1.¿Qué diferencias existen entre una electroforesis en gel y una capilar?

¿Mencione
ventajas y desventajas de cada una? ¿Utilidad?

La electroforesis en gel se basa en aplicar una corriente eléctrica a través de un

gel físico (sustancia polimérica) ubicado horizontalmente o verticalmente, el cuál
engloba las moléculas que estemos examinando. Estas moléculas se desplazarán por
el gel en diferentes direcciones y velocidades basándose en su tamaño y carga
eléctrica con el fin de separar unas moléculas de otras. La tinción y la observación a
través de Transiluminador UV es la técnica para la detección de moléculas.

Ventajas Desventajas
Este método es fácil de utilizar. Limitación en el tamaño de moléculas
de ADN a separar.
El gel tiene la capacidad de recuperar la Es de bajo rendimiento (no procesa los
muestra de ADN. dato rápidamente).

Por otro lado, la electroforesis capilar es una “remodelación” de la

electroforesis en gel que utiliza el mismo principio, pero este se lleva a cabo en un
tubo capilar el cual contiene una sustancia de gel o un polímero líquido. Los capilares
son separados por sílice fundida.
La detección de moléculas se realiza por detectores espectrofotométricos
automáticos.

Ventajas Desventajas
Es de alto rendimiento (rapidez en los Se necesita de alguien profesional para
resultados). ser utilizado ese método.
Obtención de información detallada. Es más costoso que otros métodos.

No hay límite en la separación debido al Se requiere una amplia variedad de

tamaño. buffers.

2.Realice un comparativo entre la electroforesis y la cromatografía de capa fina a

nivel de la metodología y la utilidad.
 Electroforesis
Metodología La electroforesis consiste en
aplicar una corriente a través fina es un método de
de un gel que contiene las
moléculas de interés. Con
base en su tamaño y carga,
las moléculas se desplazarán
por el gel en diferentes
direcciones o a distintas
velocidades, con lo que se
separan unas de otras.
Utilidad La electroforesis en gel es
utilizada para separar
fragmentos de ADN según
su tamaño.
Separa moléculas de ácidos
nucleicos antes de su
transferencia a membranas
para análisis posteriores.
Se utiliza para el análisis de
los productos de PCR
(reacción en cadena de la
polimerasa) verificando si
ocurrió o no amplificación.
Se utiliza para la estimación
del tamaño de las moléculas
en una mezcla de ADN o
Cromatografía
La cromatografía de capa
afinidad que se utiliza para
separar los compuestos de
una mezcla; es un método de
separación muy versátil, se
utiliza para el análisis
cualitativo y cuantitativo de
las muestras.
Identifica alguna sustancia
conocida en una mezcla por
su comparación con un
patrón de la sustancia pura.
Mide el grado de pureza de
una muestra, si existen
varias manchas en el
cromatograma, existen
varios componentes en la
muestra.
Obtiene una medida
semicuantitativa de algún
componente, cuanto mayor
sea la mancha obtenida en el
cromatograma, la
concentración de esa
sustancia será mayor.
 ARN.

Se utiliza para la estimación

de la cantidad y/o la calidad
de los ácidos nucleicos
purificados.

3.En la práctica anterior, usted extrajo ADN a partir de una muestra biológica (sangre,
células o tejido). Consulte cual es el tamaño del ADN, y compare su peso frente al marcador
molecular. ¿Qué puede concluir? ¿Esperaría más de una banda en el caso del material
extraído? Explique su respuesta.

Teniendo en cuenta que 1 kilobase es igual a 1000 pares de bases y que una molécula
de ADN consta de 3000 kilobases (kb), el tamaño total de nuestro ADN sería 3’000.000 de
pares de bases (pb)
El marcador de peso que se utilizó en el laboratorio es el GeneRuler 100 pb.
Podemos concluir que la diferencia de tamaños en muy evidente, el ADN es mucho
más “grande” o extenso que el marcador de peso.
No se esperaría más de una banda en el caso del ADN, ya que las moléculas de ADN
al será más grandes no pasarían más allá de la primera banda.
En el caso de que se hallen más bandas en la molécula podríamos concluir que no es
una molécula de ADN pura, es decir, que esta se encuentra fragmentada. Esto se puede dar
por fallas en la extracción de la muestra y no es lo más apropiado para la electroforesis.

