit-LSABb
Anti-CD31C(1A10) 1: 200 Tampón de citrato (pH = 6,0 durante 30 min a 95 -C) Kit-NovolinkC
aTodos los anticuerpos fueron monoclonales de ratón.

bDako (Carpintería, CA, EE. UU.).
CNovocastra (Newcastle, Reino Unido).
dBiotecnología de Santa Cruz (Santa Cruz, CA, EE. UU.).

5–10 campos microscópicos de alta potencia

Histoquímica
representativos y consecutivos (400·aumento); con este
La densidad de mastocitos también se evaluó usando azul aumento, cada campo de la retícula tenía un área de 0,0961
de toluidina (TB) (Heaneyet al.1997). Secciones de 5yom mm2. También se analizó la ubicación y distribución de
fueron desparafinados e hidratados con agua. La tinción de células y vasos sanguíneos. Para todos los análisis, se
TB se realizó con una solución de TB al 1% diluida en evaluó un portaobjetos con dos secciones representativas
tampón fosfato (pH 4–6) durante 45 s. Después de elevarse para cada muestra. Los análisis descriptivos se expresaron
en tampón de fosfato durante 1 min, las secciones se como media ± desviación estándar (SD) denorte
deshidrataron rápidamente con etanol al 70 %, 96 % y observaciones por mm2. Se utilizó la prueba de Wilcoxon
acetona pa a xileno y se montaron en resina sintética. para comparar todas las poblaciones celulares y la prueba
no paramétrica de Mann-Whitney para las comparaciones
entre grupos experimentales. APAGS-valor de <0,05 se
Análisis cuantitativo y cualitativo
consideró estadísticamente significativo.
Los números de triptasa+mastocitos, CD4+Linfocitos
T auxiliares, CD45RO+linfocitos T de memoria, foxp3+
Resultados
Linfocitos T reguladores, CD20+linfocitos B y CD68+
los macrófagos en las pulpas dentales humanas se Las características microscópicas de las muestras
calcularon utilizando la retícula. Todo CD31+ analizadas revelaron dos patrones distintos de pulpitis:
Se contaron los vasos sanguíneos con lumen vascular, incluso si pulpa dental con intenso infiltrado inflamatorio y leve
eran muy pequeños (microvasos). Todas las células depósito de colágeno (norte =15) (Grupo 1 – G1) (Fig.
inflamatorias inmunes y los vasos sanguíneos se contaron en 1a–c), y pulpa dental con escaso infiltrado inflamatorio y
(a) (b)
(C) (d)
(mi) (F) Figura 1Pulpa dental con intenso infiltrado

inflamatorio y leve depósito de colágeno
(a–c) y pulpa dental con escaso infiltrado
inflamatorio y intenso depósito de
colágeno (d–f). Vasos sanguíneos
preservados, dilatados y congestionados
(flecha b y e), y
calcificaciones (c y f – flecha). HE,
Ampliación original: a,d,·100; b, c, e, f,
· 400.

