UNIVERSIDAD PRIVADA FRANZ TAMAYO

AREA DE SALUD: CARRERA DE BIOQUIMICA Y FARMACIA

GV.EA.D.15

G
HITO 3
DOCENTE: Silvia Vargas Cadena

ASIGNATURA: Inmunología II

CARRERA: BIOQUIMICA Y FARMACIA

Nombre y Apellidos: Mishiel Nicole Gomez Centellas C.I.: 9939576

Sede: La Paz Fecha: 08-05-2022

Inicial Paterno

GUIA DE PRACTICAS INMUNOLOGIA

PRACTICA 4 GRUPO SANGUINEO Y PRUEBA DE
COMPATIBILIDAD CRUZADA MAYOR

1.- FUNDAMENTO Y UTILIDAD

Determinación de Grupo Sanguíneo .- Los glóbulos rojos del paciente se ponen

en contacto con el reactivo Anti A, Anti B, anti D, si existen en la superficie de los
eritrocitos los antígenos correspondientes se producirá una aglutinación visible
macroscópicamente.

Prueba de compatibilidad Cruzada Mayor.- de grupos es de utilidad en la

práctica transfusional.

MUESTRAS

- Glóbulos rojos o sangre entera

- Suero de grupo A Rh Positivo

2.- MATERIALES Y EQUIPOS

MATERIAL

 Micropipeta graduable de 50 ul.

 Tips
 Tubos de ensayo
 Gradilla
  Laminas portaobjetos.
 Cubre objetos
 Aplicadores de plástico
 Aguja afilada o una lanceta.
 Marcador indeleble

EQUIPO

 Centrifugadora.
 Microscopio

REACTIVOS

- Anti A, Anti B, Anti AB, Anti D, Anti D (–)

3.- PROCEDIMIENTO

TOMA DE MUESTRA
Con jeringa
Primero realizamos la toma de muestra de sangre siguiendo los respectivos
pasos:
1. Identificar al paciente y explicarle el procedimiento que se va a realizar.
Pedirle que siente o se recueste
2. Lavarse las manos de acuerdo al procedimiento establecido
3. colocarse los guantes desechables
4. preparar la jeringa (la envoltura desechar a los desechos comunes)
5. prepara los tubos (identificando el nombre completo y las pruebas a
realizarse)
6. La inspección debe realizarse con un orden predeterminado Las venas en
general son fácilmente palpables acompañadas de un examen visual.
7. Aplicar el torniquete 4 centímetros por encima de la flexura antero superior
del codo
8. Pedirle al paciente que abra y cierre su puño.
 9. Desinfectar el área de la punción alcohol al 790% (técnica de la parte
interna hacia la parte externa)
10. Con el dedo índice de la mano izquierda fijar la vena a puncionar
11. Extracción de muestra de sangre en cuanto la sangre empieza a fluir dentro
de la jeringa se debe retirar el torniquete y solicitar al paciente que suelte el
puño.
12. Traccionar el embolo llenando la jeringa con el volumen requerido
13. Mientras se retira la aguja se aplica el algodón seco haciendo presión sobre
la zona de punción
14. Con la ayuda de una pinza retirar la aguja para desechar al contenedor de
corto punzante.
15. Cargar Al tubo, y determinar el volumen requerido. En este caso cargamos
a un tubo sin anticoagulante, y otra con anticoagulante para el suero.
Aguja afilada o una lanceta.
 El examen se realiza de la siguiente manera:
 La zona se limpia con un antiséptico.
 Se punza la piel del dedo, el talón u otra zona con una aguja afilada o una
lanceta. La sangre se recogerá en el portaobjetos colocando las 3 gotitas
respectivas.

DETERMINACION DE GRUPO SANGUINEO

1. Llevar los reactivos a temperatura ambiente entre 15 a 30 minutos.
2. Primero marcar con nuestro marcador indeleble los reactivos en un porta
objetos Anti A, Anti B, Anti D, y en otro portaobjetos Anti D (–) y Anti AB
3. Mezclar el reactivo antes de usar para resuspender las partículas inertes.
4. En diferentes círculos del porta objetos colocar 3 gotas de la muestra.
5. Añadir una gota de cada reactivo A, B, D a cada gota de muestra.
6. En otro porta objetos ponemos dos gotas.
7. Añadimos Anti D (–) y Anti AB a esas dos gotas.
 8. Mezclar en un rotador automático o manualmente durante 2 minutos.
9. Colocar un cubre objetos
10. Observar la presencia de aglutinación visualmente o en microscopio con
objetivo de 10 X.

En este caso al colocar las gotas al portaobjetos lo realizamos usando la jeringa y

en otro utilizando las agujas de toma de muestra del dedo donde directamente lo
colocamos en el porta objetos.

Tubo

Se pone los glóbulos rojos lavados en los tubos de ensayo añadiendo una gota de
cada reactivo: Anti A, Anti B, Anti AB, Anti D, Anti D (–)

PRUEBA DE COMPATIBILIDAD (PRUEBA CRUZADA MAYOR)

1. En un tubo de hemólisis añadimos 1 gota de suspensión de hematíes del

donante
2. Mezclamos suavemente y dejamos a temperatura ambiente durante 2-3
minutos. (Hemos realizado 2 para enfrentar en la centrífuga).
3. Centrifugamos a 2.500 r.p.m durante 1 minuto.
4. Leemos el resultado obtenido en medio salino.

