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CLINICO
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MEDICI
ALUMNO(A)MURGA FLOREAN, MILAGRITOS

A NA MARICIELOSEMESTRE2021-
2CICLOVSECCIÓNB4GRUPOP2DOCENTEMICHELL
MAGALLANES MALDONADO

S ALUMNO(A)SEMESTRECICLOSECCIÓNGRUPODOCENTE
ALUMNO(A)SEMESTRECICLOSECCIÓNGRUPODOCENTE
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I. DATOS GENERALES
1.1 Unidad Académica : II
1.2 Semestre Académico: 2021-II
1.3 Ciclo de estudios :V
1.4 Experiencia curricular: LABORATORIO CLINICO
1.5. Docente(s) :

II. SUMILLA

La experiencia curricular de FUNDAMENTOS DE DIAGNOSTICO I, forma parte del área de

estudios específicos, es de naturaleza teórica – práctica, de carácter obligatorio y está
orientado a que el estudiante identifique y analice la correlación clínica patológica de los
pacientes que están a su cargo, utilizando para ello conocimientos previos y evaluación de
casos clínicos planteados para establecer modos de trabajo uniforme.

III. COMPETENCIA ESPECÍFICA

Explica el diagnóstico presuntivo o definitivo del paciente asignado para elaborar el plan de
trabajo que incluya el tratamiento, pronóstico y prevención de los problemas de salud de
mayor frecuencia del individuo; mediante la elaboración de la historia clínica, considerando
fundamentos etiopatogénicos y fisiopatológicos, demostrando un buen manejo clínico y
trato humanizado.
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PRÁCTICA N° 08

LABORATORIO DE BIOLOGÍA CELULAR FECHA:

TEMÁTICA: GRUPO SANGUINEO
SESION: 01 TIEMPO DE DESARROLLO DE LA GUÍA: 03 horas
ESTUDIANTE:
CAPACIDAD:
Explica EL METODO PARA REALIZAR la prueba de grupo sanguíneo y pruebas cruzadas o de
compatibilidad.

I. INTRODUCCIÓN
SIGNIFICACION CLINICA A comienzo del siglo pasado, Landsteiner descubrió que los
individuos podían ser agrupados en A, B, AB u O de acuerdo a la presencia (grupos A, B, o AB)
o ausencia (grupo O) de antígenos fuertemente inmunogénicos en la superficie de los
glóbulos rojos. También demostró la existencia de anticuerpos (aglutininas) dirigidos contra
los antígenos A y B y que el suero de un individuo no contiene anticuerpos para el antígeno
presente en sus propios glóbulos rojos, pero sí contra los que no posee. Actualmente se han
identificado subgrupos de los grupos A y B. Todas estas observaciones revelaron la
importancia de la compatibilidad ABO en la práctica transfusional.
La clasificación del grupo sanguíneo está, determinada por la presencia o ausencia de los
aglutinógenos en el eritrocito y las aglutininas en el suero. Para la identificación del grupo
sanguíneo ABO se deben hacer dos investigaciones consecutivas: la primera se llama tipado
globular y es la determinación de los aglutinógenos eritrocíticos con antisueros o aglutininas
conocidas, la segunda se llama tipado sérico o contratipado y es la identificación de las
aglutininas utilizando glóbulos rojos con antisueros conocidos, los sueros patrones deben ser
de alto título, estos sueros pueden ser preparados en el laboratorio o en su defecto, se
consiguen en las casas comerciales de productos biológicos. La investigación de los
aglutinógenos eritrociticos se deben realizarse por el método de tubo de ensayo.
II. CONOCIMIENTOS PREVIOS:
- CONOCIMIENTOS SOBRE LA EXISTENCIA DE GRUPOS SANGUINEOS.
- MANEJO DE UNIDADES DE SANGRE Y HEMOCOMPONENTES

III. MATERIAL
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Materiales:
- Tubos al vacío para extracción de sangre
- Algodón
- Alcohol
- Ligadura
- Sistema de extracción al vacío
- Agujas descartable No 20 x 1 ½
- Suero Antiglobulina Humana (ANTI – Ig G – C 3 d)
- Sueros hemo clasificadores Anti-A, Anti B. Anti-AB
- Proyector multimedia
- Diapositivas
- Guía de prácticas
IV. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA

