Jornada de Actualización en Microbiología

Servicio de Salud Araucanía Sur

TM. Vijna Illesca Barichivich. Diciembre 2022
 SITUACION ACTUAL RESISTENCIA

▸ El informe mundial de la OMS sobre resistencia a los antibióticos pone de manifiesto la grave
amenaza para la salud pública en todo el mundo. Es importante mencionar que dicho informe incluye
datos de 114 países
▸ Entre los principales hallazgos del informe se pueden destacar
▸ Resistencia a los antibióticos carbapenémicos para el tratamiento de infecciones potencialmente
mortales por K. pneumoniae, causa importante de infecciones nosocomiales
▸ Resistencia a las fluoroquinolonas en el tratamiento de infecciones urinarias por E. coli
▸ En algunos países se ha confirmado el fracaso del tratamiento de la gonorrea con cefalosporinas de
tercera generación. Se calcula que cada año contraen esta enfermedad unos 106 millones de
personas
▸ Se calcula que las personas infectadas por estafilococo aureus resistentes a la meticilina tienen una
probabilidad de morir un 64% mayor que las infectadas por cepas no resistentes
▸ La resistencia también aumenta el costo de la atención sanitaria, por alargar las internaciones en
hospitales y requerir más cuidados intensivos

MECANISMOS DE RESISTENCIAAMECANISMOS DE RESISTENCIANISMOS DE

2 RESISTENCIA
 RESISTENCIA

▸ La resistencia antimicrobiana es un problema continuo y en aumento

▸ Se hace aún mayor cuando un microorganismo presenta más de un mecanismo de resistencia y
cuando tiene la facultad de transmitirlo, no sólo a su descendencia, sino también a otras bacterias de
su misma o diferente especie
▸ Hay una serie de formas en que los microorganismos son resistentes a los agentes antimicrobianos
▸ Los fenómenos de resistencia antimicrobiana son variados, destacando entre ellos cuatro
mecanismos principales

3
 Principales mecanismos de resistencia
a los antibióticos

1- Enzimas modificadoras 2- Bombas de salida 3- Cierre de porinas 4- Proteínas unidoras de penicilina

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 Estructura Bacteria gram negativa

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 Pared Celular

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Mechanisms of Resistance to Quinolones

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 Pared Celular

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7 Mechanisms of Resistance to Quinolones
 Pared Celular

▸ .

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Mechanisms of Resistance to Quinolones

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 Membrana Citoplásmica

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Mechanisms of Resistance to Quinolones
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 Citoplasma y Otros Componentes
internos

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 Estructura Bacteria gram positiva

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 Pared Celular

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Mechanisms of Resistance to Quinolones
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 La Membrana Citoplásmica, Citoplasma,
y Otros Componentes Internos

Estas estructuras son muy similares tanto en bacterias gram-positivas como en gram (-)

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 Estructura Bacteria gram positiva

14
 Cómo se produce la resistencia

▸ La base esencial de la resistencia reside en aspectos de carácter genético propio o adquirido. Por
ejemplo la resistencia natural de la P. aeruginosa a las bencilpenicilinas y sulfametoxazol, o la
resistencia a clindamicina en bacilos Gram negativos aeróbicos
▸ La resistencia adquirida se obtiene por cambios mutacionales a nivel del DNA o por la adquisición de
porciones del DNA productoras de la resistencia a través de plásmidos, transposones e integrones,
que conducen a cambios por ejemplo de betalactamasas de acción más amplia, o mutaciones de
genes que codifican porinas, impidiendo el ingreso del ATB al interior de la bacteria
▸ Los plásmidos son porciones pequeñas de DNA, móviles, que transportan los genes productores de
la resistencia, algunos incluso con capacidad de replicarse en forma independiente (llamados
conjugativos), y otros que carecen de dicha propiedad (no conjugativos)

15
 Cómo se produce la resistencia

▸ Los transposones son secuencias de doble hélice de DNA, que poseen varias propiedades como la
traslocación entre cromosomas o de cromosomas a plásmidos
▸ Estas características unidas a los sistemas de recombinación y a la propiedad de los plásmidos de
pasar de una célula a otra (conjugación), permite la adquisición de múltiple resistencia entre
bacterias de la misma especie a las especies distintas
▸ También los transposones y algunos determinados plásmidos permiten captar genes del
medioambiente celular externo, por medio de integrones, desarrollándose así múltiple resistencia a
varios antibióticos

