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PRUEBA DE CONTROL DE CRECIMIENTO

MICROBIANO
E. Ocampo1, A. Jimenez2, J. Villalobos3, N. Martinez4
1
Ingeniería Ambiental. Universidad Central.
Laboratorio # 1 Grupo No 1
Fecha de realización Práctica: 18/02/2022. Fecha de entrega de informe:1 /03/2022

I. INTRODUCCIÓN como por ejemplo en el caso de las manos limpias y


sucias ya que se esperaba un mayor impacto
bacteriano en una superficie sin lavar pero paso todo
Las pruebas de control de crecimiento de lo contrario, es decir se encontró en los resultados que
microorganismos consisten en la utilización de en la superficie de la mano lavada se halló mayor
diferentes técnicas de cantidad bacteriana.
laboratorio para evaluar procesos de esterilización, El objetivo central de este trabajo fue controlar en
sobre material y lugares de trabajo en microbiología, su mayor medida el crecimiento microbiano, es decir
la reducir la carga microbiana o el número de
importancia de este tipo de trabajo radica en la microorganismos viables presentes ya sea en una
verificación de resultados obtenidos en procesos superficie o en un escenario abierto, por lo general
experimentales existen varios métodos de control microbiano, pero en
y determinación de focos de contaminación. la realización de esta práctica se implementaron en su
mayoría métodos físicos, los cuales por lo general se
usan para lograr una descontaminación microbiana (la
II. OBJETIVOS desinfección y la esterilización), en este caso los
● Definir las diferencias entre los conceptos de agentes físicos más empleados en esta práctica fueron
limpieza, desinfección y asepsia. el calor y la exposición a uv, no obstante también se
● Distinguir los principales métodos de control trato con el control por medios químicos en una de
de crecimiento microbiano. nuestras pruebas, desinfectando una superficie con
hipoclorito para posteriormente tomar las respectivas
muestras, por lo general estos controles químicos
principalmente se enfocan es en inhibir el crecimiento
III. MARCO CONCEPTUAL de los microorganismos.

Para la proliferación y adecuado cultivo de


microorganismos dentro de un ambiente controlado en
laboratorio, es necesario aportar suficientes nutrientes
IV. RESULTADOS
y de condiciones fisicoquímicas idóneas para su Ambiente:
organismo. Generalmente estos procesos son llevados 15 min expuesto al ambiente.
a cabo en placas de petri con agar más nutrientes
específicos, los cuales varían según el
microorganismo que se desee aislar (Barrero, S.F.).
Adicionalmente se debe contemplar las
condiciones ambientales que afectan el desarrollo y
crecimiento de los microorganismos, dentro de estas
condiciones se encuentra la temperatura, el Ph, la
actividad en el agua y el oxígeno, debido que, a
depender el tipo de cultivo de microorganismos
específicos se deben controlar estos cuatro factores
para poder propiciar un adecuado crecimiento
(Casado, Torrico y Medina, 2012).
De esta manera, se llevó a cabo en esta práctica la
preparación de diferentes cultivos de una forma
precisa y detallada, dando como resultado algunos
cultivos inesperados que abren una amplia discusión. Imagen 1. ambiente 15 mn toma 1
Imagen 5. superficie sin limpiar toma 1

Imagen 2. ambiente 15 mn toma 2

30 min expuesto al ambiente.

Imagen 6. superficie sin limpiar toma 2

Superficie limpia:

Imagen 3. ambiente 30 mn toma 1

Imagen 7. superficie limpia toma 1


Imagen 4. ambiente 30 mn toma 2

R: Se dejó una caja petri al lado de un baño que era


bastante concurrente durante 15 mn y una en la
entrada principal de la universidad 30 mn con el fin de
observar el efecto de la exposición en un periodo de
tiempo limitado, al realizar las observaciones se
analiza que a mayor tiempo de exposición será mayor
la cantidad de colonias microbiana en el cultivo.

