PRÁTICA N° 1 NORMAS PARA EL USO Y TRABAJO EN EL LABORATORIO

NORMAS DE Importancia:
SEGURIDAD EN EL -Eviten posibles accidentes debido al desconocimiento del alumno
LABORATORIO -Evitan negligencia
NORMAS PERSONALES -Su zona de trabajo
Cada uno es -Material
responsable de -Utilización de la bata (ya que evita que las sustancias químicas llegan a la
piel y evita el deterioro de las prendas de vestir)
-Cabello recogido en caso sea largo
-No consumir alimentos o bebidas
NORMAS DE 1)Usar el material correcto según la rótula
UTILIZACIÓN DE 2) No coger ningún producto químico (maestro proporciona)
PRODUCTOS QUÍMICOS 3) No devolver los sobrantes de los productos a los frascos de origen
(maestro indica)
4) Cuando desechamos los productos químicos por el desagüé de la pila
 dejamos caer abundante agua, aunque este neutralizado
5) No tocar con manos o boca los productos químicos
6) No pipetear con la boca (bomba manual, jeringuilla o artilugio)
7) ÁCIDOS CUIDADO ESPECIAL  PARA SU DILUCIÓN  SIEMPRE EL
ÁCIDO SOBRE EL AGUA
8) Los productos inflamables nunca deben estar cerca de las fuentes de
calor (calentar tubos en baño maría no directo a la llama)
9) Si se vierte sobre ti un ácido o algún corrosivo lávate con mucha agua y
avisar al docente.
10) Al preparar cualquier disolución se hace sobre un FRASCO LIMPIO Y
ROTULADO.
NORMAS DE 1) Cuidado con los bordes y puntas cortantes de tubos u objetos de
UTILIZACIÓN VIDRIO vidrio
2) Dejar enfriar el tubo antes de tocarlo  evita quemaduras (vidrio
caliente o frío no se diferencia)
3) Utilice guantes o trapo cuando introduzca un tapón en un tubo
de vidrio.
4) CUANDO CALIENTES EL TUBO A LA LLAMA (dos normas)
-La boca del tubo de ensayo no apunte a ningún compañero (el líquido
podría salir disparado)
-Caliente por el lateral del tubo de ensayo (agitando suavemente) y
nunca por el fondo
NORMAS DE 1) Colocar papel filtro sobre los platos de la balanza (si es un
UTILIZACIÓN DE producto corrosivo utilizamos un vidrio de reloj) antes de
BALANZA determinar la masa de productos químicos
2) No perturbar la balanza porque puede conducir a un error (no
vibraciones por golpe, soplar sobre los platos, aparatos en
funcionamiento  celular (vibra), espectrofotómetro)

PRÁTICA N° 2 DETERMINACIÓN Y ANÁLISIS DE CARBOHIDRATOS

1. MÉTODO FENOL- ÁCIDO SULFÚRICO

2. OBJETIVO  CUANTIFICAR LA CONCENTRACIÓN DE DISACÁRIDOS (SACAROSA) EN
MUESTRAS ACUOSAS
  LEY DE LAMBER – BEE  ABSORBANCIA SE VA MEDIR DE MANERA LINEAL CON
LA CONCENTRACIÓN

CARBOHIDRATOS a) ¿QUÉ SON?

-Biomoléculas orgánicas compuesto de C, H, O
b) IMPORTANCIA
-Proporcionar energía inmediata al organismo
-Se obtiene glucosa importante para la respiración celular y se puede almacenar en
forma de glucógeno en el hígado
-FUNCIÓN ENRGÉTICA Y ESTRUCTURAL (celulosa, quitina)
c) DIETA
- Su digestión comienza en la boca (10%) con la enzima amilasa salival y continua
en el intestino (duodeno) con la amilasa pancreática, otras enzimas: lactasa,
sacarosa, maltasa y dextrinasa
- Presente en verduras, azúcares, tubérculos …
- El almidón es el constituyente esencial de cereales, leguminoso, tubérculos y
raíces.
ESPECTROFOTOMETÍA -Mide la absorbancia o Fundamento  Las moléculas absorben las
tramitancia radiaciones electromagnéticas (UV) en sus enlaces
-Técnica analítica dobles y que tengan resonancia (se pueden mover)
-Permite determinar la (pueden absorber)
concentración de un compuesto  Captura y evaluar el color
en solución
-Es necesario que este calibrado
(0 de absorbancia)

