INDICE

Objetivos…………………………………………………………….…….2
Marco Teórico……………………………………………………….…....3
Marco Metodológico……………………………………………………...5
Pruebas de Identificación…………………………………………….….9
Bibliografia………………………………………………………………..13
Muestra de cálculo………………………………………………….……14

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 OBJETIVOS

Objetivo General
 Realizar análisis cualitativo de los azucares reductores para lograr su
reconocimiento utilizando la prueba de fehling, benedict y la prueba del
nitrato de plata.

Objetivos Específicos
 Fundamentar todas las pruebas globales y mecanismos de reacción.
 Distinguir entre azucares reductores y no reductores por medio de la
reacción de Benedict.

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 MARCO TEORICO

Los azúcares reductores son aquellos azúcares que poseen su grupo carbonilo
(grupo funcional) intacto, y que a través del mismo pueden reaccionar como
reductores con otras moléculas que actuarán como oxidantes. Esta propiedad
permite determinar la concentración de una disolución de azúcar midiendo la
cantidad de agente oxidante que es reducido, como ocurre en la determinación del
contenido de glucosa en muestras de sangre u orina para detectar la diabetes
mellitus.

Los azúcares que dan resultados positivos con las soluciones de Tollens, Benedict
ó Fehling se conocen como azúcares reductores, y todos los carbohidratos que
contienen un grupo hemiacetal o hemicetal dan pruebas positivas. Los
carbohidratos que solo contienen grupos acetal o cetal no dan pruebas positivas
con estas soluciones y se llaman azúcares no reductores.

Los azúcares reductores provocan la alteración de las proteínas mediante la

reacción de glucosilación no enzimática también denominada reacción de Maillard
o glicación. Esta reacción se produce en varias etapas: las iniciales son
reversibles y se completan en tiempos relativamente cortos, mientras que las
posteriores transcurren más lentamente y son irreversibles. Se postula que tanto
las etapas iniciales como las finales de la glucosilación están implicadas en los
procesos de envejecimiento celular y en el desarrollo de las complicaciones
crónicas de la diabetes.

La glucosa es el azúcar reductor más abundante en el organismo. Su

concentración en la sangre está sometida a un cuidadoso mecanismo de
regulación en individuos sanos y, en personas que padecen diabetes, aumenta
sustancialmente. Esto lleva a que éste sea el azúcar reductor generalmente
considerado en las reacciones de glucosilación no enzimática de interés biológico.
Sin embargo, cualquier azúcar que posea un grupo carbonilo libre puede
reaccionar con los grupos amino primarios de las proteínas para formar bases de
Schiff.

La reactividad de los distintos azúcares está dada por la disponibilidad de su grupo

carbonilo. Se sabe que la forma abierta o extendida de los azúcares no es muy
estable, a tal punto que, por ejemplo, en la glucosa representa sólo el 0,002 %.
Las moléculas de azúcar consiguen estabilizarse a través de un equilibrio entre
dicha forma abierta y por lo menos dos formas cerradas (anómeros cíclicos) en las
que el grupo carbonilo ha desaparecido. En 1953, el grupo de Aaron Katchalsky,
en el entonces recientemente creado Instituto Weizmann de Israel, demostró que
existe una correlación entre la velocidad de la reacción de glicación y la proporción
de la forma abierta de cada azúcar.

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La sacarosa es un disacárido que no posee carbonos anoméricos libres por lo que
carece de poder reductor y la reacción con el licor de Fehling es negativa.

Diferencia entre azucares reductores y no reductores

Los reductores son aquellos azúcares que poseen su grupo carbonilo (grupo
funcional) intacto, y que a través del mismo pueden reaccionar como reductores
con otras moléculas ya que al menos tienen un -OH hemiacetálico libre a la
reacción con reactivo de Fehling y la Reacción de Benedict. a la reacción con
reactivo de Tollens, a la Reacción de Maillard. Es decir que presentan equilibrio
con la forma abierta, presentan mutorrotación, (cambio espontáneo entre las dos
formas cicladas α (alfa) y β (beta)), o decir que forma osazonas. Los azúcares No
Reductores son aquellos que cuando 2 monosacáridos iguales o diferentes se
unen forman un disacárido, los disacàridos por condensación liberan una molécula
de agua y son azúcares no reductores se unen por enlaces glicosídicos de tipo
Alfa Beta ya que el grupo Oxidrilo ( OH ) de una hexosa se combina con el grupo
Aldehído ( CHO ) de otra hexosa liberando 1 molécula de H20.

Para la determinación de azúcares reductores se suelen utilizar los siguientes

reactivos:

1. La solución de Fehling, que contiene un complejo de ion cúprico y ácido

tartárico, oxida los aldehídos a una sal de ácido carboxílico formándose un
precipitado de óxido cuproso (color rojo).
2. La solución de Benedict, complejo de ion cúprico y ácido cítrico, reaccióna
de un modo similar.
3. El reactivo de Tollens, preparado haciendo reaccionar una solución de
nitrato de plata con hidróxido amónico, reacciona oxidando a los aldehídos
a sales de ácidos carboxílicos, pero no a las cetonas, y formando un espejo
de plata. Los espejos de plata se fabrican por un proceso semejante.
4. El reactivo de Schiff (incoloro), obtenido al tratar la fucsina (de color
magenta) con ácido sulfuroso, reacciona con los aldehídos y reaparece el
color magenta.

