PRACTICA DE LABORATORIO No 1

RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS

RAFAEL ARLEY VIEDA

20131181034
MARIA DEL PILAR SANTACRUZ GIL
20131181017

BIOQUIMICA
DAYSI MARGOTH BELTRAN CEPEDA

UNIVERSIDAD DISTRITAL FRANCISCO JSE DE CALDAS

FACULTAD DEL MEDIO AMBIENTE Y RECURSOS NATURALES
INGENIERIA SANITARIA
BOGOT D.C
2014

RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS

RESUMEN

ABSTRACT

Los carbohidratos son biomolculas, que

contienen es sus estructuras grupos
funcionales como aldehdos o cetonas
polihidroxilados. Los carbohidratos al
contener grupos carbonilo e hidroxilo
presentan propiedades y comportamiento
qumico tpico de estos dos grupos
funcionales,

los

carbohidratos

se

clasifican generalmente en monosacridos

Carbohydrates

are

biomolecules

that

contain functional groups are structures as

polyhydroxy

aldehydes

or

ketones.

Carbohydrates to contain carbonyl and

hydroxyl groups present typical chemical
properties and behavior of these two
functional

groups,

carbohydrates

are

generally classified into monosaccharides

y polisacridos (simples y complejos), los

and

monosacridos son carbohidratos que no

complex),

se pueden descomponer a compuestos

carbohydrates

ms simples por medio de hidrolisis, estos

decomposed into simpler compounds by

a su vez se subdividen por el nmero de

hydrolysis, these in turn are divided by

tomos

que

the number of carbon atoms in the group

containing aldoses (aldehyde) and ketoses

de

contengan

carbono
en:

grupo

aldosas

(aldehdo)

polysaccharides

(simple

and

monosaccharides
that

not

(ketone);

carbohidrato que al hidrolizarse da dos o

carbohydrate

ms

gives two or more monosaccharide units.

monosacridos

presentan

reacciones

The

polysaccharide
which

upon

monosaccharides

is

be

cetosas (cetona). Un polisacrido es un

unidades de monosacridos .Los

can

are

hydrolysis
present

caractersticas de xido-reduccin como

characteristic reactions as redox reactions

las reacciones con los reactivos de Tollens

with

y Fehling, la formacin de osazonas y la

osazones

formacin de furfurales.

furfural.

Palabras

claves:

propiedades

qumicas,

reacciones caractersticas.

carbohidratos,
clasificacin,

reagents

Tollens

formation

Keywords:

and

Fehling,

and training of

carbohydrates,

chemical

properties, classification, characteristic

reactions.

OBJETIVOS

convierten en aqullos, un carbohidrato

que no es hidrolizable a compuestos ms

Objetivo general
Identificar

mediante

caractersticas
qumico

simples, se denomina monoscarido. Un

reacciones

carbohidrato que por hidrlisis da dos

comportamiento

molculas de monosacrido se llama

los

carbohidratos,

disacrido, mientras que el que da muchas

en

monosacridos

molculas de monosacrido por hidrlisis

el

de

caracterizndolos

(aldosas o cetosas), en disacridos o

polisacridos.

es un polisacrido.
Un monosacrido se puede clasificar ms

Objetivos especficos

precisamente:

si contiene

un grupo

reacciones

aldehdo se le conoce como aldosa; si

cualitativas los monosacridos de los

contiene una funcin cetona es una

disacridos y polisacridos.

cetosa. Segn el nmero de tomos de

Diferenciar

mediante

Reconocer y analizar las reacciones que

se llevan en cada una de las pruebas de
Molish, Azcares reductores, Barfoed,
Bial,

Seliwanoff,

Prueba

del

cido

carbono que contenga, se conoce el

monosacrido

como

triosa,

tetrosa,

pentosa, hexosa, y as sucesivamente.

Los

carbohidratos

que

reducen

los

msico, Formacin de osazonas y Prueba

reactivos de Fehling (o Benedict) y

de Wolhk en los carbohidratos.

Tollens, se conocen como azcares

Reconocer la capacidad oxido-reductora

de los monosacridos.

reductores. Todos los monosacridos,

sean aldosas o cetosas, son azcares
reductores, como lo son tambin la

Identificar los carbohidratos en una

mayora de los disacridos, siendo una

muestra problema.

excepcin importante la sacarosa (azcar

de mesa comn), la que no es reductora.