(a) (b)
Figura 2Vasos sanguíneos CD31+ (tinción marrón) distribuidos en pulpa dental con intenso infiltrado inflamatorio y leve depósito de
colágeno (a) y en pulpa dental con escaso infiltrado inflamatorio y intenso depósito de colágeno (b). Tinción inmunohistoquímica.
Ampliación original: a y b,·400.
intensa deposición de colágeno (norte =23) (Grupo 2 – G2) (media = 6,6 células mm)2). No identificamos mastocitos en
(Fig. 1d–f). Ninguna muestra tenía áreas necróticas, el 90% estas muestras usando la tinción de TB. Del mismo modo, foxp3
tenía áreas de calcificación y todas tenían vasos sanguíneos +Se encontraron linfocitos T reguladores (Fig. 3b) en el 34 % de
preservados (Figs. 1 y 2). Las principales características las muestras a densidades que oscilaban entre 1,1 y 27,1 células
microscópicas de las muestras se resumen en la Tabla 2. mm)2 (media = 10,49 células mm)2). la
Ambos grupos de pulpitis: Grupo 1 (pulpa dental con triptasa+mastocitos y foxp3+Los linfocitos T reguladores
intenso infiltrado inflamatorio y depósito leve de colágeno) estaban ausentes en las muestras de control.
y Grupo 2 (pulpa dental con escaso infiltrado inflamatorio y Los resultados también mostraron que, en todas las
depósito intenso de colágeno) tuvieron una media similar. muestras, hubo densidades más bajas de CD4+Linfocitos T
edad G1 (31,2 ± 12,8 años) y G2 (28,8 ± 15,1 años). Aunque auxiliares (Fig. 3c) y CD45RO+linfocitos T de memoria (Fig.
se encontraron dos patrones distintos de pulpitis mediante 3d) que de CD68+macrófagos (Fig. 3e) y CD20+Linfocitos B
microscopía, tanto las muestras G1 como las G2 tenían las (Fig. 3f) (Wilcoxon,pag <0,05 para todas las comparaciones).
mismas características clínicas (sintomatología espontánea;
respuesta positiva a la prueba de sensibilidad pulpar; El número de CD68+macrófagos por mm2fue
ausencia de exposición pulpar asociada con caries dental). significativamente mayor en G1 que en G2 (Mann-Whitney,
Las células inmunoinflamatorias evaluadas se distribuyeron PAG =0,004) (fig. 4). De manera similar, la densidad de CD20
de forma difusa por todo el tejido pulpar en todas las muestras ( +linfocitos B fue mayor en G1 que en G2, aunque esta
norte =38). triptasa+se encontraron mastocitos (Fig. 3a) en el diferencia no fue estadísticamente significativa (Mann-
24% de las muestras a baja densidad Whitney,PAG =0,068). Un número similar de CD4+y CD45RO
+Se encontraron linfocitos T tanto en G1 como en G2 (Mann-
Whitney,PAG >0,05) (fig. 4). El grupo de control mostró
Tabla 2Caracterización microscópica de la pulpitis dental
números significativamente más bajos de CD68+
humana (norte =38)
macrófagos, CD20+Linfocitos B, CD4+linfocitos T auxiliares y
Número
CD45RO+linfocitos T de memoria en comparación con los
característica microscópica de los casos %
grupos G1 y G2.
Infiltrado inflamatorio Ausente 0 –
Cuando estaban presentes, los mastocitos se distribuyeron por igual en
Templado 23 60.5
G1 y G2. Sin embargo, foxp3+se encontraron células en el 59%
Intenso 15 39.5
Deposición de colágeno Ausente 0 – y el 14% de las muestras de G1 (norte =10) y G2 (norte =3).
Templado 15 39.5 Los hallazgos también revelaron un mayor número de foxp3+T
Intenso 23 60.5 linfocitos regulares en G1 (media = 13,7 - células mm
Calcificación Ausente 4 10.5
)2) que en G2 (media = 6,2 celdas mm)2).
Templado dieciséis 42.1
El número de CD31+vasos sanguíneos fue significativamente
Intenso 18 47.4
Áreas necróticas Ausente 38 100.0 mayor en G1 que en G2 (Mann-Whitney,PAG =0.002)
Presente 0 – (Figura 2). No hubo diferencias significativas entre las
Densidad de CD31+ Bajo (£144) 23 60.5 pulpitis (media G1 = 190,00 vaso sanguíneo mm)2
vasos sanguíneos (significa: Alto (>144) 15 39.5
y G2 media = 120,2 vaso sanguíneo mm)2) y grupos control
144 vasos sanguineos mm)2)
(132,5 mm de vaso sanguíneo)2).

Aspectos inmunológicos de la pulpitis dental Bruno et al.
(a) (b)
(C) (d)
(mi) (F)
figura 3Inmunotinción representativa de

mastocitos triptasa+ (a), células reguladoras
foxp3+ T (b), células CD4+ (c), células
CD45RO+ (d), células CD68+ (e) y células
CD20+ (f) distribuidas en la pulpa dental
inflamada. Tinción inmunohistoquímica.
Ampliación original: a–f,
· 400.
et al.2009), cambios relacionados con la edad (Tranasiet al.

