Identificación de marcadores de

metástasis de cáncer colorrectal

mediante una matriz de
anticuerpos de citocina
relacionada con la angiogénesis
OBJETIVO:
 Investigar el perfil de expresión de
proteínas relacionadas con la angiogénesis
que caracteriza el cáncer colorrectal
metastásico (CCRm) con el objetivo de
identificar marcadores pronósticos.
MÉTODOS:
 La expresión de 44 factores secretados
por angiogénesis se midió mediante
una nueva metodología de matriz de
anticuerpos de citocina.
MÉTODOS:
 Elestudio evaluó el factor de crecimiento
endotelial vascular (VEGF) y sus niveles de
proteína del receptor del factor de
crecimiento endotelial vascular soluble
(sVEGFR) -1 mediante un inmunoensayo
enzimático (EIA) en un panel de 16 líneas
celulares de CRC.
 MÉTODOS:
 Lasisoformas de ARNm VEGF y VEGF-A se
cuantificaron mediante reacción cuantitativa
en cadena de la polimerasa con
transcripción inversa (Q-RT-PCR) y la
expresión del receptor del factor de
crecimiento endotelial vascular (VEGFR) -2
se analizó mediante citometría de flujo.
 Tabla 1
Origen de las
líneas
celulares de
cáncer
colorrectal
Figura 1. Perfil de expresión
de factores relacionados con la
angiogénesis en líneas
celulares de cáncer colorrectal
determinado por matriz de
anticuerpos de citocina
K-medias ( n= 4) la agrupación agrupaba las proteínas relacionadas
con la angiogénesis según el nivel de expresión
 Agrupamiento
jerárquico no
supervisado de los
factores con una
expresión
significativamente
diferente en líneas
celulares de
cáncer colorrectal
(CCR) primario y
metastásico
 Imágenes de
los subarreglos I
y II de las líneas
celulares de
CRC de Caco2
primario y T84
metastásico
después de la
detección y
procesamiento.
Figura 2. Expresión del
factor de crecimiento
endotelial vascular en líneas
celulares de cáncer
colorrectal.
 Se encuentra una
correlación positiva
estadísticamente
significativa entre la
proteína del factor
de crecimiento
endotelial vascular
(VEGF)
determinada por
matriz de
anticuerpos y por
inmunoensayo
enzimático (EIA),
validando el método
de matriz
Las líneas celulares de cáncer colorrectal (CRC) exhiben variabilidad en la
expresión de proteína (B) y ARNm (C) de VEGF según su origen primario o
metastásico (no estadísticamente significativo)
 Se encuentra una
correlación positiva
estadísticamente
significativa entre la
proteína VEGF por
EIA y el ARNm de
VEGF, lo que sugiere
el papel principal de
los mecanismos
transcripcionales en
la regulación de la
expresión de VEGF.
NS: No significativo.
Figura 3. Regulación
de la expresión del
factor de crecimiento
endotelial vascular.
Modulación de la expresión del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF)
(ARNm y proteína) en respuesta a hipoxia severa en líneas celulares de cáncer
colorrectal (CRC) primario y metastásico
Expresión de las isoformas 121, 189 y 165 de VEGF por células CRC en
normoxia.
 Figura 4. Expresión de
receptores del factor de
crecimiento endotelial
vascular en líneas
celulares de cáncer
colorrectal.
La expresión del receptor
del factor de crecimiento
endotelial vascular
soluble (sVEGFR) -1
medida por EIA no es
significativamente
diferente entre las líneas
celulares de cáncer
colorrectal (CRC)
primario y metastásico
 La citometría de flujo de la
expresión superficial del
receptor del factor de
crecimiento endotelial
vascular (VEGFR) -2 en las
células endoteliales de la
vena umbilical humana
(HUVEC) y las líneas
celulares de CCR primarias
HCT116, Caco2 y RKO en
condiciones normóxicas
revela una falta general de
VEGFR-2 expresión en la
superficie de las células CRC
en comparación con HUVEC.
NS: No significativo.