MARCO TEORICO

MATERIALES Y REACTIVOS

son

Una gradilla para tubos de ensayo

polihidroxialdehdos, polihidrixicetonas o

Tubos

Los
compuestos

carbohidratos
que

por

hidrolisis

se

de

ensayo

(1=

Blanco-

Glucosa- y 2= Patrn-Fructosa)

Alfa Naftol 10%. Formula: C10H7O

Galactosa 1%. Formula: C6H12O6

cido

Reactivo de Benedict. Formula:

sulfrico

concentrado.

Formula : H2SO4

Solucin

de

almidn.

CuSO4.5H2O/ CNa2O3/ CKNS

Formula:

C6H10O5

cido clorhdrico. Formula: HCl

Reactivo de lugol. Formula: I2 (1%)

en equilibrio con KI (2%) en agua
destilada.

Sacarosa. Formula : C12H22O11

Fructosa. Formula: C6H12O6

Lactosa. Formula: C12H22O11

Reactivo de Fehling.

RESULTADOS

Tabla 1 Reconocimiento de Carbohidratos Prueba de Molish

Compuesto
Sacarosa

PRUEBA DE MOLISH ( C10H7O/ H2SO4 )

Caractersticas

Resultado

C12H22O11

Se observ la aparicin de dos capas, la

primera de color violeta y un precipitado de
color rojo

Positivo

Fructosa
C6H12O6
Se observ la aparicin de dos capas, la
primera de color violeta, el precipitado de
color rojo pero en mayor cantidad que la
presentada por la sacarosa

Positivo

Tabla 2 Reconocimiento de Carbohidratos Prueba de Fehling

Compuesto
Fructosa
C6H12O6
Sacarosa

PRUEBA DE FEHLING
Caracterstica
Precipitado rojo

Resultado
Positivo

Precipitado rojo

C12H22O11

Tabla 3 Reconocimiento de carbohidratos prueba de lugol o yodo

Negativo

PRUEBA DE LUGOL : I2 (1%) en equilibrio con KI (2%) en agua destilada

Compuesto
Caracterstica
Resultado
Almidn
Coloracin caf-rojiza Positivo
C6H10O5
oscura

Tabla 4 Reconocimiento de carbohidratos reactivo de Tollens

Compuesto
Fructosa
C6H12O6

PRUEBA CON EL REACTIVO DE TOLLENS

Caractersticas
Resultado
Coloracin rojiza
Positivo

Sacarosa
C12H22O11

se mantiene la coloracin
azul

Negativo

Tabla 5 Reconocimiento de carbohidratos reactivo de Benedict

PRUEBA CON EL REACTIVO DE BENEDICT
Caractersticas
resultado
No se produjo ningn Negativo
C12H22O11
cambio de coloracin

Compuesto
Sacarosa

Galactosa
C6H12O6

Se
produjo
un Positivo
cambio de coloracin
del azul claro a
rosado evidenciando
el
proceso
de
reduccin

Tabla 6 Reconocimiento de carbohidratos- prueba de Barfoed

Compuesto
Sacarosa

PRUEBA DE BARFOED
Caractersticas
Coloracin azul

Resultado
Negativo

Coloracin azul

Negativo

C12H22O11

Fructosa
C6H12O6

Tabla 7 Reconocimiento de carbohidratos- prueba de Seliwanoff

Compuesto
Sacarosa
C12H22O11

Fructosa
C6H12O6

PRUEBA DE SELIWANOFF
Caractersticas
Resultado
Coloracin rosada
Positivo
clara

Coloracin rosada
intensa

Positivo

Tabla 8 Reconocimiento de carbohidratos- prueba de Bial

C12H22O11

PRUEBA DE BIAL
Caractersticas
Coloracin anaranjado
claro

Fructosa
C6H12O6

Coloracin anaranjado
oscuro

Compuesto
Sacarosa

Resultados
Negativo

Negativo

Tabla 9 Reconocimiento de carbohidratos- prueba del cido Msico

Compuesto
Galactosa

PRUEBA DEL CIDO MSICO

Caractersticas
Resultado
Se forman los cristales Positivo

C6H12O6

Sacarosa
C12H22O11

No se forman cristales

Negativo

Tabla 10 Reconocimiento de carbohidratos- formacin de osazonas

Compuesto
Galactosa
C6H12O6

Fructosa
C6H12O6

FORMACION DE OSAZONAS
Caractersticas
Resultado
Coloracin amarilla y
Positivo
cristales del mismo
color

