Universidad Autónoma de Nuevo León.

Escuela Industrial y Preparatoria Técnica

“Álvaro Obregón”.

Fundamentos de genética.
electroforesis.

• Carrera: BT. Biotecnología

• Industrial.
• Gpo. 5C2 Aula. 149
• Turno: Vespertino
Docente: María Guadalupe
•
Lumbreras.
Fecha de entrega: 20 nov. 2023
•
 Electroforesis
¿Qué es?
La electroforesis es una técnica de laboratorio cuyo objetivo es
separar moléculas de ADN, ARN y macromoléculas o proteínas
en función de su tamaño y carga eléctrica.

Se usa una corriente de electricidad para mover las moléculas a

través de un gel o de otra matriz. Los poros de gel o de la matriz
actúan como tamiz, lo cual da oportunidad de que las pequeñas
moléculas se muevan mas rápido que las moléculas grandes,
por lo que ayuda a determinar el tamaño de las moléculas de
una muestra.
Se usan estándares ya determinados en tamaños ya conocidos
que se separan en el mismo gel para posteriormente se
comparan con la muestra.
Aplicaciones
Se utiliza en una gran variedad de aplicaciones, tales
como la medicina forense para determinar la
identidad de las personas que puedan haber tenido
una participación en el delito mediante su
vinculación de su patrón de ADN.

El proyecto del genoma humano se llevó a cabo

mediante la electroforesis capilar, el cual es un
proceso que separa el ADN en partes más
pequeñas y su separación en geles de
electroforesis permite que los patrones de A, C, T y
G sean caracterizados.
La electroforesis tiene un papel muy
importante en la investigación de proteínas y
en la investigación de mutaciones genéticas,
debido a que cuando los genes están
mutados, son con frecuencia mas o menos
largos de lo normal, por lo tanto aparecen en
el gel de electroforesis de manera diferente.

Son de gran utilidad al momento de las

pruebas diagnósticas para muchos casos.
Es una técnica básica en la investigación, de
suma importancia para la comprensión de la
función de genes y proteínas y últimamente
en el diagnostico clínico y forense.
¿Cómo FUNCIONA?
Se realiza generalmente en una especie de caja que
tiene una carga positiva y negativa en cada extremo,
produciendo que las moléculas de carga negativa se
vayan al lado con la carga positiva y viceversa.
Al momento de analizar las proteínas en un gel, en
una de estas cajas, generalmente se toma la proteína
completa para ver su tamaño y cuan grande es.
Entre mas corta sea esta proteína mas migrara en el
gel, de esta manera, las proteínas pequeñas
terminan en la parte inferior del gel, ya que tuvieron
mas libertad de movimiento, y las mas grandes
terminan quedándose en la parte superior.
En el caso del ADN, debido a que es una
molécula extremadamente grande y larga, no Imagen
se puede hacer un gel de una molécula
entera del ADN de una célula, es tan grande
que ni siquiera entraría al gel, por lo que los
científicos cortan el ADN con enzimas de
restricción, las cuales cortan el ADN en
pedazos mas pequeños y manejables, por lo
que, dependiendo del tamaño, migraran mas
o menos distancia en el gel y terminaran mas
arriba o abajo.
Todas las moléculas de ADN tienen la
misma cantidad de carga por masa, debido a
esto, la electroforesis en gel separa los
fragmentos de ADN únicamente por su
tamaño.
Nos permite ver cuántos fragmentos
diferentes de ADN están en una sola
muestra y cuan grandes son unos de otros.
De igual manera, nos permite determinar el
tamaño absoluto de un fragmento de ADN
examinándolo con una “escala” estándar de
fragmentos de tamaño conocido.
Como lo indica su nombre, esta la evidente
participación de un gel, este gel es un bloque
de un polisacárido llamado agarosa, el cual
se consigue como hojuelas secas
pulverizadas y para formar el gel, se sigue el
mismo procedimiento que en la preparación
de un medio de cultivo solido, la diferencia
es que en lugar de agua destilada, se utiliza
una solución amortiguadora (agua con
algunas sales), formando un gel ligeramente
blando.
¿Cómo se hace?
En un extremo el gel tiene ranuras llamadas “pozos”, que es
en donde se colocaran las muestras de ADN.
Antes de agregar las muestras de ADN, el gel debe
colocarse en una cámara, en el cual uno de los extremos se
conecta a un electrodo positivo y el otro a un electrodo
negativo.
El cuerpo principal de la cámara se llena con una solución
amortiguadora con sales que pueden conducir la corriente.

El extremo del gel q tiene los pozos, se coloca hacia el

electrodo negativo y el que no tiene pozos hacia el lado
positivo, que es hacia donde migraran los fragmentos de
ADN.
¿Cómo se mueven los
fragmentos de ADN en el
gel?
Una vez que el gel esta en la cámara, cada
una de las muestras se transfiere a uno de
los pozos.
Un pozo se reservar para el marcador de
peso molecular, el cual es un estándar de
referencia que contiene que contiene
fragmentos de ADN comerciales que
cubren diferentes intervalos de tamaño.
Los grupos fosfato de su esqueleto de le otorgan una
Posteriormente, se aplica energía eléctrica carga negativa a las moléculas del ADN, por lo que
(70-100 volts) a la cámara y empieza a fluir comienzan a moverse a través de la matriz de gel
la corriente a través del gel. hacia el polo positivo.
Visualización de los fragmentos de ADN.
Una vez que los fragmentos se han separado, se puede examinar el gel y
saber el tamaño de las bandas que se encuentran en el.
Cuando el gel se tiñe con un pigmento que se une al ADN y se coloca bajo
la luz UV, los fragmentos brillarán y nos permitirá ver el ADN presente a lo
largo del gel.
Al comparar una banda en una muestra con el marcador de peso molecular,
podemos examinar su tamaño aproximado.
Bibliografía
• https://es.khanacademy.org/scien
ce/ap-biology/gene-expression-
and-
regulation/biotechnology/a/gel-
electrophoresis#:~:text=La%20ele
ctroforesis%20consiste%20en%2
0aplicar,se%20separan%20unas%
20de%20otras
• https://www.genome.gov/es/genet
ics-glossary/Electroforesis