Estos ensayos químicos son positivos para los aldehidos y negativos para las
cetonas

Monosacáridos reductores: Los monosacáridos pueden reducir diversos agentes

oxidantes, como el ion cúprico (Cu2+), el peróxido de hidrógeno (agua oxigenada),
y el ferricianuro

La glucosa es el azúcar reductor más abundante en el organismo. Su

concentración en la sangre está sometida a un cuidadoso mecanismo de
regulación en individuos sanos y, en personas que padecen diabetes, aumenta
sustancialmente. Esto lleva a que éste sea el azúcar reductor generalmente
4
considerado en las reacciones de glucosilación no enzimática de interés biológico.
Sin embargo, cualquier azúcar que posea un grupo carbonilo libre puede
reaccionar con los grupos amino primarios de las proteínas para formar bases de
Schiff.

Disacaridos: Los disacáridos más comunes en los seres vivos, como la maltosa,
la lactosa o la celobiosa, son todos azúcares reductores (excepto la sacarosa), ya
que al menos tienen un -OH hemiacetálico libre (grupo -OH adyacente al enlace
del oxígeno), por lo que dan positivo a la reacción con reactivo de Fehling, a la
reacción con reactivo de Tollens, a la Reacción de Maillard y la Reacción de
Benedict. Otras formas de decir que son reductores es decir que presentan
equilibrio con la forma abierta, presentan mutarrotación (cambio espontáneo entre
las dos formas cicladas (alfa) y β (beta)), o decir que forma osazonas.

La sacarosa, por el contrario, al no contener ningún átomo de carbono anomérico

libre al estar ambos implicados en el enlace α (1->2), no funciona como azúcar
reducto

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 MARCO METODOLOGICO

REACCIÓN DE FEHLING

Procedimiento:

1. Mezclar en un tubo de ensayo:

Solución de Fehling A
(CuSO4) 4 ml Solución
Fehling B (Tartrato/NaOH) 4
ml
2. Agitar y calentar a ebullición (aproximadamente 10 min).
3. Añadir sacarosa, y hervir durante 15 minutos.
Observar si precipita el Cu2O con lo cual se confirma la prueba.
II. REACCIÓN DE BENEDICT

Procedimiento:

1. Preparar el reactivo de Benedict

2. Calentar a ebullición.
3. Si la reacción es positiva aparece un precipitado rojizo, aunque si la cantidad
de azúcar es pequeña puede dar color anaranjado o verdoso según las
condiciones.
4 Observar los cambios en color y de la forma del precipitado

II. PRUEBA DEL ESPEJO DE PLATA

Procedimiento:

1. Preparar el reactivo: observar el procedimiento del instructor.

2. Agregar azúcar en un tubo de ensaye; agregarle un ml de agua.
3. Luego agregar el reactivo preparado de diamin plata.
4. Calentar en baño María y al cabo de 20 minutos observar la formación
por reducción del ion plata a plata metálica que se refleja en la superficie
interna del tubo al exterior del mismo.

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 DIAGRAMA DE FLUJO

Inicio de la Práctica

Rotular los tubos con el nombre de las pruebas

Añadir solución de azúcar o azúcar

sacarosa, mezclar y calentar hasta
ebullición

Observar los cambios en color y de la

forma del precipitado

Pida ayuda
de su
instructor
de
Preparar el reactivo de Benedict calentar
hasta ebullición.

Agregar azúcar en un tubo de ensayo; y

luego agregar el reactivo preparado de
diamin plata

Anotar las observaciones

Realizar los procedimientos para las

pruebas diferentes de la práctica

Fin de la Práctica
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 PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN

Prueba de Fehling

El reactivo de Fehling se utiliza para la detección de sustancias reductoras,

particularmente azúcares reductores. Se basa en el poder reductor del grupo
carbonilo de un aldehído que pasa a ácido reduciendo la sal cúprica de cobre (II),
en medio alcalino, a óxido de cobre (I). Éste forma un precipitado de color rojo.
Prueba de Benedict

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Reacción de Benedict (detecta la presencia de azúcares reductores) Se basa en
la reducción de Cu2+ a Cu+ en medio básico débil. Aunque es similar a la
reacción de Fehling, el medio básico débil y el estabilizante (citrato sódico)
utilizados hacen que este test sea más sensible y estable.
Prueba del espejo de plata

El fundamento de la prueba sirve para el reconocimiento de monosacáridos. Los

monosacáridos son capaces de reducir, en medio amoniacal, el ión Ag+ a Ag
(plata metálica), que se deposita en las paredes del tubo

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 BIBLIOGRAFIA

1. Lehninger. “Principios Bioquímicos” Quinta edición. Editorial Omega. España

2007 pgs 121,130.

2. Robert Horton “Principios Bioquímicos” Cuarta edición. Editorial Pearson. Trad

México 2008. Pgs 74-96

3. Azúcar reductor.Recuperado 4 de diciembre del 2019

https://es.wikipedia.org/wiki/Az%C3%BAcar_reductor

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 MUESTRA DE CÁLCULO

1.Molaridad

Ml solt
Molaridad=
Vol Disl

Dónde:

Ml solt= Moles del soluto

Vol Disl= Volumen del disolvente

2. Análisis de error

|DE| - DT
% error = x 100 (Ecuación No. 4)
DT

Dónde:
DE: Dato experimental (medición en laboratorio)
DT: Dato teórico (Datos según los cálculos)

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