UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA
“Dr. Wilfredo Erwin Gardini Tuesta”

ACREDITADA POR SINEACE

RE ACREDITADA INTERNACIONALMENTE POR RIEV

PATOLOGIA CLINICA Y MEDICINA

TRANSFUSIONAL

PRACTICA DE LABORATORIO: ESTUDIO DEL

LIQUÍDO CEFALORRAQUÍDEO EN
MENINGITIS

SEMESTRE 2021-2
SEDES LIMA –ICA -CHINCA
Índice
• Objetivos: El alumno reconoce el aporte del laboratorio para el
diagnostico de los procesos infecciosos del SNC
• Introducción
• Definición de términos
• Estudio del Líquido cefalorraquídeo, indicaciones, test
diagnósticos e interpretaciones.
Objetivos
• Reconocer LCR normal vs patológicos de etiología viral,
bacteriana.
• Observar imágenes de tinción de Gram de diferentes
patógenos frecuentes, así como tinta china.
• Interpretar las pruebas utilizadas en el estudio de LCR.
Introducción
• El estudio del líquido cefalorraquídeo (LCR) para el diagnostico
etiológico en las meningitis. Las etapas del estudio:
• examen microscópico/citologico con recuento celular: leucocitos,
hematíes.
• Bioquimico: dosaje de proteínas y glucosa en el LCR
• Microbiologico/bacteriológico dado por la tinción de Gram,
• Inmunoserologicos: pruebas de látex, coaglutinacion para la
búsqueda de las bacterias más frecuentes en la etiología de las
meningitis.
• Los cultivos que nos aislan al agente etiológico y mas aun la
sensibilidad para elegir el tratamiento correcto.
Consideraciones Pre- analiticas
• Muestras frescas, recién obtenidas: para estudio del LCR es
que la muestra obtenida debe referirse de inmediato al
laboratorio para su procesamiento en tiempo máximo de una
hora
• Distribución en el orden de los tubos al momento de realizar la
toma de muestra que en gran parte es obtenida por punción
lumbar.
• Tubo 1: Estudios bioquímicos,
• Tubo 2: estudios microbiológicos y
• Tubo 3: recuento celular.
Consideraciones Pre- analiticas
• Ante la sospecha de algún germen de difícil
crecimiento o si el paciente viene recibiendo
antibióticos en donde es poca la probabilidad de
obtener el agente etiológico por los cultivos se
tendrá que evaluar la posibilidad de estudios
moleculares a través de la metodología de
reacción en cadena de la polimerasa en tiempo
real.
 Definición de términos
• Líquido cefalorraquídeo: representa 10% del volumen
intracraneal. Protege al cerebro y médula espinal; transporta
nutrientes y metabolitos, además de favorecer la distribución de
fármacos cuyo blanco terapéutico es el sistema nervioso
central. El LCR es producido principalmente por plexos
coroideos y reabsorbido en las vellosidades aracnoideas.
• Punción lumbar: consiste en la introducción de un cateter guja
en el espacio subaracnoideo del saco dural lumbar. Permite
obtener líquido cefalorraquídeo (LCR) con fines diagnósticos o
la administración de fármacos con fines terapéuticos.
• Generalmente se realiza entre la 3ra y 4ta vértebra lumbar.
26/10/2021
Conservación de la muestra

Disponible en: https://www.idsociety.org/practice-guideline/laboratory-diagnosis-of-infectious-diseases/

Conservación de la muestra

Disponible en: https://www.idsociety.org/practice-guideline/laboratory-diagnosis-of-infectious-diseases/

• Leucocitos (GB):
• Adultos: 0-5 células/ul Valores de referencia
• Niños: 0-30 células/ul
• Diferencial:
• Mononucleares: 90-100%
• Polimorfonucleares:0-10%
• Glóbulos rojos (GR): 0-5 células/ul
• Glucosa: 50 – 80 mg/dl
60% del valor del plasma
Relación Glucosa LCR/glucosa plasma = 0.3 – 0.9
• Proteínas: 15 – 45 mg/dL (0.15-0.45 g/L)
 Aspecto físico

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 Link de videos: estudio de examen
directo, recuento celular
• CITOQUIMICO: es un estudio del examen directo:
recuento de leucocitos y hematíes, deberá revisar el
siguiente video para la visualización del procedimiento
en donde la muestra es colocada en una cámara de
Neubauer.

