DETERMINACION DE CPK Y LDH

DETERMINACION DE CPK Y LDH

PRÁCTICA NO. 4

INTRODUCCIÓN

La creatina quinasa o creatina-fosfocinasa (CPK) es una enzima que cataliza la vía

metabólica de la creatina- creatinina en miocitos y tejido cerebral. Cualquier incremento
por arriba de los niveles normales en suero indica traumatismo de tejidos. La CPK tiene 3
isoenzimas con estructuras moleculares diferentes. CPK1 (CPK-BB) se encuentra en tejido
cerebral, la CPK2 (CPK-MB) se localiza en músculo cardiaco y cantidades pequeñas en
músculo estriado y la CPK 3 (CPK-MM) se encuentra músculo estriado. La finalidad de
medir esta enzima es la de evaluar las causas posibles de dolor retroesternal y vigilar la
intensidad de la izquema miocárdica después de cirugía del corazón, catateterismo
cardiaco o cardioconversión (CPK2) y para detectar los trastornos del músculo estriado
que no son neurógenos, como la distrofia muscular de Duchenne y la dermatomiositis
incipiente se valora la CK total.

Los niveles de creatina quinasa (CPK) ayudan a detectar y diagnosticar infarto agudo al
miocardio. La actividad CK empieza a elevarse dentro de 4 horas en un ataque cardiaco,
alcanzando una cúspide dentro de aproximadamente de 20 a 30 horas y puede regresar a
niveles normales dentro de 3 días. En un segundo infarto se determina CPK-MB.

La deshidrogenada láctica es una enzima que cataliza la conversión reversible del ácido
láctico del músculo, en ácido pirúvico. LDH se encuentra en casi todos los tejidos
corporales, está constituida por 5 isoenzimas histoespecíficas, LDH1 y LDH2 están
fundamentalmente en corazón, eritrocitos y riñones, LDH3 en hígado, LDH4 y LDH5 en
hígado y músculo estriado. El nivel de LDH aumenta 12-48 hrs. Después de comenzar el
infarto. El nivel máximo es alcanzado en 2-5 días y se reduce lentamente en termino de 7-
10 días, si no persiste la necrosis tisular. Niveles altos de LDH también se han observado
en enfermedades de hígado, anemia perniciosa, enfermedad renal y algunos casos de
trauma del músculo esquelético.

COMPETENCIAS DE
PRÁCTICA NO. 4
El alumno es capaz de:
Analizar e interpretar los niveles de las enzimas creatina quinasa (CPK) y
deshidrogenada láctica (LDH) con el espectrofotómetro UV-Vis DR6000,
explica los resultados obtenidos con respecto a los valores normales de
referencia y sugiere una posibilidad diagnóstica y tratamiento.
 CASO CLÍNICO CPK Y LDH

PRÁCTICA NO. 4

Masculino de 62 años de edad se presenta urgencias por dolor precordial intenso.

Antecedentes personales patológicos de importancia: tabaquismo crónico intenso,
obesidad mórbida, Dislipidemia sin tratamiento actual. A su ingreso al servicio refiere que
inicio hace 4 horas con dolor precordial intenso, opresivo, se irradia hacia brazo
izquierdo, se acompaña de disnea, diaforesis y sensación de palpitaciones. A la
exploración física: T/A: 205/170 mm Hg, FC: 120 x minuto, FR: 20 por minuto. Se le
realiza un electrocardiograma con un desnivel del ST por lo que se le administra
oxígeno, nitroglicerina, morfina y un antiagregante plaquetario (MANO). Se solicitan
pruebas de laboratorio basales al momento de ingreso, en las que destaca: CPK:480
U/L. 12 horas después de su ingreso al hospital, se realizan pruebas de seguimiento:
CK-MB : 768 U/L, LDH: 425 U/L (240 – 480 U/L). A 24 horas de estar hospitalizado CK-
MB: 625 U/L, LDH:1024 U/L. Se continúan monitorizando sus niveles enzimáticos: al
segundo día de estar hospitalizado CK-MB: 227 U/L, LDH: 846 U/L; al tercer día de estar
hospitalizado
CK-MB: 192 U/L (normal), LDH: 572 U/L. Se mantuvo por 15 días de Estancia
Intrahospitalaría y se dio de alta para continuar con manejo ambulatorio.

