GUÍA DE ESCENARIO DE PRÁCTICA Código:

AMBIENTES PRÁCTICOS DE Versión: 1

APRENDIZAJE Fecha: noviembre 2018

GUIA PARA EL ESTUDIANTE

PRACTICA:

CAMPUS: Villavicencio
PRACTICA: inmunodiagnóstico y hemoclasificación
ID CURSO:
CURSO: Procesos Inmunológicos
PROGRAMA: Medicina - Transversal
PROFESOR: Norma Cristina Pavas Escobar
ESPACIO - AMBIENTE Laboratorios múltiples
PRÁCTICO DE
APRENDIZAJE:
SUBESPACIO - AMBIENTE Laboratorio multifuncional
PRÁCTICO DE
APRENDIZAJE:
FECHA:
TIEMPO ESTIMADO: 2 Horas

TEMA DE LA PRACTICA
(Descripción precisa de la práctica que se va a trabajar con esta Guía)

PROBLEMA QUE Desarticulación de las ciencias básicas con la clínica

RESUELVE: Diagnósticos errados
UNIDAD DE Analizar los procesos inmunológicos para explicar los
COMPETENCIA: mecanismos de protección de los organismos vivos
según los principios básicos de la inmunología.
ELEMENTO DE Aplicar los fundamentos teóricos sobre las interacciones
COMPETENCIA A microbiológicas en prácticas de Laboratorio
DESARROLLAR:
INDICADOR: Define las características de las células sanguíneas y
evalúa sus diferencias
EVIDENCIA: Informe de laboratorio
DESCRIPCION DE LA PROCEDIMIENTO:
PRÁCTICA Método en lámina
Aquí elaboramos la - Marcar una lámina portaobjeto como A, B y D.
descripción detallada del - Agregar una gota de eritrocitos del paciente a
procedimiento o cada antisuero.
destreza a evaluar en el
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AMBIENTES PRÁCTICOS DE Versión: 1
APRENDIZAJE Fecha: noviembre 2018

escenario, desde el inicio - Adicionar una gota de anti A, anti B y anti D en su

hasta el final. lugar correspondiente.
- Mezclar cada preparación con un palillo de
madera.
- Rotar manualmente cada lamina con cuidado de
que no se mezclen.
- Observar aglutinación y registrar los resultados:

POSITIVO: La aglutinación fuerte de los

glóbulos rojos en presencia de cualquier
anticuerpo ABO y Rh. Las reacciones
positivas muestran 3+ de aglutinación.
NEGATIVO: La presencia de una suspensión
uniforme de glóbulos rojos.
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AMBIENTES PRÁCTICOS DE Versión: 1
APRENDIZAJE Fecha: noviembre 2018

INSTRUCCTIVO PARA EL PROFESOR.

Recomendaciones generales para la estructuración de la práctica.
A continuación, definiremos algunas características básicas con las que debe contar cada
caso, lo que facilitara no solo la recreación de las situaciones a evaluar y los escenarios, sino
también los criterios de selección a los cuales se someterán, para ser parte de nuestra
Biblioteca de prácticas.
Así entonces cada uno de estos en su elaboración deberá cumplir con los siguientes aspectos:

a. REAL: que sea una situación real y autentica estandarizada internacionalmente.

b. PREVALENTE: que sea una situación de desempeño frecuente para el profesional.
c. PERTINENCIA ACADEMICA: que su desarrollo se enfoque hacia las competencias del
programa de curso.
d. PERTINENCIA COMPETENCIAL: que su desarrollo evalué situaciones de desempeño real.
e. CALIDAD: que cada caso en su resolución se apoye de evidencia científica, permitiendo
su validez y globalidad.
f. ESTRUCTURADO: que este ajustado al instructivo que se adjunta, cumpliendo con cada
uno de los puntos, lo que facilitara su articulación con las Guías de Estudio y la aplicación
de métodos de evaluación.
g. SUFICIENCIA: articulación con indicadores y evidencias según el modelo.
h. FACTIBILIDAD: que sus componentes se puedan recrear, de acuerdo con los recursos y
personal de los Ambientes Prácticos de Aprendizaje.
i. EVALUABLE: que permita la definición de indicadores y evidencias.
 PRÁCTICA DE LABORATORIO No.2
PROCESOS INMUNOLOGICOS
FACULTAD DE MEDICINA

DETERMINACION DE GRUPO SANGUINEO ABO Y RH

1.1. Fundamento teórico

Los grupos sanguíneos fueron descubiertos por Karl Landsteiner en el año 1901, quien los
agrupó de acuerdo a la presencia o no de aglutinógenos en la membrana plasmática de
los glóbulos rojos. En los humanos existen los aglutinógenos A y B. Por otra parte, en el
plasma sanguíneo se encuentran las aglutininas anti A y anti B.

La aglutinación es una reacción que ocurre cuando los anticuerpos presentes en el

plasma sanguíneo se unen a los antígenos transportados o ubicados en la membrana
plasmática de los glóbulos rojos, como resultado de la reacción se forman grumos o
apilamientos de células sanguíneas.

En la especie humana, los grupos sanguíneos son cuatro, y se denominan con las letras
A, B, O y AB. La incompatibilidad de grupo sanguíneo durante una transfusión o un
trasplante origina un proceso hemolítico o el rechazo del órgano trasplantado.