Discusión
2009), y otros.
La evaluación microscópica de las pulpitis reveló diferentes Se ha informado la presencia de mastocitos en la pulpa
patrones de respuesta: pulpas con intenso infiltrado inflamada, especialmente durante la fase crónica de la
inflamatorio y leve depósito de colágeno, y pulpas con inflamación (Farnoush 1984, Walshet al.1995). Los mastocitos
escaso infiltrado inflamatorio y intenso depósito de no parecen contribuir solo a las respuestas inmunológicas
colágeno. Sin embargo, estos dos patrones de respuesta específicas o vasculares tempranas en la patología pulpar
distintos vistos microscópicamente no fueron confirmados dental inicial, sino que también están involucrados en las fases
clínicamente, una indicación de las dificultades para crónicas de la inflamación pulpar, como en los pólipos pulpares
establecer asociaciones entre eventos histopatológicos y (Freitaset al.2007).
clínicos, un hallazgo corroborado por otros estudios (Seltzer En relación con las técnicas de tinción de mastocitos,
et al.1963, Narhi 2003). La correlación entre los síntomas y tanto el azul de toluidina (TB) como las técnicas de
los cambios histopatológicos en la pulpitis parece ser pobre identificación por inmunohistoquímica identifican de forma
y la determinación del tipo y extensión de los cambios fiable los gránulos de mastocitos; aunque estudios
inflamatorios sobre la base de los síntomas es inexacta recientes (Batistaet al.2005, Oliveira-Netoet al.2007) mostró
(Seltzeret al.1963). Es importante considerar que la que el método inmunohistoquímico es más específico que
respuesta inflamatoria y el posterior proceso de reparación la tinción metacromática por TB. De acuerdo, TB no fue útil
en las pulpas dentales pueden verse influenciados por para la identificación de mastocitos en este estudio.
varios factores, como el tipo y la duración de la infección La mayoría de las pulpas inflamadas no tenían mastocitos, y cuando
(Hahn & Liewehr 2007a,b), la lesión dental traumática estaban presentes, su número era pequeño, lo que está de acuerdo con
(Bruno estudios previos que informaron poblaciones pequeñas o