4.Describa y explique los resltados obtenidos en el gel de agarosa para el ADN

extraído y las fracciones AW1 y AW2. Explique si se formó una banda discreta, o si por el
contrario se formó una banda con un extremo degradado o manchoso explique qué posibles
cambios en la siguiente lista de factores podría estar interfiriendo en un adecuado proceso: •
La concentración y el tipo de agarosa de acuerdo al tamaño de la muestra de ADN • El
voltaje aplicado • El buffer usado para electroforesis • Calidad de las muestras o la
extracción.
 Pudimos analizar que nuestra muestra de ADN no presentó fragmentaciones; ya que
se observó que en el gel de agarosa está se encontraba ubicada en la parte superior, lo que
quiere decir que la muestra de ADN utilizada en la práctica estaba íntegra y pura por lo cual
en comparación con las demás muestras no presentaba ningún barrido o no se ubicaba en las
partes inferiores del gel.

Teniendo en cuenta los la lavados realizados en la primera práctica al ADN, si luego

de realizar el primer lavado del ADN en la sílica gel, esta muestra se llevará a la práctica de
electroforesis para ser analizada; como resultado podríamos tener un ADN contaminado con
lípidos, proteínas es decir un ADN menos puro que si realizáramos más lavados de este, por
ende se podría apreciar luego de hacer el procedimiento de electroforesis y llevar a la cámara
de luz UV un barrido de ADN por fragmentación, al igual que también podría aparecer
ubicado en la parte baja del gel.

Si se tomara la muestra del segundo lavado de la sílica gel, tendríamos un ADN con
probabilidades de que esté menos contaminado que el anterior por ende esté se podría
apreciar en el gel de agarosa ubicado más arriba que el de la muestra 1, podría presentar
también un barrido en el gel queriendo decir que es un ADN fragmentado.

Si se tomara la muestra del tercer lavado, se esperaría que el ADN en esta estuviera
más puro; ya que los contaminantes quedaron en las muestras anteriores, puesto que entre
más lavados se haga a la muestra el ADN que se obtendría estaría más puro e ideal, por lo
cual en el análisis de electroforesis este se podría observar en la parte superior del gel lo que
quiere decir que este es ADN íntegro y no presenta fragmentaciones.

Para que la práctica sea efectiva y con las expectativas deseadas se debe tener en
cuenta algunos factores que influyen en esto:

1. Si no se utilizan las concentraciones y el tipo de agarosa de acuerdo al tamaño

del ADN, podríamos hacer que las mallas que forma el gel luego de su proceso al calentarse
para diluirse y tomar la forma de gel, sean muy pequeñas y evitando el paso del ADN o por el
contrario podremos hacer que las mallas sean mucho más grandes y por ende no obtener los
resultados esperados, las mallas deben ser proporcionales al tamaño de la muestra a analizar
en este caso el ADN por lo cual es importante tener en cuenta la concentración a utilizar.
2. El voltaje que se aplica para el corrido del ADN en el gel también debe ser
adecuado, debido a que si nos excedemos en este podremos hacer que las partículas viajen
mucho más rápidas, empujarlas por la fuerza que se está ejerciendo y si son muy grandes
rompan la malla del gel y este llegué hasta el final y se riegue o disperse.
3. El buffer que se debe utilizar debe ser el adecuado y así poder garantizar que
este cambie la densidad de la muestra, para que esta se pueda precipitar y obtenga una
coloración; debido a que si la muestra es de igual densidad; se mezcla y por ende no se
precipita, siendo el cambio de color importante también para poderla diferenciar.
4. Si la calidad de la muestra y extracción no son las adecuadas desde la
separación del ADN, puede ocurrir que nunca pueda atravesar la Sílica gel al igual que
obtener muestras contaminadas que al ser analizadas en la electroforesis no van a estar
íntegras y se observarán fragmentaciones por fallas en la calidad de la muestra.

5.En esta práctica se usó como Buffer electroforético TAE 5X solución madre y TAE
0.5X como Buffer de trabajo, realice los cálculos respectivos si se quisiera trabajar a partir de
una solución madre TAE 10X y la respectiva dilución para una solución de trabajo TAE 1X.

 Se plantea utilizar 100 ML de preparación para el TAE.

En 100 ML hay una concentración de 10X, necesito una solución de trabajo de 1X.
Para esto realizamos los siguientes cálculos.