El antígeno Rh está en la membrana plasmática de los glóbulos rojos. Fue descubierto en

1940 a partir de los eritrocitos del mono Macacus rhesus. El 85% de las personas poseen
el factor Rh, por lo que se clasifican en este caso como Rh positivo (Rh+). El 15% restante
corresponde a las personas Rh negativas (Rh-) por carecer de dicho factor. La
determinación del grupo sanguíneo del sistema Rh es especialmente importante durante
el embarazo. Si una mujer con factor Rh- está gestando un feto con factor Rh+, se
producirá una reacción con producción de aglutininas maternas anti Rh y consecuente
destrucción de glóbulos rojos del feto. Teniendo en cuenta que la formación de
anticuerpos demanda un tiempo relativamente largo, es posible que el feto no sufra
consecuencias o bien nazca de manera prematura. En estos casos, la madre quedó
sensibilizada contra los aglutinógenos Rh+. Si con el tiempo sucede otro embarazo de un
feto factor Rh+, los anticuerpos antes generados atraviesan la placenta y eliminan los
eritrocitos Rh+ fetales, ocasionando diversos trastornos que van desde una leve ictericia
por aumento de bilirrubina en sangre hasta un cuadro grave de anemia por destrucción de
glóbulos rojos (hemólisis) que puede ocasionar un aborto espontáneo. Esta enfermedad
se conoce como eritroblastosis fetal o enfermedad hemolítica del recién nacido.

1.2. Procedimiento experimental

 Esta prueba se fundamenta en la propiedad de los anticuerpos de unirse a los

antígenos expresados en la superficie de los glóbulos rojos para los cuales son
específicos y crear complejos inmunes que son observables
macroscópicamente como partículas grandes aglutinadas. Se realizará prueba
Directa (en sangre total o concentrado de hematíes) y prueba inversa (en
suero)
 DESARROLLO
Materiales

 Anti-sueros: Anti–A, Anti–B y Anti–D

 Placas de vidrio
 Palillos
 Micropipeta de 2-200uL
 Puntas amarillas para Micropipeta
 Suero de pacientes y glóbulos rojos al 10%

Procedimiento

Hemoclasificación directa:

Método en lámina
- Marcar una lámina portaobjeto como A, B y D.
- Agregar una gota de eritrocitos del paciente a cada antisuero.
- Adicionar una gota de anti A, anti B y anti D en su lugar correspondiente.
- Mezclar cada preparación con un palillo de madera.
- Rotar manualmente cada lamina con cuidado de que no se mezclen.
- Observar aglutinación y registrar los resultados:

POSITIVO: La aglutinación fuerte de los glóbulos rojos en presencia de

cualquier anticuerpo ABO y Rh. Las reacciones positivas muestran 3+ de
aglutinación.
NEGATIVO: La presencia de una suspensión uniforme de glóbulos rojos.

1 gota de sangre 1 gota de sangre 1 gota de sangre

1gota de antisuero anti A 1gota de antisuero anti B 1 gota de antisuero anti D

Método en tubo
- Separar el plasma de los eritrocitos de la muestra desconocida.
- Lavar los glóbulos rojos del paciente 3 veces consecutivos en solución salina y
preparar una suspensión final al 2% en dicha solución.
- Rotular cuatro tubos con Anti A, Anti B y Anti D.
- Colocar una gota de suero Anti A, Anti B y Anti D en el tubo respectivo.
- Agregar una gota de la suspensión al 2 % de eritrocitos a cada uno de los tubos.
- Mezclar cada tubo y centrifugar 15 – 30 segundos a 3400 rpm o 1 minuto a 1000
rpm.
- Resuspender suavemente los botones celulares y observar aglutinación:
(4+) Botón completo, fácilmente desprendible, fondo limpio
(3+) Botón disperso, 2 o 3 partes, fondo limpio
 (2+) No hay botón, pequeños grumos
(1+) Pequeños grumos
(0) No hay señales de grumos (aglutinación)

Hemoclasificación inversa:

Método en tubo
- Marcar tres tubos como A, B y O.
- Adicionar dos gotas de suero del paciente a cada tubo.
- Agregar una gota de suspensión de eritrocitos del grupo A al tubo rotulado como
A, una gota de eritrocitos del grupo B al tubo rotulado como B y una gota de
eritrocitos del grupo O al tubo rotulado como O.
- Incubar de 5 – 15 minutos a temperatura ambiente
- Centrifugar por 15 – 30 segundos a 3400 rpm o 1 minuto a 1000 rpm.
- Resuspender los botones celulares y observar aglutinación.
- Interpretar los resultados.

Cuestionario

 ¿Qué reacción se produjo al mezclar sangre vs reactivos utilizados? ¿Cuál

es el fundamento inmunológico de esta reacción?
 Qué tipo de Inmunoglobulinas se presentan en los grupos sanguíneos y cual
en el factor Rh y que implicaciones clínicas derivan de estos tipos de
inmunoglobulinas.
 Caso: ¿RN presenta una reacción positiva al reactivo anti-A y Anti-AB qué
grupo sanguíneo ABO presenta? Y determine qué grupo sanguíneo tiene el
padre y la madre del RN. Fundamente su respuesta.
 ¿María acude a realizarse un grupo inverso en el laboratorio fue tipificada
como AB, de acuerdo a su conocimiento que grupo directo debería poseer?,
Explique su respuesta.

4. Referencias consultadas:

 Alberto Gómez Gutiérrez, María Consuelo Casas Gómez Ángel. Interpretación

Clínica del Laboratorio. Ed. Panamericana 8 ed. 2014