¿POR QUÉ SE UTILIZA UN 1) DESHIDRATA A LAS PARTES HIDROXILADAS (OH)

ÁCIDO? 2) DESPUÉS: AGUA PUEDE HIDROLIZARLO EN EL ENLACE GLUCOSÍDICO
ayuda a la hidratación o ruptura del enlace glucosídico.
¿POR QUÉ SE AGREGA FENOL  Para poder absorber la luz UV, mientras más moléculas haya más puede
UN FENOL? absorber
-Los oligosacáridos no tienen enlaces dobles y no hay resonancia  no pueden
absorber la luz UV  por ello es importante agregar la molécula de fenol
LEY LAMBER – BEE A = E. l. c I1  CLARO (NO DISUELVES MUCHO)
CURVA DE CALIBRACIÓN A= (Constante) (longitud que I2 OSCURO
tiene viajar) (concentración) I3 MUY OSCURO (DISUELVES MUCHO SOLUTO)
RELACIÓN LINEAL ENTRE LA
ABSORBANCIA Y LA
CONCENTRACIÓN
(ha mayor concentración
(mayor número moles) pueden
absorber mayor energía y por
tanto absorber mejor)

CUANTO MAYOR CONCENTRACIÓN HAYA  MENOR

SERÁ LA INTENSIDAD DE LUZ REFRACTADA
TRAMITANCIA T = INTENSIDAD DE LA LUZ QUE T1= I1/Io
 SALE/ INTENSIDAD DE LA LUZ RELACIÓN INVERSA CON LA ABSORBANCIA
QUE ENTRA Cuando un haz de luz incide sobre un cuerpo
traslúcido, una parte de esta luz es absorbida por el
cuerpo, y el haz de luz restante atraviesa dicho
cuerpo. A mayor cantidad de luz absorbida, mayor
será la absorbancia del cuerpo, y menor cantidad de
luz será transmitida por dicho cuerpo.
CONCLUSIÓN La adición de algunos ácidos minerales a las soluciones acuosas de carbohidratos como
el ácido sulfúrico provoca la deshidratación de los carbohidratos con la eliminación de
tres moles de agua. Con esta reacción se forman derivados de furfural y el 5-
hidroximetilfurfural (HMF). La presencia del fenol y su interacción con el HMF facilita la
formación de complejos que permiten la coloración de la solución y en consecuencia
facilitan la cuantificación de los carbohidratos a través de la espectrofotometría.
490 --- 660 nm (filtro rojo)

PRÁCTICA N° 3 DIGESTIÓN DE CARBOHIDRATOS

IMPORTANCIA DEL BUFFER -Buffer / tampón químico / disolución amortiguadora

-Tienen la propiedad de mantener estable el pH de una disolución frente a la adición
de ácidos o bases fuertes.
BUFFER FOSFATO pH 6.6:
Función: mantener el pH y la presión osmótica lo mas parecido al ambiente biológico
(fisiológico)
Importancia: Para la reacción bioquímica, ya que puede variar los resultados si no está
en un pH adecuado
ENZIMAS La digestión de carbohidratos se produce por las enzimas digestivas producidas por la
glándula salivares, el páncreas y la pared intestinal.
1) Alfa – amilasa salival (ptialina): Actúa sobre el almidón (enlace 1,4) e inicia la
conversión a oligosacáridos. Actúan a pH neutro y en presencia de iones cloro,
se desactivan en pH ácida. Requiere de una temperatura de 37°C
FORMAS DE EVALUAR LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA:
- Por desaparición de sustrato  lugol
- Por formación de producto  cobre
2) Alfa – amilasa pancreática
3) Amilo 1,6 glucosidasa de la pared intestinal  Cataliza la hidrólisis de los
puntos de ramificación del glucógeno
REACCIÓN DEL ALMIDÓN -A mayor decoloración, mayor actividad TÉCNICA
FRENTE AL YODO enzimática. 1 FASE: SIMULACIÓN DE LA ENZIMA
-Nos va indicar la desaparición completa 2 FASE: INTERACCIÓN CON SOLUCIÓN
del al almidón. YODADA
-YODO SE UTILIZA PARA VER SI SE HA COLORACIÓN:
CATALIZADO (DEGRADADO) A SU MORADO PRESENCIA DE
TOTALIDAD EL ALMIDÓN POLISACARIDOS (ALMIDÓN), SE PUEDE
IMPREGNAR
AMARILLO  COLOR NORMAL DEL YODO
INDICA QUE SÍ SE HA CATALIZADO A
MONOSACARIDOS
 PRÁCTICA 4: RECONOCIMIENTO DE SALES MINERALES