4.1 Procedimiento:
- Revisa las diferentes técnicas para realizar las pruebas de clasificación de grupos
sanguíneos

https://www.youtube.com/watch?v=n9lg6IQ4aGg
https://www.youtube.com/watch?v=D_Oma2AoJjM
https://www.youtube.com/watch?v=H2ZlYTP9vkk
https://www.youtube.com/watch?v=D_Oma2AoJjM

TIPIFICACION DE GRUPO SANGUINEO

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FUNDAMENTOS DEL METODO La determinación de grupos sanguíneos del sistema ABO se efectúa
enfrentando los glóbulos rojos del paciente con anticuerpos monoclonales Anti-A, Anti-B o Anti-
AB. La aglutinación o no de los hematíes ensayados frente a cada uno de los reactivos indica la
presencia o ausencia de los correspondientes antígenos.

REACTIVOS PROVISTOS Anti-A, Anti-B o Anti-AB monoclonal: reactivos preparados a partir de

anticuerpos monoclonales de clase IgM secretados por líneas celulares de hibridoma de ratón en
una solución tamponada conteniendo < 1 g/l de azida sódica como conservante. Los clones
involucrados y la coloración de cada producto se detallan en la siguiente tabla: Nombre del
Línea(s) Celular(es) Color Producto Anti-A BIRMA-1 Azul Anti-B LB-2 Amarillo Anti-AB BIRMA-1/ES-
4/ES-15 Incoloro Estos antisueros se caracterizan por su alta potencia, avidez y especificidad. Al no
ser de origen humano, no existen riesgos de infección por HIV, HBV o HCV.
INSTRUCCIONES PARA SU USO Los reactivos se proveen listos para usar. No deben diluirse.

MUESTRA Glóbulos rojos o sangre entera

a) Recolección: la sangre debe ser obtenida asépticamente, con o sin anticoagulante. Puede
analizarse sangre obtenida por punción digital para la técnica en placa. Para evitar la coagulación
de la sangre al utilizar esta técnica, se la debe mezclar rápidamente con el reactivo a ensayar. Para
los ensayos con sangre de cordón, los glóbulos rojos deberán lavarse previamente con solución
fisiológica.
b) Aditivos: pueden emplearse como anticoagulantes: EDTA, heparina, ACD (ácido cítrico, citrato,
dextrosa), CPD (citrato, fosfato, dextrosa) o CPDA-1 (citrato, fosfato, dextrosa, adenina). Puede
utilizarse Anticoagulante W de Wiener lab.
c) Sustancias interferentes conocidas: las muestras que presentan hemólisis o contaminación
microbiana, no deben ser analizadas.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento una vez obtenidas, las muestras deben ser
analizadas lo antes posible. Si el análisis no se realiza inmediatamente, conservar las mismas entre
2-10oC. Si se utilizó heparina o EDTA, la tipificación debe llevarse a cabo dentro de las 48 horas de
extraídas.

MATERIAL REQUERIDO
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- Centrífuga
- Tubos de hemólisis
- Placas
- Palillos mezcladores descartables
PRECAUCIONES Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro" y está estrictamente reservado
para uso profesional por personal calificado con comprobada competencia en
inmunohematología.
PROCEDIMIENTO Estos reactivos han sido estandarizados según los procedimientos detallados a
continuación; su desempeño en el uso mediante otras técnicas no puede ser garantizado. La
suspensión de glóbulos rojos a ensayar debe ser preparada con solución fisiológica, PBS o LISS.
I- TECNICA EN PLACA Preparar una suspensión de glóbulos rojos al 10%. Como
alternativa puede emplearse una suspensión al 35-45% en plasma del mismo
paciente o sangre entera.
1) Colocar en una placa limpia y rotulada, una gota de Reactivo Anti-A, Anti-B o
Anti-AB monoclonal y agregar al lado 1 gota de suspensión de glóbulos rojos.
El gotero provisto dispensa un volumen de 50 ± 5 ul. Es importante que se
mantenga la relación reactiva: células en todos los sistemas de ensayo.
2) Mezclar el Reactivo y los glóbulos con un palillo descartable cubriendo un área
circular de 2 cm de diámetro y balancear la placa continuamente durante 2
minutos.
Observar aglutinación visible macroscópicamente hasta los 2 minutos. La
observación puede facilitarse si se emplea una fuente de luz difusa. No debe
emplearse microscopio. La prueba debe ser interpretada dentro de los 2 minutos
  Anti A Anti-B Anti AB

