TECNICAS DE DETERMINACION DE LIPIDOS

OBJETIVOS. -

1.- Determinar cualitativamente la presencia de lípidos en muestras biológicas.

2.- Reconocer algunas propiedades químicas, físicas y de tinción de los lípidos que permiten identificarlos

LÍPIDOS. - son un grupo amplio y heterogéneo de MACROMOLECULAS que constituye uno de los principales
nutrientes presentes en alimentos.

FORMULA QUIMICA.- Esta formados por un GRUPO CARBOPXILO Y CADENAS HIDROCARBOMADAS apolares, lo
que los hace de NATURTALEZA ANFIPATICA.

A nivel celular son una importante fuente de reserva energética y cumplen funciones estructurales (MENBRANA
CELULAR) y reguladoras.

SAPONIFICABLES E INSAPONIFICABLES.- Según la presencia o no de ACIDOS GRASOS en su estructura, se divide en

dos grupos:

SAPONIFICABLES INSAPONIFICABLES

Compuestos por un alcohol unido a uno o Carecen de ACIDOS GRASOS.

varios ACIDOS GRASOS (IGUALES O DISTINTOS).
Ej.
SIMPLES: ACIDOS GRASOS, TRIGLICERIDOS.
COMPLEJOS: FOSFOLIPIDOS, GLUCOLIPIDOS.

ACIDOS GRASOS: Que forman los LÍPIDOS SAPONIFICABLES, pueden ser SATURADOS o INSATURADOS
dependiendo de la presencia de ENLACES CARECONO – CARBONO SIMPLES (saturados) o DOBLES (insaturados)
en su estructura.

Estas características hacen que los ACIDOS GRASOS SATURADOS sean SOLIDOS a temperatura ambiente, por lo
que se denomina Grasas.

En los ACIDOS GRASOS INSATURADOS donde existen uno o varios enlaces de C-C la estructura tridimensional se
curva alrededor del DOBLE ENLACE, haciendo que la molécula sea más Móvil.

A mayor grado de instauración, mayor número de dobles enlaces C-C y mayor movilidad de la molécula. Los
lípidos POLISATURTADOS son LIQUIDOS a temperatura ambiente se denominan ACEITE.

TRIGLICERIDOS.- Constituyen la forma en que se almacenan los ácidos grasos en el cuerpo, están formados por
tres ACIDOS GRASOS ligados a una molécula de glicerol.

Son insolubles en agua por eso acumula como gotas de grasa en el citoplasma, se degradan para ser utilizadosd
como moléculas procuradoras de energía.
LABORATORIO.-

MATERIALES.-

Aceite de mesa
Grasa de cerdo
Agua
4 Recipientes de vidrio o plasatico
1 Jeringa de 10 ml.
1Marcador permanente
Baño maria
-Reactivo de Sudan
-Tinta China
-Acetona.
PROCEDIMIENTO
(SOLUBILIDAD)

- Lo primero es rotular dos tubos: uno como (aceite+agua) y otro (aceite+acetona) –Ahora añade 1ml de
agua al tubo marcado como (aceite+agua) y 1ml de aceite con ayuda de un gotero o pipeta Pasteur –
Repite la operación en el tubo marcado a como (aceite+acetona) añadiendo ahora 1ml acetona, agitar
ambos tubos con fuerza y dejar en reposo y observar.

(SAPONIFICACION)

- Rotula dos tubos: uno con aceite y otro con grasa de cerdo, coloca 3ml de aceite y 3ml de grasa de cerdo
en el tubo correspondiente – Ahora, agrega a cada uno de los tubos 2ml de NaOH al 20% con ayuda de
una pipeta de 1ml, agitar el tubo fuertemente tapando con el dedo hasta mezclar bien.

Ahora colocar los dos en el Baño María termostatado por encima de los 90°C durante 20 a 30 minutos.

- 1. Se observa una capa inferior de color claro que contiene la solución de sosa sobrante junto con la
glicerina formada
- Resultados del ACEITE: cuanto mayor es la pureza del aceite más homogéneo es el resultado, cuando ya
se ha visto como se forma el jabón, se puede verter en un Vaso de Precipitado o luna de reloj el
contenido de los tubos de ensayo, se remueve bien y se deja calentar hasta que se haga un buen trozo de
jabón.

TINCION DE SUDAN. - Es una tinción para determinar grasa, porque es insoluble en agua y en cambio es soluble
en las grasas Tiñe las grasas de color rojo anaranjado.

- Rotula un tubo como Sudan y adiciona 2ml de aceite en el tubo. Añade ahora 4 gotas de Reactivo de
Sudan, agita el tubo, dejando reposar y observa el resultado final.

SOLUBILIDAD CON TINTA CHINA

- Rotula un recipiente de vidrio (frasco) con TITA CHINA y adiciona 2ml de aceite en el recipiente, añade
ahora 4 gotas de Tita china roja, agitar el tubo, déjalo reposar y observa los resultados