El sodio, el potasio y el cloro están presentes como sales en los líquidos corporales, donde
tienen la función fisiológica de mantener la presión osmótica. Los minerales forman parte de la
estructura de muchos tejidos. Intervienen en reacciones químicas del organismo.

 FORMAN PARTE DE LA ESTRUCTURA ÓSEA Y DENTAL (Calcio, fósforo, magnesio y flúor)

 REGULAN EL BALANCE DEL AGUA DENTRO Y FUERA DE LA CÉLULA
 INTERVIENEN EN LA EXCITABILIDAD NERVIOSA Y EN LA ACTIVIDAD MUSCULAR (calcio,
magnesio)

¿QUÉ ES EL CUAJADO?  Se fundamenta en la rotura del enlace de la caseína por la presencia

del ácido acético. Producto de la coagulación de leche que se obtiene el cuajar (sólido) + suero
(líquido  en ahí se quedan las sales que pretendemos identificar)

 Se encuentra la enzima quimosina

AÑADIR IDENTIFICAR EXPLICACIÓN

TUBO N° 1 1cc. De solución de CLORUROS Se forman cloruro de
3cc. Suero de leche + nitrato de plata plata  precipitado
(lechoso) blanco de aspecto
lechoso
TUBO N° 2 2cc. De solución de FOSFATOS Forman un precipitado
3cc. Suero de leche + molibdato amónico amarillo de
al 1% tratado con fosfomolibdato amónico
ácido nítrico
concentrado 
calentar baño María
TUBO N° 3 10 gotas de solución CALCIO Forma un precipitado
3cc. Suero de leche + de oxalato amónico blanco cristalino de
al 1% calcio amónico

PRÁCTICA 5: RECONOCIMIENTO DE LÍPIDOS

1) PROPIEDAD: SAPONIFICACIÓN

ACEITE VEGETAL 2cc -Agitar enérgicamente JABÓN GLICERINA

(2cc) HIDRÓXIDO -Baño María (20-30 (ácidos grasos + ion Na o K9
SÓDICO 20% min)
- SAL SÓDICA O POTÁSICA DE
descompone LOS ÁCIDOS GRASOS
RESULTADO: 3 FASES O CAPAS

I. INFERIOR  Clara  solución de sosa sobrante + glicerina

II. SUPERIOR  Amarillenta  aceite no utilizado
III. INTERMEDIO  Aspecto grumoso  Jabón
 2) PROPIEDAD: SOLUBILIDAD

 No son solubles porque son apolares, presentan menor cantidad de O2 a

comparación de los glúcidos
 Anfipáticos: Presentan una parte hidrofílica (cabeza) y una parte hidrofóbica
(cola), por ello en con contacto con el agua se forman micelas o liposomas.
 MICELAS: CABEZA hacia fuera y colas hacia dentro en el agua CUANDO SE
AGITAN SE FORMA PEQUEÑAS GOTITAS “EMULSIÓN” QUE ES TRANSITORIA
 Sí son solubles en compuestos orgánicos (éter, cloroformo, benceno, xilol) 
Existe afinidad entre la fase dispersa y dispersante