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 NATURAL
Mutación

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Mechanisms of Resistance to Quinolones
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 NATURAL

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 ADQUIRIDA
Conjugación

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Mechanisms of Resistance to Quinolones
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 Principales mecanismos de resistencia
a los antibióticos

1- Enzimas modificadoras 2- Bombas de salida 3- Cierre de porinas 4- Proteínas unidoras de penicilina

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 Modificación enzimática del antibiótico

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Mechanisms of Resistance to Quinolones
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 Modificación enzimática del antibiótico
ß-lactamasas

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Mechanisms of Resistance to Quinolones
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 Modificación enzimática del antibiótico
ß-lactamasas

▸ .

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Mechanisms of Resistance to Quinolones
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 ß-lactamasas de espectro extendido
BLEE

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Mechanisms of Resistance to Quinolones
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 ß-lactamasas de espectro extendido
BLEE

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Mechanisms of Resistance to Quinolones
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 ß-lactamasas de espectro extendido
BLEE

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Mechanisms of Resistance to Quinolones
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 ß-lactamasas de espectro extendido
BLEE

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Mechanisms of Resistance to Quinolones
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 Carbapenemasas

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Mechanisms of Resistance to Quinolones

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 Enzimas que modifican
aminoglucósidos - cloranfenicol

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Mechanisms of Resistance to Quinolones

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 Otras enzimas modificadoras

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Mechanisms of Resistance to Quinolones

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 Bombas de Salida

▸ .

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Mechanisms of Resistance to Quinolones
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 Bombas de Salida
Estos trasportadores se pueden clasificar en seis familias

▸ .

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Mechanisms of Resistance to Quinolones
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 Bombas de Salida
Estos trasportadores se pueden clasificar en seis familias

▸ .

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Mechanisms of Resistance to Quinolones
33
 Cierre o pérdida de porinas

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Mechanisms of Resistance to Quinolones
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 Cierre o pérdida de porinas

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Mechanisms of Resistance to Quinolones
35
 Alteración de porinas en bacterias
gram-negativas

;.
.

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Mechanisms of Resistance to Quinolones
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 MECANISMOS DE RESISTENCIA
ANTIMICROBIANA

37
 Modos de Acción de los Antimicrobianos

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 Interferencia con la Síntesis de la Pared
Celular

39
 Interferencia con la membrana
citoplásmica

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Mechanisms of Resistance to Quinolones
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 Interferencia con la síntesis de proteínas mediante
el enlace a la subunidad ribosómica 30 S

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Mechanisms of Resistance to Quinolones
41
 Interferencia síntesis de proteínas mediante
el enlace a la subunidad ribosómica 30 S

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Mechanisms of Resistance to Quinolones
42
 Inhibición de la síntesis de proteínas mediante la
unión a la subunidad ribosómica 50 S

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Mechanisms of Resistance to Quinolones
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 Actividad de los beta lactámicos en
bacterias gram (-)

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Mechanisms of Resistance to Quinolones

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 Actividad de los beta lactámicos en
bacterias gram (+)

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Mechanisms of Resistance to Quinolones

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 Producción de Enzimas

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Mechanisms of Resistance to Quinolones

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 Inhibición de la ruta metabólica de la síntesis de ácido fólico
causada por sulfonamidas y trimetoprim

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Mechanisms of Resistance to Quinolones
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 Impermeabilidad de la Membrana
Bacteriana Externa

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Mechanisms of Resistance to Quinolones
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 Cambios en la permeabilidad de la
membrana externa

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 Alteración de porinas en bacterias
gram (-)

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Mechanisms of Resistance to Quinolones

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 Alteraciones del sitio de acción

▸ Las bacterias pueden alterar el sitio donde el antibiótico se une a la bacteria para interrumpir una
función vital de ésta.
▸ Este mecanismo es, principalmente, utilizado por las bacterias Gram positivas, las cuales generan
cambios estructurales en los sitios de acción de los antibióticos ß-lactámicos a nivel de las proteínas
unidoras de penicilinas