LECTURA E INTERPRETACION

En este caso no había compatibilidad entre el receptor y el donante.

RECOMENDACIONES

 Conservar los reactivos de 2 – 8 ºC No congelar.

  Reacciones débiles se pueden observar en: Neonatos los antígenos A y B
no se encuentran totalmente expresados en el recién nacido, sobre todo en
los prematuros. Leucemias, pacientes recientemente transfundidos.
 Reacciones falsas positivas por presencia de drogas, colorantes,
compuestos químicos.
 Si saliera un grupo dudoso se recomienda lavar los glóbulos rojos con
suero fisiológico hasta obtener un sobrenadante límpido y extraer una gota
para tipificar el grupo.

4. RESULTADOS Y OBSERVACIONES
El receptor y el donante no tenían compatibilidad.

5. CUESTIONARIO
1. ¿Cuál es el fundamento de la prueba de determinación de grupo
sanguíneo?

R.- En la superficie de los hematíes, existían dos tipos de proteínas marcadoras

o antígenos que denominó A y B. Observó, además, que el plasma contiene
también dos tipos de anticuerpos que reaccionan con las proteínas de los
glóbulos rojos y que llamó anticuerpos Anti-A y Anti-B. De esta manera
estableció cuatro tipos de grupos sanguíneos:

Grupo A: Aquel grupo de sangre cuyos glóbulos rojos tienen el antígeno A y en

las que su plasma encontramos el anticuerpo Anti-B.
Grupo B: Sus glóbulos rojos tienen el antígeno B y su plasma los anticuerpos
Anti-A. 
Grupo AB: Los glóbulos rojos de este grupo tienen los dos tipos de antígenos: A y
B; pero el plasma no tiene ningún anticuerpo.
Grupo 0: En este grupo sanguíneo los glóbulos rojos no tienen antígenos, pero el
plasma tiene anticuerpos Anti-A y Anti-B. Partiendo de esta caracterización
estableció la compatibilidad entre los distintos grupos según las reacciones que se
producían, ya que los anticuerpos que posee cada grupo sanguíneo reacciona
cuando se introducen en el torrente sanguíneo hematíes con antígenos “extraños”:
Anti-A contra antígenos A y Anti-B contra antígenos B.La siguiente tabla de
compatibilidades entre eritrocitos:

2. Representa mediante un dibujo la reacción especifica de esta determinación.

R.-

3. Cuál es el fundamento de la prueba de compatibilidad de grupos, la

que desarrollamos en la práctica (prueba cruzada mayor)
R.- Prueba cruzada mayor completa (PCM): Esta Pcom consiste en
investigar en el suero del receptor los posibles Ac frente a Ag tanto AB0 como
el resto de Ag eritrocitarios de una unidad de CH. Para ello, se observa la
aglutinación eritrocitaria en la mezcla in vitro de suero paciente y hematíes del
donante. La mezcla se estudia en
diferentes medios físico-químicos (incluida la fase antiglobulina) que,
modificando las propiedades de suero y hematíes, favorecen la presencia de
aglutinación. Cuando no hay aglutinación en ninguno de los medios
estudiados, la PCM es negativa para esa unidad específica, hay compatibilidad
entre receptor y donante y la unidad se puede administrar.
 Prueba cruzada mayor en medio salino (PC en salino)
Es una Pcom en medio salino que en 2-3 minutos determina
la presencia de Ac, generalmente IgM, en el suero del paciente frente a los
hematíes del CH. Comprueba la compatibilidad AB0, sin duda la más
importante en transfusión.
4. Menciona tres aplicaciones o utilidad de las pruebas desarrolladas.
R. - Trasplantes de órganos así verificando el tipo de sangre y la
compatibilidad.
- Sirve para confirmar si existe compatibilidad ABO entre el receptor y el
donador.
- Detecta anticuerpos en el suero del paciente que no se hayan demostrado en la
prueba de tamizaje

6. CONCLUSIONES.
Las practicas que realizamos grupo sanguíneo y prueba de compatibilidad cruzada
mayor son pruebas muy importantes que nos ayudan a Nos ayudan a prevenir la
transfusión de sangre incompatible, y proveen al paciente de máxima seguridad y
beneficio. En la practica realizada logramos obtener el resultado eficiente, no hubo
compatibilidad entre el receptor y donante, obtuvimos experiencia en las diferentes
técnicas, usando los reactivos.

7. ANEXOS
BIBLIOGRAFÍA.
1. Inmunología Básica: Rojas ,M (2012), Colombia Inmunología.
2. Deliam cuaderno de practicas. Înternet]. Práctica: Prueba cruzada mayor.
[Recuperado 8 mayo de 2022]. Disponible en:
http://deliamm96cuadernopracticashema14.blogspot.com/2015/05/practica-
prueba-cruzada-mayor.html?m=1
3. Mediagraphic. [Internet]. Importancia de las pruebas cruzadas y de la
búsqueda de anticuerpos [Recuperado 8 mayo de 2022]. Disponible en:
https://www.medigraphic.com/pdfs/imss/im-2006/ims062j.pdf
4. Sehh. Compatibilidad de transfusión [Recuperado 8 mayo de 2022].
Disponible en:
https://www.sehh.es/archivos/informacion_fehh_fondo_capitulo04.pdf