Grupo A Positivo Negativo Positivo

Grupo B Negativo Positivo Positivo

  Grupo AB Positivo Positivo Positivo

Grupo O Negativo Negativo Negativo

para evitar que el reactivo se seque por evaporación. Cuando se observa aglutinación débil debe
repetirse la prueba utilizando la técnica en tubo (por centrifugación). Pueden agregarse 2
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volúmenes de reactivo a 1 volumen de muestra para resaltar la aglutinación, sin riesgos de falsos
positivos.
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS Técnica en placa Reacción positiva: los hematíes aglutinan
en segundos y permanecen aglutinados al balancear la placa. Indica la presencia del antígeno
eritrocitario correspondiente. Reacción negativa: no se observa aglutinación a los 2 minutos,
indicando ausencia del antígeno correspondiente.

4 cruces; la aglutinación se presentará como un botón sólido con fondo claro y grumos gruesos.
3 cruces; la aglutinación serán varios grumos grandes con el fondo claro o rosado
2 cruces pocos grumos y muy pequeños, una suspensión uniforme
1 cruz pocos grumos, muy pequeños, el fondo muy rosado.
Negativo: Una suspensión uniforme de color rojo.

TIPIFICACIÓN DEL SISTEMA RHO.

Objetivo: Al término de la práctica el alumno clasificará además del sistema sanguíneo ABO el
factor Rho.
Generalidades: Además de los Antígenos del sistema ABO, existe otro sistema de mayor
importancia que es el factor Rho.
Landsteiner y Wiener descubrieron en 1990 la existencia de un aglutinógeno en los glóbulos
rojos humanos que llamaron factor Rho, a fin de recordar con las dos iniciales del mono rhesus. El
mecanismo que permitió ponerlo en evidencia fue el inyectar glóbulos rojos lavados de dicho
animal (macacus rhesus) en conejos, obteniéndose de este modo un suero capaz de aglutinar un
85% de los hematíes humanos.
El suero de conejo preparado en la forma indicada contenía la aglutinina correspondiente al
factor Rho y se denominó Anti Rho, las personas cuyos glóbulos rojos eran aglutinados por el
suero Anti Rho se denominaron Rh positivos, y los hematíes no eran aglutinados por el suero Anti
Rho se denominaron Rh negativos, se comprobó que el 85% de las personas de raza blanca son Rh
positivos y que el 15% restantes son Rh negativos, posteriormente se descubrió que el factor Rh
no era el único, sino que se trataba de un factor muy complejo por tanto existen tres factores
principales:
La presencia del Anticuerpo inmune se comprobó al transfundirle sangre del esposo,
compatible con el sistema ABO, con la que reaccionó violentamente, esto hizo suponer que la
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madre había elaborado Anticuerpos contra un Antígeno poseído por el feto, que a su vez había
heredado del padre, esto hizo evidenciar la presencia de otro tipo de Anticuerpo que no tenía
nada que ver con los del sistema ABO y así descubrió el factor Rho-

Fundamento: El factor Rho. es un antígeno que se encuentra en la membrana del eritrocito el cual
reacciona con su Anticuerpo correspondiente que se encuentra en el suero anti-D que contiene la
aglutinina correspondiente al factor Rho, llamado también anti Rho, anticuerpos que se detectan,
son del tipo de la IgG que poseen la capacidad de cruzar la barrera placentaria por su bajo peso
molecular, iniciando por tanto la enfermedad. La presencia del factor Rho se pone de manifiesto
mediante una reacción antígeno-anticuerpo y se observa por aglutinación y hemólisis.
4.2 Resultados: análisis e interpretación
GRAFICAR LOS DIFERENTES PASOS QUE SE ESTABLECEN PARA REALIZAR UNA PRUEBA DE
GRUPO SANGUINEO.