Coloracin amarilla
pero no aparecen
cristales

Negativo

Tabla 11 Reconocimiento de carbohidratos- Prueba para disacridos

Tubo con
HCl

PRUEBA PARA DISCARIDOS SACAROSA

Caractersticas
Resultado
Coloracin amarilla
Positivo

NaOH

Coloracin ligera rosada

Negativo

H2O

Traslucido

Negativo

Tabla 12 Reconocimiento de carbohidratos- Prueba para disacridos

Compuesto
Lactosa

PRUEBA DE WOLHK
Caractersticas
Ligera capa superior rojiza

Resultado
Positiva

Traslucido

Negativo

C12H22O11

Fructosa
C6H12O6

ANALISIS DE RESULTADOS

Ensayo

Prueba de

La reaccin de la fructosa con el H 2SO4 concentrado, forma

Molisch

un furfural o un derivado del furfural, que se reconoce con

el alfa naftol por formacin de un color purpura violeta, el
H2SO4

concentrado

descompone

el

carbohidrato

presentndose una hidrolisis en los enlaces glucosidicos.

Este tipo de reaccin es de adiccin nucleofilica y de tipo
SN1, en el cual el H2SO4 concentrado presenta una
hidrolisis de los enlaces glucosidicos y con el alfa naftol se
precipitan para dar una coloracin violeta que es el positivo
para los hidratos de carbono.

Ilustracin 1. Reaccin del Monmero con el

H 2 S O4

concentrado

Ilustracin 2 Reaccin del derivado furfural con el Alfa

Reactivo de
Benedict

naftol
En este ensayo se identifican los azucares reductores, todos los monmeros
En la reaccin con el reactivo de Benedict, la galactosa al ser una aldosa
reduce el complejo cprico, desapareciendo el color azul intenso, por un
color rojo ladrillo que el cual es positivo para este ensayo.
La sacarosa es la unin por los dos extremos reductores de la glucosa y la
fructosa, por lo consiguiente no podr efectuar esta reduccin del ion

cprico.

Reactivo de
Fehling

Ilustracin 3 Reaccin de la glucosa con el Reactivo de Benedict

En presencia de agentes oxidantes, iones metlicos como
el

Cu+2 , los monosacridos presentan varias reacciones

de oxidacin. Presentndose un cambio de coloracin a rojo

ladrillo indicando la presencia de un azcar reductor, Para
el ensayo con la sacarosa al ser esta la unin de los
extremos nucleofilicos de la glucosa y la fructosa no posee
iones libres para formar la reaccin de reduccin.

Ilustracin 4 Reaccin de los Carbohidratos con el Reactivo

Reactivo de

de Fehling
El ensayo con el reactivo de Tollens es una reaccin de

Tollens

oxidacin, en la cual se identifica a las aldosas, ya que las

cetosas no reaccionan. En la reaccin el reactivo de Tollens
se oxida totalmente, y genera el espejo de plata, ya que el
ion de plata se reduce a plata elemental. Sin embargo la
fructosa si reduce el reactivo de Tollens, esto se debe a que
la fructosa se isomeriza fcilmente en una mezcla de
aldosas (glucosa y manosa) en una disolucin bsica por

una serie de desplazamiento tautomericos ceto-enol1.

Ilustracin 5 Reaccin de los Carbohidratos con el Reactivo

de Tollens
Prueba de

El reactivo de Barfoed es una prueba para distinguir entre monosacridos y

Barfoed

disacridos, en nuestro ensayo el resultado no fue representativo ya que la

sacarosa que trabajamos no era la indicada, para esta prueba.
Tericamente la velocidad de reaccin al reducir el ion

Cu+2 , por parte

del monmero debe ser ms rpida que la del disacrido, Esta reaccin est
limitada al tamao de la molcula, siendo la reaccin de los monmeros
mucho ms rpida que los disacridos

Prueba de

Ilustracin 6 Reaccin de los Carbohidratos con el Reactivo de Barfoed

El yodo se introduce en las espiras de la molcula del

lugol

almidona, por lo cual este toma una coloracin oscura. El

almidn es coloreado de azul en presencia de Lugol, debido
a una adsorcin o fijacin del I- 3sobre las unidades de
glucosa de la amilosa.