Superficies (mesón):
Imagen 8. superficie limpia toma 2
Superficie sin limpiar:
R: Para el análisis de la superficie en este caso el
mesón del laboratorio se efectuaron 2 casos, el
primero donde utilizamos un hisopo para recoger una
muestra del mesón sin desinfectar para luego
proceder a plaquear en la caja petri, en el segundo
caso realizamos una limpieza del lugar donde realizó
la primer muestra con un elemento químico llamado
hipoclorito para luego proceder a tomar una muestra
con un nuevo hisopo y proceder a plaquear en una
nueva caja petri, los resultados observados fueron que
la caja con muestra sin desinfectar tiene una mayor
presencia de bacterias que la caja petri que tenía la
muestra de la superficie desinfectada.
Imagen 11. Manos lavada toma 1
Tejido Humano (mano):

Mano sin lavar:

Imagen 12. Manos lavada toma 2

R: Para este análisis se realizó una muestra de


Imagen 9. Manos sin lavar toma 1 contaminación en tejido humano en este caso en una
mano,para el primer caso se utilizó un hisopo para
tomar una muestra de una mano sin lavar para luego
proceder a realizar el plaqueo en la caja petri, para el
segundo caso se utilizo un jabón desinfectante para
limpiar la zona muestreada y luego proceder a tomar
una muestra con un hisopo y nuevamente plaquear en
una caja petri, con esto logramos observar que el
jabón desinfectante logró eliminar la mayor cantidad
de bacterias que se encontraban en la mano del
individuo.

Cabina de flujo laminar:


Imagen 10. Manos sin lavar toma 2 Exposición 15 min Exposición
30 min

Mano lavada:

Imagen 13. 15 min y 30 min


R: En este experimento se dejaron 2 cajas petris Imagen 15. celular sin limpiar y celular limpio
completamente destapadas en una cabina de flujo
laminar pero con diferencias en el tiempo de R: Para este experimento se utilizó el celular de uno
exposición, una de ellas se dejó solamente 15 mn de los integrantes del grupo de laboratorio, en el
mientras que la otra se dejó expuesta 30 mn, los primer caso de muestreo se utilizó un hisopo para
resultados que se lograron observar fueron que la caja hacer un frotis sobre la pantalla del celular para luego
petri que duró expuesta 30 mn tuvo mayor cantidad de proceder a realizar el plaqueo en la caja petri, en el
bacterias que la caja que duró expuesta la mitad del segundo caso la pantalla del celular fue limpiada con
tiempo. alcohol para luego proceder a realizar con un hisopo
un froti sobre la pantalla del celular y finalmente
Agua: realizar nuevas,e4nte el plaqueo en una caja petri, los
Agua sin hervir Agua resultados observados fueron que la pantalla del
hervida celular sin limpiar con alcohol tuvieron una mayor
concentración de bacterias que la caja petri que pasó
por un proceso de esterilización por medio del alcohol
desinfectante.

Mecanismo de Tiempo de Descripción


crecimiento exposición comparativa de
antibacteriano las observaciones
(Cantidad de
Imagen 14. Agua sin hervir y agua hervida colonias, colores,
gram,etc)
R: Para este experimento se utilizó agua de florero
Ambiente 15 min y 30 mn En las 2 cajas
para realizar los muestreos necesarios, en el primer
petri se
caso se tomó 0.1 ml de agua del florero sin esterilizar
encuentran
con una pipeta pasteur para luego sembrarlos en la
colonias con una
caja petri y poderlos distribuir con la misma pipeta, en
variedad de
el segundo caso se tomaron 50 ml de agua de florero y
colores como
se procedieron a calentar hasta que llegara al punto de
naranja, blanco,
ebullición, luego se dejó enfriar durante 10 mn para
grises, etc. Se
después tomar 0.12 ml con la pipeta y proceder a
puede observar
realizar el mismo procedimiento del primer caso, los
que en la caja
resultados observados fueron que la caja petri del agua
petri que tuvo
hervida presentó menor cantidad de bacterias que el
mayor tiempo de
agua sin hervir.
exposición hay
mayor cantidad de
Superficie (celular):
Celular sin limpiar Celular bacterias que en
limpio la caja que duró la
mitad del tiempo
de exposición.