Para la
 Primero se desinfecta el dedo con alcohol y
algodón

 Luego se procede a hacer un pinchazo y se coloca

3 gotas de sangre en las placas previamente
marcadas con las letras A, B y RH

 Una vez se tenga las muestras de sangre se coloca

los hemo clasificadores. Primero se coloca el antia-
A, luego el anti-B, por último, el anti-D
(corresponde al RH)

 Se mezcla bien cada muestra con diferentes

aplicadores y esperar aproximadamente 3 minutos
para realizar la lectura
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Para la lectura correcta de una muestra se observa si existe aglutinación con el hemo clasificador
colocado en dicha muestra

V.
PRECAUCIONES Y BIOSEGURIDAD
1) Ingresar al laboratorio con su guardapolvo. Esta ropa protectora deberá sacarse
inmediatamente antes de abandonar el laboratorio.
2) Es obligatorio la utilización de guardapolvo que le cubra brazos, piernas y torso; deben portar
además guantes de látex y mascarilla.
3) Está prohibido el uso de sandalias, pantalones y faldas cortos, gorras, bufandas y otros
accesorios en el laboratorio. La persona inapropiadamente vestida para trabajar en el
laboratorio no podrá ingresar.
4) Toda persona con cabello largo, deberá sujetarlo y recogerlo.

VI. CONCLUSIONES
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MENCIONAR LAS CONCLUSIONES QUE PODRIA ESTABLECER DESPUES DE LA PRACTICA REALIZADA

Los grupos
sanguíneos son
sumamente
importantes, sirve
para determinar el
tipo
de sangre que se
puede dar o recibir
en una
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transfusión
sanguínea de forma
segura
Y en caso de una
madre gestante es
importante para
evitar el riesgo del
bebe y
se lleve un
embarazo adecuado
 Los grupos sanguíneos son sumamente importantes, sirve para determinar el tipo de
sangre que se puede dar o recibir en una transfusión sanguínea de forma segura.
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 En caso de una madre gestante es importante para evitar el riesgo del bebe y se lleve un
embarazo adecuado

VII. BIBLIOGRAFÍA
MENCIONAR LAS DIFERENTES FUENTES BIBLIOGRAFICAS UTILIZADAS
1.Universidad de La Sabana [PRODUCTION/PRODUCTION. Conoce la compatibilidad
de tu grupo sanguíneo [Internet]. {$lang.siteName}. 2018 [cited 2021 Oct 26]. Available
from: https://www.unisabana.edu.co/campus/detalle/noticia/conoce-la-compatibilidad-de-
tu-grupo-sanguineo/
2. Determinación del grupo sanguíneo: MedlinePlus enciclopedia médica [Internet].
Medlineplus.gov. 2020 [cited 2021 Oct 26]. Available from:
https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/003345.htm
3.Elena Martín López. El abecedario sanguíneo más allá de la A y la B [Internet].
Leonoticias. Leonoticias; 2020 [cited 2021 Oct 26]. Available from:
https://www.leonoticias.com/vivir/salud/sangre-rara-donar-20200616180726-ntrc.html?
ref=https%3A%2F%2Fwww.google.com%2F

ANEXOS:
PREGUNTAS DE APLICACIÓN
1) ¿Cuáles son los tipos SANGUINEOS QUE CONOCE E INVESTIGAR LOS TIPOS SANGUINEOS
VARIANTES? DESCRIBA Y GRAFIQUE
A Positiva
A+ es el segundo tipo de sangre más común, afectando a 1 de cada 3 personas o el 35.7%
de la población. A+ puede darle a personas de tipos A+ y AB+, y pueden recibir de
cualquier tipo A u O. A los donantes de sangre tipo A+ se les recomienda que donen
sangre entera y plaquetas
A Negativo
1 de cada 16 personas, o el 6.3% de la población tiene sangre tipo A-. A- le puede dar a
otras personas de A- pero también a A+, AB+ y AB-, pero sólo puede recibir de A- y O-. A
los donantes de sangre tipo A- se les recomienda que donen sangre entera y glóbulos rojos
dobles.
B Positivo
El 8.5% de la población, o cada 1 de 12 personas tienen sangre tipo B+. Donantes de tipo
B+ pueden dar a personas de tipo B+ y AB+, y pueden recibir de personas de cualquier
tipo de sangre B u O. Los donantes de sangre tipo B+ pueden lograr el mayor impacto con
donaciones de sangre entera y de glóbulos rojos dobles.