Analiza el caso clínico y da respuesta a lo siguiente.

1) Explica la relación entre los antecedentes y el padecimiento actual. El paciente esta

teniendo la clínica de un infarto por eso se eleva la CPK-MB
2) Explica el proceso de aterogénesis como principal causa de isquemia cardiaca
Una obstruccion en los vasos causa un aumento de el gasto cardiaco, aumenta a
resistencia periférica, en consecuencia se elevara la presión arterial
3) Explica como la farmacodinamia de cada uno de los componentes de MANO ayudan a
solucionar el cuadro del paciente. Un antiagregante de primera mano como el acido
acetilsalicílico bloquean la síntesis de trombos al inhibir el tromboxano, por la
inhibición de las ciclooxigenasa 1
4) ¿Por qué el médico, solicito únicamente la medición de la enzima creatina quinasa
(CPK) al ingreso del paciente? Explique. Porque la persona si bien estaba por
infartarse pues no se infarto, en el caso de la LDH se utiliza posterior a un infarto
5) Explica el comportamiento de las mediciones de CPK y LDH la CPK se utiliza para
medir el nivel de creatina fosfocinasa que se utiliza como un reemplazo temporal de el
ADP y ATP en su hidrolisis, la LDH es una enzima que cataliza la reacción de piruvato
a lactato , con el objetivo de preservar la energía, esta via de la glucolisis anaerobia se
 da en celulas blancas del musculo, eritrocitos y en ayuno, esta via es deficiente en
cuanto a su aporte de energia
6) ¿Qué otras enzimas solicitarían usted además de la CK si fuese su paciente y hubiese
ingresado con 24 horas de evolución? TGO y TCP
7) ¿Tendría algún significado médico solicitar mioglobina si un paciente ingresa al
hospital con 24 horas de evolución? Explique. Podria ser útil en caso de querer
verificar la función muscular esquelética y cardiaca

Tema de estudio autodirigido: aterogenesis, enzimas cardiacas

Reestructuraron: Dr. Carlos Daniel Zavala, Dr. José Luis
Ramos

CONCLUSION. (del caso clínico de su paciente)

PREGUNTAS EXPLORATORIAS
PRÁCTICA NO.4

1) ¿En qué vía metabólica actúa la enzima lactato deshidrogenasa (LDH)? 2)

glucolisis anaerobia ¿Por qué se da seguimiento enzimático a los casos de
infarto? Explique. Porque el lactato se utiliza como fuente de energía en caso
de hipoxia tisular como es un infarto

BIBLIOGRAFIA CONSULTADA DEL CASO CLÍNICO Y PREGUNTAS PREVIAS (3

libros o artículos originales recientes)

DESARROLLO EN EL LABORATORIO
PRÁCTICA NO. 4

Fundamentos
Creatinina cinasa: La creatinina Cinasa cataliza la fosforilación reversible de ADP, en
presencia de fosfato creatina, para formar ATP y creatina. La hexocinasa cataliza la
fosforilación de glucosa por el ATP formado para producir ADP y glucosa-6-fosfato (G-
6P). El G-6-P es oxidado a 6-fosfogluconato con producción de NADH. La variación de la
formación de NADH, medida a 340 nm, es directamente proporcional a la actividad de CK
en suero.