100ML 10X
X 1X

100 ML∗1 X
x= = 10 ML – En 10ML hay 1X.
10 X

1 ML∗10 X
x= = 0,1 ML – En 1ML hay 0,1X.
100 ML
 Por tanto, en una dilución de 100ML hay una concentración de 10X, donde por
ML encontramos 0,1X; por lo cual una concentración de 1X está presente en 10
ML
6.Explique qué beneficios trae usar Buffer, Tris acetato y EDTA (TAE), Tris-borato
(TBE), o Tris-fosfato (TPE) como buffers electroforéticos y cuáles son las diferencias en
utilidad de estos Buffers.

Estos buffers solo se diferencian en un solo compuesto: Ácido Bórico y Ácido

Acético.
Los beneficios de la utilización de estos buffers es que al ser soluciones tampón
permiten que el valor del pH no varíe (mantener un pH constante) y se pueda obtener
moléculas precisas. En este caso, no permitirían que el pH de los ácidos nucleicos varíe.
 Tris-acetato: Es la molécula responsable del taponamiento y regulación
del pH.
 Ácido bórico o ácido acético: Contribuye a ajustar el pH deseado y a
mantenerlo al igual que el tris-acetato
 EDTA: Quelante de cationes divalentes (valencia de dos), cuya función
es interceptar Mg2+, con lo que se evita que las posibles nucleasas presentes degraden
el ADN de la muestra.

Diferencias de los buffers:

Buffer TBE Buffer TAE

Migración Para fragmentos pequeños Es el mejor para análisis
de ADN corren más electroforético de grandes
rápido. fragmentos de ADN ya
que corren más rápido
Capacidad Es más estable y tiene Es menos estable y tiene
taponante capacidad taponante más menor capacidad
alta que el TAE. taponante que el TBE.
Reciclaje Dura 3 o 4 días No es reutilizable después
independientemente de las de 3 “corridas” de
“corridas” de electroforesis seguidas sin
electroforesis realizadas. alterar sus propiedades.
 Recuperación del TBE tiene interacción Alta recuperación del
ADN pegajosa con la agarosa lo ADN.
que provoca baja
recuperación del ADN

7. Explique por qué es necesario usar un Buffer de carga en la electroforesis y cuál es

la finalidad de cada uno de sus componentes

El buffer de carga es un amortiguador que tiene como fin brindar peso, densidad y
color a la muestra, lo que facilita su depósito en el pocillo y evita su salida del gel; permite,
además, monitorear el corrimiento de la muestra en el gel.
El buffer de carga de ácidos nucleicos se compone de Tris; el cual mantiene el pH en
el gel, azul de bromo fenol; se utiliza como un marcador ya que su color es una ayuda visual
durante la carga de muestra en los pocillos, azul de xileno; se compone de color y carga, se
utiliza para comprobar el progreso de la electroforesis, permite detener la electroforesis con la
confianza de que las moléculas grandes de DNA no se hayan salido del gel y glicerol; este
aporta densidad y facilita la aplicación a los pocillos a la muestra.

8.Dibuje un gel con su respectivo marcador de peso molecular, luego de que hiciera la
digestión de una muestra con la enzima EcoRI. El amplificado digerido tenía una longitud de
738 pares de base, con punto de corte en la posición 100 y 200.
 10. Cuál es la secuencia de reconocimiento de la enzima EcoRI. ¿Corta una sola de las
cadenas? ¿Cuál es el enlace que digiere? ¿Qué tipo de reacción química efectúa? ¿Qué
diferencia hay entre endonucleasa y exonucleasa?

La secuencia de reconocimiento es:

5'GAATTC 5’---G AATTC---3’

3'CTTAAG 3’---CTTAA G---5’

La enzima Ecori corta las dos cadenas de ADN, pero 5’ siempre queda con una
Guanina.
El enlace que digiere se realiza por medio del ADN ligasa la cual se encarga de
unir por enlaces covalentes.
Las endonucleasas son comúnmente conocidas como enzimas de restricción. Estas
producen fragmentos de ADN a la hora del “rompimiento” o “corte” el cual se lleva a
cabo por una reacción química de hidrólisis entre dos enlaces fosfodiéster.

 Endonucleasas: Corta los ácidos nucleicos en el medio; la

endonucleasa restringida sufre un período de retraso; puede formar extremos
pegajosos o extremos romos.
 Exonucleasas: Corta el ácido nucleico en los extremos; la exonucleasa
no tiene un período de retraso; siempre forma los extremos pegajosos.