3) TÉCNICA DE RECONOCIMIENTO DE LÍPIDOS

 SOLUCIÓN ALCOHÓLICA DE SUDÁN III (añadir 4 o 5 gotas): Si hay grasa lo tiñe de

tonalidad roja o anaranjada

PRÁCTICA 6: RECONOCIMIENTO DE PROTEÍNAS

¿QUÉ SON PROTEÍNAS? -Biomoléculas formados por aminoácidos

-Elevado peso molar
-Compuesto C, H, O y N, dos grupos: amino y carboxilo
-Presenta diversas funcionalidades:
ENZIMAS  Catalizan reacciones biológicas
HORMONAS
ANTICUERPOS
MECANISMO DE SEÑALIZACIÓN
TRANSPORTE  hemoglobina  O2
ESTRUCTURA PRIMARIA
-Se forma por la unión de aminoácidos por el enlace peptídico (vía
deshidratación)
-Carácter parcial de doble enlace del enlace peptídicopresenta cierta
rigidez e inmoviliza a un solo plano
SECUNDARIA
-Plegamiento de la cadena polipeptídico adopta gracias a la formación de
puentes de hidrogeno entre los átomos que forman el enlace peptídico
-Adoptan conformaciones de menor energía libre y por tanto más
estables.
TIPOS:
HÉLICE ALFA: LA cadena polipeptídica se enrolla en espiral sobre sí misma
BETA LAMINAR: Se estira y adopta esta forma por enlaces covalente
-Enlaces de azufre
TERCIARIA
-Puentes de hidrogeno, enlaces iónicos. Interacciones dipolo – dipolo y
fuerzas de dispersión de London.
-Puentes disulfuro (enlace covalente fuerte formado entre los azufres
de las cadenas laterales de las cisteínas)
-Máx condensación

CUATERNARIA
 -Todos los enlaces: estabilizados por las interacciones débiles, algunos
casos (inmunoglobulinas – puente disulfuro)
-COMPUESTOS COMPLEJOS (PROTEÍNA + IÓN /HIERRO)  LLAMADOS
PROTÓMEROS
COAGULACIÓN DE - PROTEÍNAS (gran tamaño) + AGUA  SOLUCIONES COLOIDALES
PROTEÍNAS - Estas soluciones coloidales puedes precipitar cuando:
1) CALENTADOS A T°>70°C
2) TRATADOS CON SOLUCIONES SALINAS, ÁCIDOS, ALCOHOL
- Al precipitarse forman coágulos
COAGULACIÓN:
-Proceso irreversible
-Ocurre por la desnaturalización de las proteínas por los agentes
indicados.
- ¿PORQUÉ SE DESNATURALIZA?  POR LA DESTRUCCIÓN DE LA
ESTRUCTURA TERCIARIA Y CUATERNARIA
SOLUCIONES COLOIDES -La fase dispersa no tiene afinidad por la fase dispersante porque las
moléculas son muy grandes
REACCION OBJETIVO: Se torna amarillo cuando
XANTOPROTEICA identificamos aminoácidos portadores de
grupos bencénicos (ejem: tirosina)
FORMACIÓN: Compuesto aromático nitrato
(amarillo)
TÉCNICA:
CLARA DE HUEVO + HNO3 (AMARILLO)
CALENTAR (100°C)  ENFRIAMOS 
AÑADIMOS (SOSA AL 40%) – SE TORNA
REACCIONES COLOR ANARANJADO
REACCIÓN DEL BIURET a) OBJETIVO: Detectar proteínas y
péptidos, pero no aminoácidos
b) TÉCNICA:
CLARA DE HUEVO + NaOH (20%) BIURET
c) RECONOCIMIENTO DEL BIURET
Añadimos una solución de sulfato cúprico
diluida (1%) coloración violeta

REACCIÓN DE LOS a) OBJETIVO: Identificar el azufre de los

AMINOÁCIDOS aminoácidos
b) nos sirve para identificar proteínas
que tienen en su composición
aminoácidos con azufre
c) TÉCNICA:
-CLARA DE HUEVO + NaOH (20%)  el álcali
separa el azufre de los aminoácidos
- AÑADIMOS ACETATO DE PLOMO 5% (10
gotas)  SULFURO DE PLOMO (precipitado
negruzco)