CONSULTA DE ELECTROFORESIS

JOAN SEBASTIAN BUENO GALEANO

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1. Defina la electroforesis.

La electroforesis es una técnica utilizada para separar el ADN, el ARN, moléculas o proteínas
en base a su tamaño y carga eléctrica. Las condiciones utilizadas durante la electroforesis se
pueden ajustar para separar moléculas en el rango de tamaño que se desee.

2. Describa el proceso en laboratorio de la electroforesis, y su aplicación.

La electroforesis se lleva a cabo con un equipo compuesto de una carga negativa en un

extremo y una carga positiva en el otro. Al insertar moléculas cargadas, en este entorno, las
negativas se irán a un extremo y las positivas al otro correspondiente. Por ejemplo, al analizar
las proteínas en un gel, en estos equipos, se toma la proteína completa para analizar su
tamaño. De esta forma, las más cortas migrarán a los polos de manera más rápida y se verán
reflejadas en la parte inferior del gel. En cambio, las más largas quedarán en la parte superior.
Esta técnica tiene una variedad de usos prácticos, como la medicina forense para la
identificación de personas, el proyecto del genoma humano, la investigación de proteínas y de
mutaciones genéticas y pruebas de diagnóstico clínico.

3. ¿Qué es la electroforesis en gel y capilar?

Electroforesis en gel

La técnica de la electroforesis del gel explota la diferencia de tamaño y la carga de diversas

moléculas en una muestra. La muestra de la DNA o de la proteína que se separará se carga
conectada a un gel poroso colocado en un ambiente iónico del almacenador intermedio. En el
uso de la carga eléctrica, cada molécula que tiene diversas talla y carga se moverá a través del
gel a diversas velocidades.

El gel poroso usado en esta técnica actúa como criba molecular que separa moléculas más
grandes las más pequeñas. Moléculas más pequeñas se mueven más rápidamente a través del
gel mientras que los más abultados se dejan detrás.

Electroforesis capilar

Es una técnica analítica que permite la separación y cuantificación de una amplia gama de
analitos como iones, péptidos, proteínas, carbohidratos, esteroides, ácidos nucleicos,
vitaminas, fármacos y células. Está basada en la migración diferencial de las moléculas sujetas
a un campo eléctrico (de 100 a 500 V/cm) a través de un capilar de menos de 50 µm de
diámetro. El interior del capilar se encuentra formado por grupos silanol (Si-OH), los cuales al
ser desprotonados (Si-O), elevan considerablemente el potencial de hidrógeno (pH) y
favorecen la presencia de analitos específicos
 Electroforesis en gel Electroforesis capilar

Solo ciertas moléculas pueden visualizarse. Permite la separación y cuantificación de una

amplia gama de analitos

Es electroforesis de zona y se revela por Es en medio líquido, no usa colorantes

coloración

No es práctico hacerlo con proteínas,es Permite el análisis de iones, péptidos,

excelente para separar e identificar proteínas, carbohidratos, esteroides, ácidos
biomoléculas de mediano a gran tamaño. nucleicos, vitaminas, fármacos y células.

Se escanea y se miden las fracciones Mide directamente la fracción proteica a

coloreadas 200nm

Requiere una gran cantidad de ADN o de Requiere pequeñas cantidades de muestra

proteína para comenzar.

Corre del cátodo al ánodo Corre del ánodo al cátodo

Generalmente tiene bajo rendimiento, lo que Se obtienen los resultados de manera más
significa que no produce datos rápida, precisa y segura.
especialmente rápido.

Es difícil de automatizar, por lo que es muy Es automatizable

trabajosa en el momento de ejecutar
múltiples muestras.

4. Qué relación tiene el punto isoeléctrico con la electroforesis.

En la técnica de isoelectroenfoque un gel posee un pH fijado en su estructura. Como

consecuencia, al avanzar los componentes de la muestra por el gel se encuentran en entornos
de pH diferente, y eventualmente alcanzan una región en la cual el pH local es igual al punto
isoeléctrico de la molécula y ésta detiene su avance. Se alcanza un equilibrio y se consigue la
separación de los componentes de la muestra de acuerdo con su punto isoeléctrico

5. ¿Cómo se relaciona la electroforesis con el fenómeno de transporte de conductividad

eléctrica?

La mayoría de las biomoléculas poseen una carga eléctrica, como consecuencia, se desplazan
cuando se ven sometidas a un campo eléctrico. Cada molécula se desplaza por efecto del
campo, alcanzando rápidamente una velocidad constante al equilibrarse la fuerza impulsora
(fuerza del campo eléctrico) con la resistencia al avance (fuerza de fricción o rozamiento)
impuesta por el medio en el que se desplaza.

REFERENCIAS

● Electroforesis de proteínas y de ácidos nucleicos.(Sin fecha). Biomodel.

http://biomodel.uah.es/tecnicas/elfo/inicio.htm
● ELECTROFORESIS: ¿QUÉ ES Y PARA QUÉ SIRVE?. (2020, 21 de
septiembre).Cromtek.
https://www.cromtek.cl/2020/09/21/electroforesis-que-es-y-para-que-sirve/#top
● Las desventajas de la electroforesis del Gel. (2021, 17 de Junio). Usroasterie.com.
https://www.usroasterie.com/las-desventajas-de-la-electroforesis-del-gel.html
● Ruiz, V. (2016, 7 de Octubre). Revista Cubana de Hematología, Inmunología y
Hemoterapia. http://www.revhematologia.sld.cu/index.php/hih/article/view/538/527
● Electroforesis. (Sin fecha). National Human Genome Research Institute.
https://www.genome.gov/es/genetics-glossary/Electroforesis