11. ¿Cuál es la utilidad de la técnica RFLP y como relaciona con la electroforesis?

Esta técnica llamada RFLP (Fragmentos de restricción de longitud polimórfica) ha

sido muy utilizada como marcador de localización en el ADN genómico. Se refiere a
secuencias específicas de nucleótidos en el ADN que son reconocidas y cortadas por las
enzimas de restricción (también conocidas como endonucleasas de restricción) las cuáles
varían entre individuos.

Esta técnica se utiliza como marcador para la identificación de grupos particulares de

personas propensas a contraer diferentes enfermedades genéticas.
La relación con la electroforesis es que en el caso de RFLP se nos permite diferenciar
las moléculas por medio de la longitud y distancia de cada uno de los fragmentos de
moléculas. En cambio, la electroforesis se basa en la separación por tamaño de moléculas.

12. A cuál grupo químico pertenece la Agarosa y cuál es el enlace que permite
su polimerización.

La agarosa es un polímero lineal de galactosa y 3,6-anhidrogalactosa, es un

polisacárido formado por galactosas alfa y beta, los polisacáridos son químicamente los
carbohidratos más complejos.
En la gelificación de las moléculas de agarosa, la unión de hidrógeno intramolecular
tiene lugar entre el átomo de oxígeno hemiacetal 3,6 ahidrido-α-L-galactocranosa ligada a 1,4
y OH-4 del residuo adyacente de D-galactopyranosis ligada a 1,3 a altas temperaturas.

13. ¿Es plausible el uso de este tipo de polímeros en la entrega controlada de

fármacos? Explique su respuesta.

Es completamente plausible el uso de estos polímeros en la entrega controlada de

fármacos.
La entrega controlada de fármacos regular obtiene unos controles muy deficientes
sobre los niveles de los fármacos óptimos terapéuticos que conllevan los tratamientos. Por
esto, se puede provocar que el medicamento no se administre ni en cantidad ni tiempo ni
lugar esperado para llevar a cabo el tratamiento de manera eficaz.

14. ¿Cuáles son las diferencias a nivel molecular entre la poliacrilamida y la

Agarosa? ¿Con base en estas diferencias qué relación hay entre la estructura molecular del
tamiz y la resolución de un corrido electroforético?
 La principal diferencia entre la agarosa y la poliacrilamida es que la agarosa se usa en
la electroforesis en gel de agarosa principalmente para la separación del ADN, mientras que
la poliacrilamida se usa en la electroforesis en gel de poliacrilamida principalmente para la
separación de proteínas.

La agarosa puede separar fragmentos de ADN de 50-20, 000 pb de tamaño, mientras

que la poliacrilamida tiene un mayor poder de resolución, separando hasta 5-500 pb de
fragmentos de ADN.

Otra diferencia importante es que los geles de agarosa se encuentran planos sobre la
mesa con un recorrido horizontal, mientras que los geles de poliacrilamida se colocan sobre
la mesa con un recorrido vertical.

Los geles se colocan en la cubeta de electroforesis, sumergidos en un tampón de pH

alrededor de 8, permitiendo que las moléculas de DNA o RNA sometidas a electroforesis se
desplazarán al polo positivo ya que a pH superiores a 5 poseen carga negativa. Los geles se
comportan como un tamiz molecular y permiten separar moléculas cargadas en función de su
tamaño y forma. Así, moléculas de DNA de diferente tamaño, van a emigrar de forma distinta
en un gel de electroforesis.

15. ¿Qué diferencia metodológica hay entre la electroforesis de ADN y de

Proteínas?

Los ácidos nucleicos (ADN y ARN) solo tienen carga negativa por su esqueleto de
fosfatos, de esta manera, estos de desplazarán hacia el polo positivo (ánodo).
En cambio, las proteínas pueden tener carga positiva o negativa, lo cual no permite
una buena realización de la electroforesis. Por esta razón, previamente a ser sometidas a la
electroforesis, las proteínas deben ser tratadas con detergentes que les brinden una carga
negativa. De esta manera las proteínas se homogenizarán y se desplazarán al polo positivo
(ánodo) y se dividirán por tamaño.

16. ¿Cuáles son los pasos de un Westernblot y para qué sirve?