Lactato deshidrogenasa: La reacción del Lactato + NAD es catalizada por la enzima

lactado deshidrogenada para formar Piruvato dehidrogenaza. La formación de la
nicotinamidadema dinucleoide (NHDH) produce un aumento de absorbancia a 340 nm. El
cambio de rango de absorbancia es directamente proporcional a la actividad de LD en la
muestra. presente en la muestra ensayada.
 Material por equipo
❖ 2 tubos c/tapón rojo o amarillo ❖ Agujas vacutainer o jeringas de 5 ml.
❖ 1 Holder (en caso de usar agujas vacutainer)
❖ 1 ligadura de látex
❖ Torundas con alcohol y secas
❖ 3 celdas de 10 mm para espectrofotómetro
❖ 1 micropipeta de 1000 µl
❖ Puntillas azules para micropipeta de 1000 µl
❖ 1 micropipeta de 10-100 µl
❖ Puntillas amarillas para micropipeta de 10-100 µl

Material por grupo.

❖ 1 centrifuga
❖ Espectrofotómetro UV-Vis DR6000

El alumno traerá el día de la práctica (equipo)

NOTA: preguntar al docente, si traerá usted al paciente y que indicaciones debe dar para
la toma de muestra

TRABAJO PRÁCTICO
PRÁCTICA NO. 4
1. Obtención de muestras (el docente le indicara si trae un paciente)
2. Centrifugar la muestra a 3000 rpm durante 5 minutos
3. Entregar la muestra al docente para su proceso con el espectrofotómetro
4. El docente le entregará resultados del paciente conocido.
5. Analizar los parámetros y establecer un diagnóstico presuntivo o final (En base a
resultados e información bibliográfica).
6. Sugerir un tratamiento

PROCEDIMIENTO CPK TOTAL

1. Mezclar 4 volúmenes de R1 con un volumen de R2 para obtener RT.
2. Longitud de onda 340 nm.
3. Ajustar espectrofotómetro a cero frente a agua destilada.
25°-30° C 37° C
RT (mL) 1 1
Muestra (µL) 40 20
4. Mezclar e incubar 2 minutos a 37 °C
5. Leer absorbancia (A) inicial de la muestra, poner en marcha el cronometro.
6. Leer absorbancia cada minuto por 3 minutos.
7. Calcular el promedio de la diferencia de absorbancias por minuto (ΔA /min)

Valores de Referencia CPK Total:

CALCULOS:
HOMBRES a 25° C 80 UI/L
25 °-30°C ΔA /min X 4127 = UI/L CK 30° C 130 UI/L
37° C 195 UI/L
37° c ΔA /min X 8095= UI/L CK
MUJERES S a 25° C 70 UI/L
30° C 110 UI/L
37° C 170 UI/L
Px: Diego aramburo
CPK: 67UI/L
LDH: 127 UI/L
 PROCEDIMIENTO LDH
1. Mezclar 4 volúmenes de R1 con un volumen de R2 para obtener RT.
2. Longitud de onda 340 nm.
3. Ajustar espectrofotómetro a cero frente a agua destilada.
25°-30° C 37° C
RT (mL) 3 3
Muestra (µL) 100 50

4. Mezclar e incubar 1 minuto a 37 °C

5. Leer absorbancia (A) inicial de la muestra, poner en marcha el cronometro.
6. Leer absorbancia cada minuto por 3 minutos.
7. Calcular el promedio de la diferencia de absorbancias por minuto (ΔA /min)

CALCULOS:
Valores de Referencia LDH:
25 °-30°C
25° C 120-240 UI/L
ΔA /min X 4925 = UI/L LDH
30° C 160-320 UI/L
37° C 230-460 UI/L
37° C
ΔA /min X 9690= UI/LLDH

NOTA: Es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios valores de

referencia y consultar bibliografía de apoyo para cada parámetro.
REPORTE INDIVIDUAL
PRÁCTICA NO. 4 CPK Y LDH

Título de la práctica
____________________________________________________________

Nombre del alumno _______________________________________ Gdo. _____ Gpo.

______

Fecha de realización ___________________________ Fecha de entrega

_____________

Fecha de Revisado ____________________________

ANALISIS E INTERPRETACION DE RESULTADOS

La toma de muestra fue realizada hacia mi persona, lo que logre notar en el proceso y
resultado de los estudios es que me encuentro dentro del rango

CONCLUSION. La CPK y LDH son parámetros muy útiles a la hora de determinar la

actividad del musculo estriado, no obstante tambien pueden determinar el buen
funcionamiento del corazón se te encuentras dentro del rango normal.