Superficie No hay tiempo de Se pueden


(mesón) exposición observar una alta
variedad de
bacterias en las
cajas petri con
colores azules,
verdes, blancas,
naranjas y cafés,
pero se Agua No hay tiempo de Podemos observar
encuentran en exposición en la caja 1 de
mayor cantidad en petri (agua sin
la caja petri que hervir), el cultivo
tiene la muestra microbiano tiene
del mesón sin un color
limpiar. amarillento y
opaco a
Tejido humano No hay tiempo de En la primera caja diferencias de la
exposición de petri (manos caja 2 (agua
sin lavar) se hervida) se puede
puede ver que hay apreciar que la
una colonia de cantidad de
bacterias casi de bacterias
todo el tamaños dismuniyeron y
de la caja de color cambio de color a
blaco, mientras un amarillo mas
que en la segunda claro con unas
caja (manos manchas blancas.
limbias) se ve una
dismunusion muy superficie No hay tiempo de Este fue uno de
significativa en la (Celular) exposición los experimento
colia bacteria pero donde podemos
el color sigue observar mayores
siendo diferencias entre
igual,blanco. las cajas petris, en
la primera caja
Cabina de flujo 15 min y 30 mn Se logra observar donde se
laminar que en la caja encuentra la
petri que duró 30 muestra del
mn en exposición celular sin
a los rayos UV limpiar, el color
hay presencia de predominante de
bacterias de color las bacterias en
cafe,verdes y este es de un color
blancos en amarillento muy
cambio en la caja fuerte con varias
que duro expuesta pecas blancas
15 mn se ven grumosas, en
bacterias de los cambio en la caja
mismos colores petri que contiene
pero en menor la muestra del
cantidad, se celular limpio, se
supone que hubo encuentra un
una mala hongo de color
anotacion en las negro bordeado
etiquetas de las de blanco y unas
cajas petri ya que pequeñas
estos no eran bacterias en otros
losresultados puntos de la caja
esperados. con colores
tan efectivo según los resultados ya que no se ve una
amarillentos.
gran diferencia con respecto a la cantidad de colonias
microbianas, por otro lado creemos que no se ve un
V. DISCUSIÓN cambio significativo ya que las cajas petri no se
sacaron de la incubadora.
Ambiente
VI. CONCLUSIONES
Al observar los resultados se puede deducir que el
tiempo de exposición influye sobre la cantidad de
● Se pudo determinar que el hipoclorito de
colonias que se pueden producir en la caja petri y
sodio reduce la reproducción microbiana ya
también el lugar donde se haya puesto, si hay mayor
que en la imagen 5 y 6 se puede evidenciar
circulación de personas habría una mayor cantidad de
en la caja de petri la reproducción microbiana
bacterias en el ambiente.
en la superficie sin limpiar es sumamente
mayor al compararla con la imagen 7 y 8 que
Superficie (mesón) se toma después de limpiarlo por 1 minuto
con el hipoclorito de sodio.
En los resultados obtenidos podemos decir que el ● Se pudo observar que a mayor tiempo de
agente de desinfección químico (hipoclorito) es muy exposición en un lugar concurrido la
efectivo ya que alcanzó a eliminar la mayor cantidad reproducción microbiana va ser mayor, ya
de bacterias que se encontraban en esta zona. que hubo mayor circulación de personas
haciendo que la cantidad de bacterias en el
Tejido Humano (Mano) ambiente aumenten.
● Se pudo determinar que el lavado de manos
Al observar los resultados obtenidos podemos decir reduce la reproducción microbiana, en donde
que el método de desinfección químico (jabón de se puede evidenciar en la imagen 9 y 10 el
manos) es poco eficiente ya que no elimina una mayor sembrado de microorganismos en el tejido
cantidad de bacterias. Por otro lado se cree que hay humano es sumamente mayor al compararla
una mala manipulación de las cajas petri lo que con la imagen 11 y 12 lo que indica que el
provocaría una alteración en sus resultados. lavado de manos con el jabón desinfectante
redujo la reproducción microbiana.
Cabina de flujo laminar (UV) ● Gracias a este laboratorio pudimos observar
la interacción de estos controles y el cómo se
ve afectada la reproducción bacteriana por la
Al observar los resultados podemos decir que se hizo
influencia de distintos factores como la
una mala manipulación de las cajas radiación uv, temperatura y zonas
petri, ya que se esperaba que al tener una mayor contaminadas.\
exposición a los rayos UV se elimina
una mayor cantidad de bacterias o puede que se hayan
confundido las etiquetas y por eso varían los VII. PREGUNTAS
resultados.
1. Cuál es el efecto de las radiaciones UV sobre los
Agua microorganismos?