 El Western Blot es una técnica analítica, ampliamente utilizada, para el estudio de
proteínas. Este método permite la detección de una sola proteína dentro de una muestra
biológica, se puede usar para indicar si la muestra expresa la proteína de interés o para
realizar comparaciones cuantitativas de los niveles de proteína entre diferentes muestras o
grupos de tratamiento.
Para realizar la técnica Western Blot se deben llevar a cabo los siguientes pasos:

1. Preparación de la muestra: Una adecuada preparación de la muestra

es esencial para tener éxito en un ensayo de Western Blot. La mayoría de veces, las
proteínas se extraen mediante procesos químicos y/o mecánicos.

2. Electroforesis: El tipo de electroforesis más común usado en Western

Blot es el abreviado SDS-PAGE. SDS es el agente desnaturalizante que se agrega al
tampón durante este procedimiento. PAGE significa electroforesis en gel de
poliacrilamida, ya que los geles están típicamente hechos de acrilamida polimerizada.

Previamente a la electroforesis, es importante determinar la concentración de

proteínas para asegurar cargar la cantidad correcta de proteínas en el gel.

3. Transferencia a una membrana: El siguiente paso es la transferencia

de proteínas a otra superficie. Esto se debe a que los geles son un sustrato pobre para
la inmunodetección y debido a la fragilidad de los mismo pueden romperse
fácilmente. Por lo tanto, se realiza la transferencia de la proteína a una membrana más
duradera para la posterior inmunotinción. La membrana es un soporte sólido que une
e inmoviliza las proteínas, permitiendo así la detección de un anticuerpo.

4. Inmunotinción: En este paso se podría usar una tinción de proteínas

como Coomassie en un gel o Ponceau en la membrana, pero son tinciones no
específicas y mostrarán todas las proteínas de la muestra, por lo cual sería muy difícil
saber qué proteína es la de interés, y sería aún más difícil intentar comparar la
cantidad de esa proteína entre las muestras. Por lo tanto, se usan anticuerpos
específicos para que solo se visualice la proteína diana.
 5. Detección de las bandas: Los métodos directos utilizan un anticuerpo
primario conjugado con un marcaje detectable, como una enzima, biotina o molécula
fluorescente. Los métodos indirectos utilizan dos anticuerpos; un anticuerpo primario
y un anticuerpo secundario contra la especie del primer anticuerpo. En la detección
indirecta, es el anticuerpo secundario el que está conjugado con un marcaje
detectable, es la forma más utilizada debido a la amplificación de la señal que
produce.

Hay tres tipos de detección que se usan comúnmente en el Western Blot,

quimioluminiscencia, fluorescencia y colorimetría

La quimioluminiscencia: se utiliza comúnmente anticuerpos secundarios

conjugados con peroxidasa.

La fluorescencia: El anticuerpo secundario se une a un fluoróforo, que

cuando es excitable emite luz. La luz emitida, se detecta mediante un dispositivo
capaz de medir la fluorescencia o mediante una cámara CCD provista con los filtros
de longitud de onda apropiada.

Colorimetría: Los métodos colorimétricos utilizan un anticuerpo secundario

que ha sido conjugado previamente a un enzima (peroxidasa o fosfatasa alcalina). La
reacción de la enzima con el sustrato produce un producto insoluble que es visible en
la membrana. La cantidad de colorante convertido es proporcional a la cantidad en la
muestra.

17. ¿Cuáles son los sistemas de marcaje utilizados para la detección del analito en el
Westernblot?

 Sistema de detección radioactiva: Marcaje de los anticuerpos con

conjugados radioactivos. Es una técnica con mucho riesgo de seguridad, por lo cual
no es muy utilizada.
  Sistemas de detección enzimática: Utilización de anticuerpos
secundarios conjugados a una enzima que cataliza una reacción con un sustrato
específico.

1. Detección colorimétrica: La enzima unida al anticuerpo secundario

desencadena una reacción con el sustrato, ocasionando un precipitado coloreado, el
cual se puede distinguir de manera visual.

2. Detección por quimioluminiscencia: La enzima unida al anticuerpo

secundario desencadena una reacción con un sustrato luminiscente, produciendo luz.

 Sistema de detección fluorescente: Utilización de Anticuerpos

conjugados a fluoróforos que produce señal por ellos mismos, sin necesidad de un
sustrato adicional.

18. ¿Cómo se asegura la especificidad de la detección en el Westernblot?

La especificidad del Western Blot se logra mediante el uso de un anticuerpo que

reconoce y se une a un epítopo único de la proteína de interés.