Prueba de Tanto las aldosas como las cetosas en presencia de cidos

Seliwanof

minerales y en un medio caliente sufren procesos de

deshidratacin, lo cual da como producto un anillo
pentagonal de furfural o hidroximetilfurfural, segn sea el
monosacrido

pentosa

hexosa,

los

furfurales

se

condensas dando una coloracin roja. Las cetosas se

deshidratan ms rpido que las aldosas, lo cual permite

diferenciarlos. En la prueba de Seliwanoff la fructosa al ser
una cetohexosa da un resultado positivo, en cuanto a la
sacarosa esta al contener fructosa da tambin positivo si
se deja correr el tiempo adecuado para que se efectu la
hidrolisis acida en donde la sacarosa libera fructosa.

Ilustracin 7. Reaccin de las cetohexosas con el reactivo

de Seliwanoff
Prueba de Esta prueba se basa en la formacin de furfural, al hacer
Bial

reaccionar pentosas con HCl y posteriormente con orcinol.

El furfural es un aldehdo electrofilico, en presencia de
cido, adiciona fenoles (con prdida de agua) produciendo
sustancias altamente coloreadas, las pentosas originan
una coloracin azul-verde. En la prueba de Bial no se cont
con la ribosa, procedimos a realizar la prueba con fructosa
y sacarosa. Tanto la fructosa como la sacarosa al no ser
pentosas no dan una coloracin positiva, sin embargo las
hexosas al reaccionar con el reactivo de Bial originan una
coloracin verde, caf o caf-rojiza, razn por lo cual en la
fructosa se observ una coloracin caf rojiza oscura y
en la sacarosa una coloracin similar pero clara. Para la

pentosas la reaccin es:

Prueba
del

Ilustracin 8. Reaccin de las pentosas con reactivo de Bial

La prueba de cido msico permite identificar la galactosa.

cido El HNO3 oxida tanto al grupo aldehdo como al alcohlico

msico

primario para formar cidos dicarboxilico, el cido msico

insoluble se forma gracias a la oxidacin de la galactosa,
este cido dicarboxilico al ser insoluble precipita en forma
de cristales.

Formacin

Ilustracin 9. Reaccin de la galactosa con HNO3

Las aldosas y las cetosas al poseer un grupo aldehdo y

de

cetona

osazonas

fenilhidrazina para formar fenilhidrazonas, si se utiliza un

respectivamente

pueden

reaccionar

con

la

exceso de fenildidrazina se forma una osazona que

contiene dos residuos de fenilhidrazina por molcula,
mientras que una tercera molcula del reactivo se
convierte en anilina y amoniaco 1. La osazona formada por

la galactosa (aldosa) es insoluble y se presenta en forma

de cristales amarillos.

Prueba

Ilustracin 9 . Formacin de osazonas

La sacarosa es un disacrido que carece de

para

reductor, esto se debe a que no posee en la molcula un

disacrido

grupo aldehdo o cetona en forma de hemiacetlitica, el

HCl hidroliza la sacarosa dando lugar a la glucosa y la

Sacarosa

fructosa, sus monosacridos integrantes. Al aplicar la

poder

prueba de Benedict y la de Seliwanoff estas dan positivo.

La hidrolisis acida de su enlace glicosidico permite que sus
mono sacridos glucosa y fructosa (azucares reductores)
reaccionen con el reactivo de Benedict, por otro lado la
glucosa y la fructosa en la prueba de Seliwanoff tambin
Prueba de arroja un resultado positivo, a causa de las razones
Wolhk

anteriormente expuestas (ver prueba de Seliwanoff).

La prueba de Wolhk permite identificar la lactosa. Lactosa es un azcar
reductor, forma una osazona y existe en formas alfa y beta que
mutarrotan., se toma como resultado positivo la aparicin de una
coloracin rojiza; en nuestra muestra de lactosa se observ una ligera capa
superior rojiza mientras que en nuestro blanco no hubo ningn cambio.
1. Qu

CUESTIONARIO

diferencia

azucares
reductores?

existe

reductores

entre
y

no

Los azucares reductores poseen un

grupo carbonilo libre, lo cual les
permite reducirse, en cambio en los

azucares no reductores el grupo

carbonilo se encuentra combinado en
unin glicosidica, haciendo que estos
carezcan de capacidad reductora.
2. cmo puede justificar el hecho de
que la glucosa, al igual que la
fructosa de prueba positiva para

Forma abierta

azucares reductores?

cerrada

Forma

Tanto la glucosa como la fructosa son

La manosa se encuentra en las gomas

considerados azucares reductores, es

vegetales y es constituyente de muchas

decir

protenas.