B Negativo
La sangre tipo B- se encuentra en 1 de cada 67 personas, formando el 1.5% de la
población. Este tipo de sangre menos común puede darle a personas de sangre tipo B+, B-,
AB+ y AB-, pero sólo puede recibir de B- y O-. A los donantes de sangre tipo B- se les
recomienda que donen sangre entera o plaquetas.
O Positivo
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El tipo de sangre más común es la O+ y se encuentra en 1 de cada 3 personas o el 37.4%

de la población. Las personas con O+ le pueden dar a todos los tipos de sangre positivos,
pero sólo pueden recibir de O+ u O-. A los donantes con sangre tipo O+ se les recomienda
donar glóbulos rojos dobles y sangre entera.
O Negativo
El tipo de sangre con la mayor demanda es la O-, la cual constituye solo el 6.6% de la
población o lo equivalente a 1 de cada 15 personas. Las personas con el tipo de sangre O-
son consideradas donantes universales y pueden donar sangre a todos los tipos de sangre,
pero sólo pueden recibir de sus donantes tipo O-. A los donantes de sangre tipo O- se les
recomienda donar glóbulos rojos dobles y sangre entera.
AB Positivo
AB+ es el tipo de sangre más raro del tipo ABO, con sólo 1 de cada 29 personas, o 3.4% de
la población con este tipo. AB+ sólo le puede dar a otros receptores de AB+, pero como el
receptor universal puede recibir de todos los otros tipos de sangre. A los donantes AB+ se
les recomienda hacer donaciones de plaquetas y de plasma.
AB Negativo
El tipo de sangre más raro, el AB-, sólo lo tiene el 0.6% de la población, o 1 de cada 67
personas. El tipo de sangre AB- le puede donar a AB- y a AB+, y puede recibir de todos los
tipos de sangre negativos. A los donantes del tipo de sangre AB- se le recomienda donar
plaquetas y plasma.
Rh nulo
Entre el 0,1% y el 0,01% de la población mundial posee éste tipo de sangre, que también
es conocido como sangre dorada. L glóbulos rojos no tienen ninguno de los 45 elementos
que conforman el sistema Rh, a diferencia de los Rh-, que solo carecen de uno de ellos, la
proteína D. La probabilidad de que una persona sea Rh Nulo es tan baja que únicamente
50 personas en el mundo comparten esta sangre. La ventaja es que son donantes
universales; los inconvenientes, que ellos solo son compatibles con su propio grupo y que
sus glóbulos rojos viven menos, con lo cual, tienen anemias habituales y pueden necesitar
transfusiones frecuentes.
2) EXPLIQUE Y DESCRIBA EL PROCEDIMIENTO PARA REALOIZAR UNA PRUEBA DE GRUPO
SANGUINEO
 Se necesita una muestra de sangre. El examen para
determinar el grupo sanguíneo se denomina
tipificación ABO. La muestra de sangre se mezcla con
anticuerpos contra sangre tipo A y tipo B. Entonces, la
muestra se revisa para ver si los glóbulos sanguíneos
se pegan o no. Si los glóbulos permanecen juntos, eso
significa que la sangre reaccionó con uno de los
anticuerpos.
 El segundo paso se llama prueba inversa. La parte
líquida de la sangre sin células (suero) se mezcla con sangre que se sabe que pertenece al
tipo A o al tipo B. Las personas con sangre tipo A tienen anticuerpos anti-B. Las personas
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que tienen sangre tipo B tienen anticuerpos anti-A. El tipo de sangre O contiene ambos
tipos de anticuerpos.
Estos 2 pasos pueden determinar con precisión su tipo de sangre.
 La determinación del Rh usa un método similar a la tipificación ABO. Cuando se realiza la
determinación del tipo de sangre para ver si usted posee el factor Rh en la superficie de
sus glóbulos rojos, los resultados serán uno de estos:
*Rh+ (positivo), si usted tiene proteínas de la superficie celular
*Rh- (negativo), si usted no tiene proteínas de la superficie celular

3) MENCIONE EL CUADRO DE COMPATIBILIDAD SANGUINEA

Compatibilidad Sanguínea