19. ¿Qué diferencia hay entre Westernblot, Southernblot y Northernblot?

Estos tres son métodos de transferencia o también llamada blotting, los cuales nos
permiten identificar la presencia de una banda específica en un gel de electroforesis, sea de
una proteína o de ácidos nucleicos.
Pero cada uno de estos métodos es utilizado dependiendo de lo que se vaya a
examinar: ácidos nucleicos o proteínas.

 Western Blot es utilizado en el caso de las proteínas. Se utilizan

anticuerpos marcados con radioactividad para identificar cuál es la banda que presenta
la proteína de interés a localizar.
 Southern Blot es utilizado en el caso del ADN. Se utilizan sondas de
ADN (moléculas de ADN marcadas con radioactividad y con una secuencia conocida)
 para identificar que bandas del gel contienen secuencias complementarias a la de la
sonda.

 Northern Blot es utilizado en el caso del ARN. Se utilizan sondas de

ARN (moléculas de ARN marcadas con radioactividad y con una secuencia conocida)
para identificar que bandas del gel contienen secuencias complementarias a la de la
sonda.

20. ¿Si deseara detectar una molécula específica de ADN después de un corrido
electroforético como lo haría? Menciones los pasos que realizaría, el tipo de marcaje y la
interpretación del resultado.

 Luego de hacer el corrido debemos realizar la marcación, que en este

caso se podría realizar con el sistema de teñido en gel, el cual se realizaría con una
solución de bromuro de etidio.

 Después de realizar la tinción del gel deberíamos poner la placa de gel

sobre la cámara de rayos UV o transiluminador, para analizar los resultados.

A la hora de interpretar los resultados teniendo en cuenta que la electroforesis nos

sirve para identificar fragmentos diferentes de ADN presentes en una muestra y cuán grandes
son unos con respecto a otros, podríamos decir que si la muestra solo ocupa una barra es que
ésta molécula es grande, por lo cual no es una molécula superenrollada o podríamos decir que
este ADN es circular.
Si la muestra ocupa más barras o si esta llega hasta el final de la placa de agarosa
podríamos concluir que esta contiene material superenrrolado.
Dependiendo del número de barras podríamos concluir si nuestra molécula de ADN
tiene formas de dímero CA o CCC, lineal, o monómero CA o CCC.
 Cibergrafia.
https://es.khanacademy.org/science/ap-biology/gene-expression-and-regulation/
biotechnology/a/gel-electrophoresis.

https://www.textoscientificos.com/quimica/cromatografia/capa-fina.

https://accessmedicina.mhmedical.com/content.aspx?
bookid=1473&sectionid=102743771#1118679630

https://conogasi.org/articulos/metodo-gel-de-electroforesis-agarosa/

https://www.e-allscience.com/blogs/articulos/introduccion-a-western-blot

https://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-mol/pdfs/17%20ELECTROFORESIS%20ACS
%20NUCLEICOS%20GELES%20AGAROSA.pdf

https://www.aefa.es/wp-content/uploads/2014/04/Electroforesis-capilar.pdf

https://es.khanacademy.org/science/ap-biology/gene-expression-and-regulation/biotechnology/a/gel-
electrophoresis

https://www.redalyc.org/pdf/651/65114270008.pdf

https://www.researchgate.net/figure/Figura-6-Tecnica-PCR-RFLP-Polimorfismo-de-
Longitud-de-Fragmentos-de-Restriccion-La_fig4_262487934
https://www.quimica.es/enciclopedia/
Polimorfismos_de_longitud_de_fragmentos_de_restricci%C3%B3n.html

http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0370-39082013000100008
https://accessmedicina.mhmedical.com/content.aspx?
bookid=1473&sectionid=102743771#:~:text=A%20diferencia%20de%20las
%20prote%C3%ADnas,%3B%20es%20decir%2C%20el%20%C3%A1nodo

https://diferenciario.com/endonucleasa-y-exonucleasa/

https://es.khanacademy.org/science/biology/biotech-dna-technology/dna-cloning-tutorial/a/
restriction-enzymes-dna-ligase#:~:text=Cuando%20EcoRI%20reconoce%20y
%20corta,de%20ADN%20de%20cadena%20sencilla%3A&text=De%20esta
%20manera%20se%20produce,cada%20extremo%20del%20ADN%20cortado.