Al observar los resultados podemos decir que el RTA:


agente antimicrobiano físico (calor) es un método
eficiente pero no del todo. Otra observación es que La radiación UV provoca que las bacterias, los virus y
también puede que estos resultados no fueran los los protozoos se vuelven incapaces de reproducirse e
esperados por una mala manipulación a la hora de infectar, al ser expuestos a las longitudes de onda
germicidas de la luz UV. Se ha logrado demostrar que
plaquear o esterilizar la pipeta.
la luz UV es bastante eficaz frente a microorganismos
patógenos.(Trojan Technologies Gore, 2020)
Superficie (celular)
De igual manera en las observaciones del laboratorio
Al observar los resultados obtenidos podemos ver que realizado se puede deducir que la caja petri que estuvo
el celular es un objeto que contiene una cantidad de durante menos tiempo a la radiación UV presentó una
bacterias exorbitante. Al implementar el método de mayor abundancia microbiana, es decir una mayor
desinfección químico (alcohol) observamos que no es
reproducción. claramente obviando que la marcación| bacteriana puede ser de dos tipos: intrínseca o
de las cajas fue errónea adquirida.

2. Cómo se relaciona con el factor del tiempo RTA:

RTA: A mayor exposición de rayos UV va


disminuyendo la capacidad de reproducción en el VIII. REFERENCIAS
medio de cultivo.
● Barrero, L. (S.F.) Microbiología clínica.
Síntesis Madrid, España 2. Recuperado de:
3. ¿Qué relación puede observar entre el tipo de https://www.sintesis.com/data/indices/97884
químico utilizado? 90773185.pdf.
● Bernedo, R. L. J. (2020). Radiación
ultravioleta-c para desinfección bacteriana
RTA:
(coliformes totales y termotolerantes) en el
tratamiento de agua potable. Scielo.
4. Cual podría ser la diferencia entre trabajar con las http://www.scielo.org.pe/scielo.php?
manos sin lavar y limpias? script=sci_arttext&pid=S2313-
29572020000100068#:%7E:text=El
RTA: Trabajar con las manos limpias provoca una %20efecto%20germicida%20de%20la,.
gran diferencia, esto es provocado por la presencia de %20al%2C%20(2011).
asepsia, lo que es la desinfección de un espacio. Se ● Casado, M., Torrico, G., & Medina, M.
(2012). MEDIOS DE CULTIVO EN UN
entiende por desinfección: una técnica de saneamiento
LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA.
que tiene como finalidad la destrucción de Recuperado de:
microorganismos patógenos en todos los ambientes en https://libroslaboratorio.files.wordpress.com/
que puedan ocasionar un grado de nocividad a la 2012/09/medios-de-cultivo-en-un-
integridad de la persona, mediante la utilización de laboratorio-de-microbiologc3ada.pdf.
agentes que se basan mayormente en químicos.
(Rascón Lizeth, 2014).

5. ¿A qué se deben las variaciones entre el agua no


tratada y la misma muestra de agua luego de ser
calentada hasta ebullición?

RTA: las variaciones de esta prueba se deben a qué


un agua sin tratar, es decir sin esterilizar va tener un
mayor número de bacterias ya que está expuesto a un
factor ambiente el cual presenta un escenario rico de
nutrientes para las bacterias; por otro lado se tiene un
ambiente distinto es decir una fuente de agua hervida,
si bien hervir el agua es una forma de esterilización no
quiere decir que este ambiente esté exento de
bacterias, por ende se ve una variación entre estos dos
cultivos, en dónde se ve mayor crecimiento de
bacterias en uno que en otro.

6. Porque algunos microorganismos mueren y otros


sobreviven a un mismo tratamiento?

Por lo general algunos microorganismos son mucho


más resistentes a diferentes escenarios, principalmente
se debe a las transferencia de adn, lo cual permite que
una bacteria se adecue más a su entorno y sea más
fuerte de destruir. Por lo general esta resistencia

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