51
 Alteraciones del sitio de acción

▸ Este mecanismo es el más importante para las bacterias Gram positivas,

especialmente, S. pneumoniae resistente a penicilina y S.aureus resistente a
meticilina
▸ Para las bacterias Gram negativas, esta estrategia es menos frecuente.
▸ Otro sitio de acción de los antibióticos es la síntesis de proteínas. Este proceso
puede inhibirse al atacar los componentes nucleares de la replicación del ADN
y la transcripción del ARN
▸ Por ejemplo, las quinolonas inhiben la topoisomerasa, enzima encargada del
desdoblamiento del ADN para su replicación. Asimismo, la síntesis de
proteínas, llevada a cabo en los ribosomas, puede ser inhibida por fármacos
como los aminoglucósidos, las tetraciclinas, la clindamicina, los macrólidos y el
cloranfenicol

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 Bombas de eflujo

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Mechanisms of Resistance to Quinolones
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 Alteración de Rutas Metabólicas

AIMS Microbiol 2018;4(3):482-501

Mechanisms of Resistance to Quinolones
54
 Mecanismos de
acción resistencia

55
 Métodos de prueba en el Laboratorio

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 MÉTODOS DE PRUEBA—
BETALACTAMASA

▸ Haemophilus influenzae
▸ Moraxella catarrhalis
▸ Neisseria gonorrhoeae

Lectura interpretada del antibiograma: una necesidad clínica. Enferm Infecc Microbiol Clin. 2010;28(6):375–385

57
 Prueba de Resistencia Inducible a
Clindamicina

Lectura interpretada del antibiograma: una necesidad clínica. Enferm Infecc Microbiol Clin. 2010;28(6):375–385

58
 Beta lactamasas

59
 Clasificación de la beta lactamasas

60
61
 Pruebas confirmatorias de BLEE

CLSI M100 2022

62
 Pruebas confirmatorias de BLEE

63
 Pruebas confirmatorias de BLEE

64
65
 Beta lactamasas resistentes a
inhibidores

66
 Beta lactamasas resistentes a
inhibidores

67
 Detección de AmpC

▸ SeSe
Se utiliza un disco de cefoxitina de 30ug como inductor a una distancia
de 27 mm de centro a centro de un disco de ceftazidima 30 µg y
cefotaxima 30µg como reveladores .
El microorganismo producirá una betalactamasa inducible si se
observa un halo de inhibición achatado de la cefalosporina de tercera
generación

Nota: Posible resistencia durante el tratamiento con con

cefalosporinas de tercera generación

68
 ß-lactamasas tipo AmpC

69
 Carbapenemasas

70
 Detección de carbapenemasas
inmunocromatografía

71
72
 Ejemplos de actuación en la lectura
interpretada del antibiograma

Microorganismo Fenotipo observado Mecanismo de resistencia deducido Cambios en la interpretación

▸ Staphylococcus Oxacilina R PBP2a Resistencia a todos los

betalactámicos
▸ Enterobacterales Sinergia BLEE Resistencia a todas las
CAZ-CAZ/ACL cefalosporinas
y/o CTX-CTX/ACL

▸ P.aeruginosa Sinergia MBL Resistencia a carbapenémicos

IPM/EDTA

73
 Fenotipos de resistencia raros

74
 Determinación MIC Colistín

CLSI M100 2022

75
 Detección resistencia a Meticilina
Staphylococcus spp.

CLSI M100 2022

76
 SAMR en la comunidad

▸ S.aureus posee 4 tipos de PBPs: PBP1 PBP2 PBP3 PBP4

▸ El mecanismo más importante y frecuente que determina la resistencia a la
meticilina es la adquisición de una nueva PBP, denominada PBP2a o PBP2’
▸ La PBP2a se encuentra codificada en el gen Mec A
▸ Responsable de la resistencia a la meticilina
▸ Este gen se encuentra inserto en una isla genómica , denominada SCCmec
▸ El fenotipo comunitario que forma parte de la vigilancia ISP es MecA,pvl
(Tóxina de Panton-Valentine)
▸ Sospechar cuando S.aureus es resistente solo a Meticilina
Bases moleculares de la resistencia a meticilina en Staphylococcus aureus. Rev chil. Infectol 2018
Vol.35 no.1

77
 Edición de susceptibilidades
urocultivos AP
Enterobacterales de origen
urinario
Ampicilina
Amikacina
Cefazolina (E.coli,K.pneumoniae,
P.mirabilis)
Cefuroxima
Cefotaxima
Ciprofloxacina
Gentamicina
Nitrofurantoína
Sulfametoxazol/Trimetoprim