zorrop3+Los linfocitos T reguladores pueden suprimir

las células T (Lehner 2008) y, en consecuencia, reducir
su número, lo que fue sugerido por los números más
bajos tanto de CD4+y CD45RO+Linfocitos T que de CD68+
macrófagos y CD20+Linfocitos B en todas las muestras
analizadas. Sin embargo, el papel que juegan los
linfocitos T reguladores en la patogenia de la pulpitis
debe explorarse más a fondo.
El mayor número de linfocitos B que de T en la pulpitis
sugiere una respuesta humoral mediada por anticuerpos.
Después de la activación de las células T por las APC, las
células T secretan citoquinas y se diferencian en varios
efectores: CD4+Linfocitos T auxiliares, CD45RO+linfocitos T
Figura 4Densidad de linfocitos T auxiliares CD4+, linfocitos T de de memoria, foxp3+Linfocitos T reguladores y CD8+linfocitos
memoria CD45RO+, macrófagos CD68+, linfocitos B CD20+ por mm2 citotóxicos. La naturaleza de las respuestas de estas células
en G1 (pulpa dental con intenso infiltrado inflamatorio y ligero efectoras depende de la dosis, afinidad y naturaleza del
depósito de colágeno) y G2 (pulpa dental con escaso infiltrado antígeno, así como del tipo y concentración de citoquinas
inflamatorio y intenso depósito de colágeno). Se analizaron dos en el tejido. De acuerdo con el conocimiento actual, un
secciones representativas de cada muestra. Los resultados se aumento en la dosis de péptido antigénico conduce a
expresan como media de células positivas por mm2± DE. Se utilizó la
cambios en el CD4+
prueba de Mann-Whitney para comparar grupos a un nivel de
Patrón de respuesta de producción de citocinas de los
significación establecido en 0,05. (#) Diferencia significativa en la
linfocitos T auxiliares (Hahn & Liewehr 2007b). CD4+Las
densidad de macrófagos CD68+ en comparación de G1 con G2; (*) El
células Th1 producen interleucina 2 (IL-2) e interferón-
grupo de control mostró cantidades significativamente más bajas de
linfocitos T auxiliares CD4+, linfocitos T de memoria CD45RO+, gamma (IFN-C)predominantemente, que juegan un papel
macrófagos CD68+ y linfocitos B CD20+ en comparación con los en el reclutamiento y la activación de los macrófagos,
grupos 1 y 2. mientras que las células Th2 producen IL-4, IL-5 e IL-6, que
estimulan la proliferación, diferenciación y activación de los
linfocitos B (Jontellet al.1998, Abbas y Lichtman 2003). En
sin mastocitos en pulpas no inflamadas, así como en pulpitis dientes con caries profunda, hay un predominio del patrón
temprana (Farnoush 1984, Freitaset al.2007). Esta población de respuesta de tipo Th2, lo que conduce a un aumento en
reducida de mastocitos en la pulpitis puede interferir con el el número de linfocitos B en la pulpa (Jontell et al.1998,
mecanismo de defensa pulpar, porque son células Hahn y Liewehr 2007b).
inmunorreguladoras que liberan aminas vasoactivas, enzimas y Hay un gran número de CD68+macrófagos en pulpitis; de
citocinas, como el factor de necrosis tumoral. a (TNF-a).Por el hecho, son las células inmunitarias más predominantes en el
contrario, la ausencia de mastocitos podría interpretarse como tejido (Jontellet al.1998) y es probable que su número aumente
una forma de modulación de la respuesta inflamatoria de la con la progresión de la caries (Hahn & Liewehr 2007b). La
pulpa, que minimiza los aumentos de presión tisular y previene presencia de estas células en caries profundas puede estar
la necrosis tisular. La desgranulación masiva de mastocitos en asociada con la expresión de ligandos de quimiocinas, como la
las pulpas daría lugar a un aumento significativo en el proteína quimiotáctica de monocitos-1 (CCL2/MCP-1) y la
reclutamiento de células inflamatorias y la vasodilatación y, en proteína inflamatoria de macrófagos 3-alfa (CCL20/MIP-3).a) (
consecuencia, una presión intrapulpar alta y una destrucción Nakanishiet al. 2005, Hahn y Liewehr 2007b). Además, los
extensa del tejido (Walsh 2003). macrófagos desempeñan un papel importante en la
Pequeños números de foxp3+Se encontraron linfocitos T homeostasis tisular y la reparación después de la inflamación,
reguladores en la mayoría de las muestras, un hallazgo muy ya que estimulan la proliferación de fibroblastos mediante la
importante porque este parece ser el primer estudio que liberación del factor básico de crecimiento de fibroblastos
detecta estas células en tejido pulpar inflamado. Curiosamente, (FGFb) (Brodyet al.1992, Hahn & Liewehr 2007b), así como en la
altas cantidades de foxp3+Se encontraron linfocitos T revascularización, porque liberan factor de crecimiento
reguladores en pulpas con infiltrado inflamatorio intenso (G1), endotelial vascular (VEGF) (Polverini 1995, Hahn & Liewehr
lo que puede indicar que afectan el control de la inmunidad 2007b, Mattuellaet al. 2007a,b). FGFb conduce a un aumento en
(Lehner 2008) y pueden prevenir la inflamación exacerbada y la la producción de fibra de colágeno, lo que también se confirmó
necrosis rápida del tejido pulpar. También, en este estudio

porque la deposición de colágeno se encontró en diversos Batista AC, Rodini CO, Lara VS (2005) Cuantificación de mástil
grados en ambos grupos. células en diferentes etapas de la enfermedad periodontal humana.
Se conservaron los vasos sanguíneos de todas las Enfermedades Orales4,249–54.