BIBLIOGRAFIA CONSULTADA (3 libros o artículos originales recientes)

Enzo E, Santinon G, Pocaterra A, Aragona M, Bresolin S, Forcato M, Grifoni D, Pession A,

Zanconato F, Guzzo G, Bicciato S, Dupont S. Aerobic glycolysis tunes YAP/TAZ
transcriptional activity. EMBO J. 2015 May 12;34(10):1349-70. doi:
10.15252/embj.201490379. Epub 2015 Mar 21. PMID: 25796446; PMCID: PMC4491996.

Binyamin Y, Frenkel A, Brotfain E, Koyfman L, Shliom O, Klein M. Elevated CPK levels after
hydrazine inhalation exposure in an F16 aircraft technician. Toxicol Rep. 2018 Sep 10;5:927-
928. doi: 10.1016/j.toxrep.2018.08.023. Erratum in: Toxicol Rep. 2020 Dec 25;8:60-61. PMID:
30225198; PMCID: PMC6139486.
 Fernie AR, Carrari F, Sweetlove LJ. Respiratory metabolism: glycolysis, the TCA cycle and
mitochondrial electron transport. Curr Opin Plant Biol. 2004 Jun;7(3):254-61. doi:
10.1016/j.pbi.2004.03.007. PMID: 15134745.

EVALUACION
PRÁCTICA NO. 4 CPK Y LDH
INDICADORES EXCELENTE BUENO REGULAR DEFICIENTE

REPORTE DE Cumple con todos los Falta menos de 1 dato Falta más de la mitad No presenta los datos
PRACTICA datos llenados en el llenado en el reporte de de los datos solicitados.
10% reporte de práctica. práctica. solicitados.
Título de la Práctica.
Nombre del alumno.
Grado/Grupo/Sección
Fecha de realización.
Fecha de Entrega.
ANALISIS E • Recopila y ordena • Recopila y ordena los • No Recopila y ordena • No presenta
INTERPRETACION los materiales y materiales y equipos de los materiales y materiales y
DE RESULTADOS. equipos de forma incompleta- equipos de equipos de
40% laboratorio, • No Realiza esquemas laboratorio, acorde a laboratorio para su
adecuados a su completos de sus su práctica de lab. practicas
práctica de lab procedimientos en el lab. • No Identifica los • No identifica
• Realiza su diagrama • No realiza el pipeteo de R.P.B.I. y simbología los
de flujo de forma manera adecuada en la disposición de R.P.B.I.
congruente • Faltan cálculos de residuos. • No realiza su
• Realiza el absorbancias. • No Realiza diagrama de flujo.
procedimiento de esquemas o • No realiza el
pipeteo correcto imágenes de los pipeteo correcto
• Manejo del materiales y equipos • No realiza lecturas
espectrofotómetro utilizados en la adecuadas en el
adecuadamente práctica. espectrofotómetro
• Realiza los cálculos • No realiza el pipeteo • No realiza cálculos
de las lecturas de adecuadamente para los resultados
absorbancias • No maneja
• Manejo de residuos adecuadamente el
de acuerdo a espectrofotómetro
R.P.B.I.
CONCLUSION. Redacta con sus Redacta con sus propias No redacta las No redacta las
40% propias palabras, si palabras si se cumplen o conclusiones, no conclusiones.
se cumplen o no las no las competencias, analizando los
competencias en pero no considera resultados.
base al análisis de los completamente el
resultados. análisis de resultados.
 BIBLIOGRAFIA Presenta por lo Presenta menos de 2 Presenta menos de 1 No presenta
10% menos 3 bibliografías bibliografías consultadas bibliografía consultada bibliografía.
Bibliografía (mínimo consultadas con datos y datos completos. y datos incompletos.
3) completos.
Nombre del Autor.
Nombre del Libro.
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