Estudio de susceptibilidad a cefalosporinas de primera generación en enterobacterias aisladas de

Urocultivo, según criterios CLSI y EUCAST. Rev Chilena Infectol 2018; 35 (3): 329-331
78
 Edición de susceptibilidades
Hospitalizados
Enterobacterales de origen Enterobacterias
urinario hemocultivos y secreciones
Ampicilina Ampicilina/Sulbactam
Amikacina Cefazolina
Cefazolina (E.coli,
K.pneumoniae, P.mirabilis) Cefepime
Cefuroxima Cefuroxima
Cefotaxima Cefotaxima
Cefpodoxima en paciente
pediatría Ceftazidima
Ciprofloxacina Ciprofloxacina
Ertapenem Ertapenem
Gentamicina Gentamicina

Nitrofurantoína

Piperacilina/tazobactam
Sulfametoxazol/Trimetoprim

Si es resistente a Si es resistente a
Ertapenem informar Ertapenem informar
susceptibilidad para susceptibilidad para
Imipenem y Meropenem Imipenem y Meropenem

79
 Edición de susceptibilidades
Hospitalizados
Pseudomonas aeruginosa Otras No Enterobacterias
Amikacina Amikacina
Ceftazidima Ciprofloxacina
Cefepime Cefotaxima
Ciprofloxacina Ceftazidima
Gentamicina Cefepime
Imipenem Gentamicina
Meropenem Imipenem
Piperacilina/Tazobactam Meropenem

Piperacilina/Tazobactam

Sulfametoxazol/trimetoprim

Aeromonas, P.no aeruginosa

80
 Edición de susceptibilidades
Hospitalizados

B.cepacia Salmonella
Ceftazidima Ampicilina
Levofloxacino Ciprofloxacino
Meropenem Cefotaxima (Extraintestinal)

Sulfametoxazol/Trimetoprim

81
 Edición de susceptibilidades
Hospitalizados

S.pneumoniae S.pneumoniae(respiratorio)
Ceftriaxona/Cefotaxima (CIM) Ceftriaxona/Cefotaxima (CIM)
Penicilina (CIM) Penicilina (CIM)
Vancomicina(Si R a cefalosporina) Clindamicina
Revisar punto corte lectura Eritromicina

Levofloxacino

82
 Edición de susceptibilidades
Hospitalizados

Acinetobacter baumannii complex S.maltophilia

Ampicilina/Sulbactam Levofloxacino

Amikacina Sulfametoxazol/Trimetoprim

Ciprofloxacina

Gentamicina

Imipenem

Meropenem

83
 Edición de susceptibilidades
Hospitalizados
S. aureus oxacilina S.aureus oxacilina (Cefoxitina)
(Cefoxitina)sensible resistente
Clindamicina Clindamicina
Ciprofloxacina Ciprofloxacina
Clindamicina Clindamicina
Oxacilina Oxacilina
Sulfametoxazol/Trimetoprim Rifampicina
Tetraciclina Sulfametoxazol/Trimetoprim

Tetraciclina

Vancomicina

84
 Edición de susceptibilidades
Hospitalizados
E.faecalis E.faecium

Ampicilina Ampicilina

Ciprofloxacina Ciprofloxacina

Nitrofurantoína( urocultivos) Nitrofurantoína( urocultivos)

Gentamicina alto nivel

Vancomicina

Linezolid

Daptomicina

85
 COMENTARIOS

S. aureus aislados de urocultivos informar sin susceptibilidad

Enterobacterias productoras de Blee: Informar resistentes a Penicilinas, Cefalosporinas, Aztreonam

Productor de AmpC: Posible selección de resistencia durante el tratamiento de cefalosporinas de

3ªgeneración

Staphylococcus MS: Sensible a Ampicilina/Sulbactam, Cefadroxilo, Oxacilina

Staphylococcus MR: Resistente a Ampicilina/Sulbactam, Cefadroxilo, Oxacilina

S.aureus en urocultivo: Informar solo Oxacilina

Staphylococcus saprophyicus: no realizar susceptibilidad (CLSI)

Susceptibilidad antimicrobiana en Chile 2012. Rev Chilena Infectol 2014; 31 (2): 123-130
En qué ayuda el antibiograma al médico clínico en la atención de sus pacientes?. Rev
Chil Infect 2004; 21 (Supl 1): S34-S38

86