se

oxidan

fcilmente

con

oxidantes suaves, los dos poseen

carbonos

libres

hemiacetales

en

forma

otorgndoles

de
la

capacidad de reducir.
3. Consulte las estructuras en forma
abierta

cerrada

de

los

siguientes azucares y consulte de

donde se extraen o en donde
abundan y para que se emplean
cada una de ellas:
a) Manosa

b) Galactosa

La galactosa es sintetizada por las

glndulas mamarias para producir lactosa,
que es un disacrido formado por la unin
de glucosa y galactosa, por tanto el mayor
aporte de galactosa en la nutricin
proviene de la ingesta de lactosa de la
leche. Es un monosacrido que se obtiene
en el intestino, por medio de la accin de
la enzima lactasa. se convierte en glucosa
en el hgado como aporte energtico,
forma parte de los
glucoprotenas

de

glucolpidos
las

membranas

celulares de las clulas sobre todo de las

neuronas

Se encuentra en los vegetales, las

frutas, la miel, la hidrolisis del azcar
de caa y de la inulina. El hgado la
almacena en forma de glucgeno

c) Lactosa

tambin es convertida en glucosa y

utilizada por el organismo.
e) Almidn

Est presente en todas las leches de los

mamferos. La lactosa representa una
fuente energtica de fcil utilizacin y
favorece

la

absorcin

magnesio.
d) Fructosa

de

calcio

y
Es

un

homopolisacrido

energtica

predominante

constituido

por

cantidades

de

la

de
en

unin

monmeros

reserva

las plantas,
de

grandes

de glucosa.El

almidn se encuentra en los amiloplastos de

las clulas vegetales, sobre todo en las

semillas, las races y los tallos, incluidos
los tubrculos.
f)

Sacarosa

La fuente principal de la ribosa son

los cidos nucleicos, es vital para los
elementos estructurales de los cidos
nucleicos y de las coenzimas como
Abundante en la frutas y vegetales, es

ATO, NAD+, NADP+, flavoproteinas,

usado por la abejas para hacer miel, es

intermediario

usada como edulcorante, fuente de

pentosas.

en

la

via

de

las

energa y conservante.
CONCLUSIONES
g) maltosa
Los carbohidratos al poseer en su
estructura

aldehdos

cetonas,

presentan un comportamiento qumico

ligado a los grupos funcionales de
estos, como por ejemplo la capacidad
de oxidarse con agentes oxidantes
Se encuentra en la cerveza, en los

suaves como el reactivo de fehling o

granos de cebada, se puede obtener

de Tollens o la capacidad de formar

por

osazonas,

hidrolisis

de

almidn

adems

esta

permiten

clase

de

glucgeno. Se usa como edulcorante y

reacciones

diferenciar

en jarabes.

monosacridos de disacridos como la

sacarosa.

h) Ribosa
Los monosacridos se diferencia de
los disacridos

(sacarosa) por su

poder reductor, poder que es otorgado

por el carbono libre que posee, los

2. Morales. (2005)Reconocimiento de los

monosacridos a su vez se subdividen

monosacridos,

en aldosas y cetosas, y en pentosas o

polisacridos,

hexosas, estos fueron identificados y

Callao, Lima-Per

diferenciados mediante la prueba de

Tollens, de Seliwanoff y de Bial, en
las que se evidencio la velocidad de
deshidratacin

de

las

aldosas

cetosas, y la formacin de furfural o

hidroximetil furfural, segn provenga
una pentosa o hexosa.

disacridos
Universidad

de

los

Nacional

del

J. Ernesto Luquet. (2010). Bioqumica:

Carbohidratos, San Juan de Pasto
3. Teijn, J.Garrido, A, Villaverde, C. Blanco,
M.

Mendoza,

C.

Ramirez,

J.

(2005).

Fundamentos de Bioqumica Estructural:

Hidratos de Carbono. Mxico, D.F.
4. Brown, L.Bursten, M. (2009). Qumica, La

La sacarosa al hidrolizarse libera a sus

ciencia central: Carbohidratos. Mxico, D.F.

monosacridos

la

5. Wade L.G. (2004). Qumica Orgnica.

glucosa y la fructosa, debido a esto la

Madrid, Espaa: Pearson Educacin S.A.

constituyentes:

sacarosa presento resultados positivos

en la prueba para disacridos y en la

6. McMurry, John. Quimica organica.

prueba de Seliwanoff.

(2008) .CengageLearning Editores, S.A.

BIBLIOGRAFIA

1. Morrison, J.Boyd, R. (1976). Qumica

orgnica: Bioqumica. Estados Unidos