• Se tiene el link:
https://www.youtube.com/watch?v=grz93Q0uGII
 Tincion
GRAM

Para visualizar este procedimiento, revisar el siguiente link:

26/10/2021 https://www.youtube.com/watch?v=s9fNFYUOKzg
 Diferencias de Gram (+) y (-)

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 Imágenes de Tinción de Gram

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 Aspecto y tinción Gram
LCR purulento

Diplococos Gram negativos

intracelular Neisseria meningitidis

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 Caso 1
• Paciente mujer 15 años estudiante, quien presenta fiebre, rash
petequial y cefalea. Se realiza el Gram:

Diplococo Gram negativo:

Neisseria meningitidis

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 Caso 2
• Paciente 65 años con dx mieloma múltiple que presenta
cefalea, fiebre y signos meníngeos. Se tiene el Gram:

Diplococo lanceolado Gram

positivo:
Streptoccocus pneumoniae

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 Caso 3
• Niño 3 años, sin vacunaciones, presenta fiebre, cefalea y
somnolencia. Se tiene el Gram:

Cocobacilo gram negativo:

Haemophilus influenzae

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Tinción Gram: Caso 4
Paciente mujer 60 años, diabética, ingresa con trastorno del sensorio, signos
meníngeos. Se realiza la tinción Gram:

Bacilos Gram positivos:

Listeria monocytogenes
Observación de Cápsula
 Látex de Ag o de Ab
• El antígeno contenido en el espécimen comprobado se identifica utilizando
partículas de látex recubiertas con anticuerpos homólogos específicos. En presencia
del antígeno homólogo, las partículas de látex se aglutinan. En ausencia del
antígeno, permanecen en una suspensión homogénea.
Rendimiento de las técnicas rápidas en LCR
 Prueba de latex para Dx de Streptococcus
pneumoniae
• Pruebas látex, en este caso se muestra para Streptococcus pneumoniae y sus
diferentes serotipos, en donde se observa la aglutinación lo que nos indica
reacción del antígeno anticuerpo, lo mismo aplica para el uso de otras bacterias
como Haemophilus influenzae y Neisseria meningitidis.

• Ver el link:
https://www.youtube.com/watch?v=CNeqmv55zX0
 Desarrollo de Cultivos
• Colonias de S. pneumoniae
• A.sangre:
• Colonias umbilicadas, brillantes.
• Produce hemólisis tipo alfa
• 4. Sensible a optochin. (P)

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 Cultivos
• Colonias de S. agalactiae
• Colonias grandes/hemólisis pequeña.
• Hemólisis beta (total)

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Estudios de LCR. Caso clinico
• Aspecto: Turbio •Proteínas: 620
• Color: Xantocrómico mg/dL
• Leucocitos: 800 mm3 •Glucosa: 16
• Hematíes: 5 mm3 mg/dL
• PMN: 90%
• MN: 10%
Caso clinico • ¿Requiere prueba para látex
para estudio de neumococo,
• Tinción de Gram: Haemophilus influenzae,
meningococo?
• Si en caso el paciente recibió
antibióticos, no se observa
tinción de Gram, una prueba
alternativa sería…
Estudio de LCR. Caso clinico
• Aspecto: Cristal de roca • Proteínas: 80
• Color: Transparente mg/dL
• Leucocitos: 120 mm3
• Glucosa: 55 mg/dL
• Hematíes: 10 mm3
• PMN: 30%
• MN: 70%
 Prueba molecular
• Streptococcus pneumoniae: no detectable
• Haemophilus influenzae: no detectable
• Listeria monocytogenes: no detectable
• Escherichia coli K1: no detectable
• Neisseria meningitidis: no detectable
• Streptococcus agalactiae: no detectable
• Herpes zoster: no detectable
• Herpes simple tipo 1: no detectable
• Herpes simple tipo 2: no
detectable
• Virus Epstein Barr: no detectable
• Enterovirus: Positivo
• Citomegalovirus: no detectable
• Virus herpes humano 6: no
detectable
• Parechovirus humano: no
detectable
• Criptococcus neoformans/gattii:
no detectable
PCR multiplex
 Referencias Bibliográficas

• Poplin V, Boulware DR, Bahr NC. Methods for rapid diagnosis of meningitis
etiology in adults. Biomark Med. 2020 Apr 9. doi: 10.2217/bmm-2019-0333.
• McPherson R, Pincus M. Henry’s Clinical Diagnosis and Management by
Laboratory Methods. 22nd Ed.
• Insertos de los reactivos de Filmarray: Panel de meningitis/encefalitis.
• Inserto de los reactivos Xpert TBC Ultra y Enterovirus del equipo GeneXpert.
• Thwaites G et al. British Infection Society guidelines for the diagnosis and
treatment of tuberculosis of the central nervous system in adults and children. J
Infect. 2009 Sep;59(3):167-87. doi: 10.1016/j.jinf.2009.06.011. Epub 2009 Jul 4.
• A Guide to Utilization of the Microbiology Laboratory for Diagnosis of Infectious
Diseases: 2018 Update by the Infectious Diseases Society of America and the
American Society for Microbiology. Clinical Infectious Diseases,Volume 67, Issue
6, 31 August 2018, Pages e1–e94, https://doi.org/10.1093/cid/ciy381

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