Unidad 1

PREPARACION DE MEDIOS DE
CULTIVO
 PREPARACION DE
MEDIOS DE CULTIVO
 OBSERVACION
• Se elige el medio de cultivo que se va a preparar.

• Independiente que se vaya a preparar agar o

caldo; es necesario tener en cuenta la fecha de
vencimiento de los medios de cultivo y verificar
los componentes del medio, antes de prepararlo.

• Antes de preparar el medio se realizan los

cálculos pertinentes para el volumen que se
desee preparar.

• Teniendo los cálculos hechos, se procede a

pesar la cantidad deseada. Tenga en cuenta el
tipo de balanza que esta utilizando.
 Fuentes de Hidrógeno
Carbono.
“SATISFACTORIO” Nitrógeno.
Azufre.
Fósforo.
Sales.
Vitaminas.
Otros (Suero, Sangre, Carbohidratos,
Colorantes Indicadores).

Los medios de cultivo pueden agruparse de

acuerdo a:
- Medio líquido (Caldos)
- Medio sólido (Agares) ESTADO
FISICO
- Medio semisólido (medio SIM)

- Medio nutritivo simple (caldo y/o agar nutritivo o

TSA)
REQUERIMIENTOS -Medio nutritivo enriquecido (agar sangre, agar
DX chocolate)
- Medio selectivo o especiales: (agar mac conkey).
- Medio diferenciales: (TSI, LIA)
- Medio de transporte: (medio Stuart).
• Con una espátula limpia y seca pesar la cantidad
deseada. Asegúrese que la espátula no contenga
restos de otros medios pesados anteriormente.
• Verificar que el peso que salga en la balanza sea
el número que se desea, hallado por medio del
cálculo.
• Después de hidratar con el volumen de agua
deseado, se calienta hasta que se disuelva
completamente.
• Ajustar el pH con las tiras indicadoras de pH si
esta por debajo de un pH de 6.8 ( ácida) agregar
gota a gota la solución de NaOH, si por el contrario
está por encima de 7.4 (alcalino) agregar gota a
gota la solución de HCL.
• Se envía el medio envasado en tubos o matraz
pirex a esterilizar en la autoclave a 121°C por 15
minutos con cinta indicadora (según el fabricante).
La prolongación indebida en el tiempo de
esterilización destruye las sustancias nutritivas y se
produce la reducción del volumen de los medios.
• Los medios de cultivo generalmente se sirven en
las placas junto aun mechero De alcohol para
evitar que se contamine el medio. En los tubos se
debe formar un plano inclinado; si es caldo no. y en
las placas se debe tener una distribución
homogénea.
 Por último se dejan enfriar para que se
solidifique el agar. No se olvide de rotular las
placas Petri con el nombre del medio de cultivo, es
muy importante que el marcaje sea correcto para
evitar problemas en los resultados.
• Controlamos la esterilidad colocando el medio
envasado en una incubadora a 37°C por 24 horas.
• Mantener el medio envasado en la refrigeradora
hasta el momento de usarlo.
MATERIALES
• Medios de Cultivos respectivos.
• Espátulas.
• Balanzas.
• Agua destilada.
• Erlenmeyes o frascos pirex.
• Papel metálico.
• Papel para pesar.
• Cinta pH.
• Cinta de autoclave.
• Plumón indeleble.
• Autoclave.
• Tubos tapa rosca
• Placas Petri estériles.
• Mechero de gas.
 AGAR SOYA
AGAR MAC CONKEY
TRIPTICASA (TSA)
AGAR SALMONELLA - AGAR TRIPLE
SHIGELLA ( SS ) AZUCAR HIERRO (TSI)
,AGAR LISINA HIERRO
( LIA )
LIA
TSI
 AGAR CITRATO CALDO MRVP, MEDIO
SEGÚN SIMMONS SIM
MR VP SIM