Bergenholtz G (1981) Respuesta inflamatoria de los dientes
muestras examinadas. La mayor densidad de CD31+vasos
pulpa a la irritación bacteriana.Diario de Endodoncia7,100–4.
sanguíneos se observó en pulpas con un gran número de
Bergenholtz G (1990) Mecanismos patogénicos en pulpa
células inflamatorias (G1), así como un mayor número de
enfermedad.Diario de Endodonciadieciséis,98–101.
macrófagos, células que son responsables de la producción
Brody AR, Bonner JC, Overby LH (1992) Pulmonar intersticial
de VEGF, un factor potente que induce la angiogénesis y la narios macrófagos producen factor de crecimiento derivado de
permeabilidad vascular (Hahn & Liewehr 2007b). El mayor plaquetas que estimula la proliferación de fibroblastos de pulmón de
número de vasos puede contribuir a la respuesta rata in vitro. Revista de biología de leucocitos51,640–8.
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Los recientes avances en inmunología han puesto de
CD4+CD25+células T vírgenes a CD4+CD25+células T reguladoras
manifiesto la enorme complejidad del sistema de regulación
por TGF-binducción del factor de transcripciónFoxp3. El Diario de
inmunitaria. La pulpa dental está equipada para montar una
Medicina Experimental198,1875–86.
respuesta inmune innata y adaptativa a la caries, que involucra
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Mastocitos y subconjuntos de linfocitos en pulpas de dientes
Conclusión humanos sanos y cariados.Cirugía Bucal Medicina Bucal
Patología Bucal Radiología Bucal y Endodoncia103,95–102.
La pulpitis dental irreversible reveló distintas características
Gusman H, Santana RB, Zehnder M (2002) Matrix metallo-
microscópicas con importantes diferencias cuantitativas y
niveles de proteinasa y actividad gelatinolítica en pulpas dentales
cualitativas en la infiltración de células inflamatorias. Se
humanas clínicamente sanas e inflamadas.Revista Europea de
deben realizar más estudios experimentales para
Ciencias Orales110,353–7.
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Agradecimientos Heaney LG, Leggett P, Maxwell P, Bharucha H, Ennis M
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identificar mastocitos en biopsias endobronquiales en sujetos
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normales y asmáticos.Alergia52,836–43.
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Caracterización del infiltrado de células inflamatorias en la

bruno1, JA Silva1, TA Silva2, A.C. Batista3, AHG Aléncar1& C.Estrela1

Resumen ResultadosSe encontraron dos patrones microscópicos de

significación se fijó enun =5%.

1981, Izumiet al.1995, Okjiet al.1997, Nanci 2003,

ªRevista Internacional de Endodoncia 2010 revista internacional de endodoncia,43,1013–1021, 2010 1013

1014 revista internacional de endodoncia,43,1013–1021, 2010 ªRevista Internacional de Endodoncia 2010

tabla 1Anticuerpos y protocolos de reacciones inmunohistoquímicas

anticuerposa(clon) Dilución Recuperación de antígenos Anticuerpo secundario

Antitriptasab(AA1) 1: 2000 Sin exposición Kit-LSABb

aTodos los anticuerpos fueron monoclonales de ratón.

ªRevista Internacional de Endodoncia 2010 revista internacional de endodoncia,43,1013–1021, 2010 1015

5–10 campos microscópicos de alta potencia

(mi) (F) Figura 1Pulpa dental con intenso infiltrado

1016 revista internacional de endodoncia,43,1013–1021, 2010 ªRevista Internacional de Endodoncia 2010

ªRevista Internacional de Endodoncia 2010 revista internacional de endodoncia,43,1013–1021, 2010 1017

figura 3Inmunotinción representativa de

et al.2009), cambios relacionados con la edad (Tranasiet al.

(Bruno estudios previos que informaron poblaciones pequeñas o

1018 revista internacional de endodoncia,43,1013–1021, 2010 ªRevista Internacional de Endodoncia 2010

zorrop3+Los linfocitos T reguladores pueden suprimir

ªRevista Internacional de Endodoncia 2010 revista internacional de endodoncia,43,1013–1021, 2010 1019

Se conservaron los vasos sanguíneos de todas las Enfermedades Orales4,249–54.

1020 revista internacional de endodoncia,43,1013–1021, 2010 ªRevista Internacional de Endodoncia 2010

ªRevista Internacional de Endodoncia 2010 revista internacional de endodoncia,43,1013–1021, 2010 1021

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