Tema-4-Biologia-Celular.

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Biología Celular e Histología

1º Grado en Biología

Facultad de Biología
Universidad de Oviedo

Reservados todos los derechos.

No se permite la explotación económica ni la transformación de esta obra. Queda permitida la impresión en su totalidad.
 BIOLOGÍA CELULAR

No se permite la explotación económica ni la transformación de esta obra. Queda permitida la impresión en su totalidad.
Tema 4 → La membrana plasmática (Parte 2)

PROTEÍNAS DE MEMBRANA

- Son los elementos funcionales de la membrana.

- Suelen ser los segundos elementos más frecuentes, constituyen entorno al 50%.
- Se dividen en periféricas e intrínsecas.

1. Las dos principales agrupaciones:

1.1. Proteínas periféricas o extrínsecas​. Como la palabra dice, son proteínas que se encuentran
en la periferia de la membrana, es decir, sobre ella, en su superficie. Se adhieren mediante

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enlaces no covalentes y son hidrofílicas.

Se disocian con mucha facilidad con agentes polares, pH extremo o alta salinidad. Son solubles
en soluciones acuosas y se encargan de las interacciones proteína-proteína.

1.2. Proteínas integrales o intrínsecas​. Son aquellas que se encuentran total o parcialmente
rodeadas de membrana plasmática. Se unen covalentemente a los fosfolípidos y total o
parcialmente hidrófobas.
Aquellas en concreto que atraviesan parcialmente la membrana se denominan ​proteínas
transmembrana​ y son las más frecuentes de todas.

Son mucho más difíciles de liberar, por eso solo se disocian con detergentes que rompen la
bicapa lipídica para poder liberarlas. Muchas son proteínas transmembrana generalmente de
α-hélices. La mayoría son glicoproteínas.

2. Tipos de proteínas de membrana:

1- Proteína transmembrana de paso simple. ​Son aquellas que solo atraviesan la membrana una
vez, la parte que atraviesa suele ser una hélice-alfa.
2- Proteína transmembrana de paso múltiple. Aquellas que atraviesan la membrana varias
veces.
3- En forma de láminas beta (​porinas​). Tipo especial de proteína transmembrana que solo se
encuentra en bacterias, mitocondrias y cloroplastos. Estas están formadas por hojas-beta y tienen
una forma que recuerda a un barril.
4- Unida a un solo lado de la membrana.

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 5- Unida covalentemente a un lípido (o cadena de ácido graso).
6- Unida a un lípido por medio de un oligosacárido en la hemimembrana externa.
7 y 8- Unidas por interacciones no covalentes a otras proteínas de membrana.

3. Funciones:

- Transporte.
- Anclaje y conexión.
- Estructural.
- Enzimática.
- Receptora.

Pueden así recibir información del

exterior y transmitirla al interior
mediante la unión ligando-receptor
que desencadena cascadas de
señalización.

4. Movimiento:
Tanto proteínas como lípidos son capaces de difundirse, sin embargo, las proteínas lo hacen más
lentamente.

- Difusión lateral: se da tanto en los lípidos de membrana como en las proteínas. Es el

movimiento más frecuente y los lípidos lo realizan casi todo el rato. Básicamente, las moléculas se
difunden de manera lateral (izquierda - derecha) dentro de ​la misma​ capa.

Algunos de los experimentos que se llevaron a cabo para saber si las proteínas se movían o no
fueron…

1. Frye y Edidin, J Cell Sci (1970) → Dicho experimento se basaba en la técnica de marcaje con
fluorescencia de anticuerpos (inmunohistoquímica). Se cogió una célula de ratón y una humana y
se fusionaron.
Las proteínas de tales células estaban previamente marcadas con anticuerpos antes de la fusión,
cada una con un marcaje distinto. Luego, dejaron incubar unos 40 min aprox y, pasado este
tiempo, se observó que las proteínas de ambos no permanecían separadas sino que se
entremezclaban, se habían movido.

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 2. Blanqueo por láser​ → FRAP: Fluorescence recovery after photobleaching.
Otra técnica basada en iluminar una zona con intensa luz UV por un rato. Cuando se hace esto
sobre las células, lo que sucede es que allí donde cae la luz, al rato se pierde el color, se queda
una zona blanca.
Lo que hicieron fue marcar las proteínas de la membrana celular con tinción fluorescente y ver
como reaccionaban a la luz, al rato de iluminar la zona quedaba blanca, pero al rato, poco a poco,
todo volvía a la normalidad y las proteínas marcadas de alrededor volvían a ocupar la zona
blanca.

4. Hojas beta:

Hay diferentes tipos de proteínas barril, pero las más frecuentes son las​ porinas​ (tipo C).

Con las propiedades de la

estructura secundaria en
lámina-beta, se puede crear una
estructura cilíndrica de mayor o
menor tamaño, dando lugar a
una “apertura” en la membrana.

5. ¿Cómo se conocieron las proteínas de membrana?

Gracias al microscopio electrónico, la criofractura y la
electroforesis.
La célula modelo a estudiar nuevamente fue el eritrocito.
Fue de gran ayuda ya que posee una docena de proteínas.

Criofractura → técnica basada en la congelación de

muestras, con la membrana congelada (estática), podemos
separarla en dos, es decir, separar las dos hemimembranas.

Electroforesis → separación de proteínas según el tamaño de estas a través de un gel / filtro con
diversos poros. Se mueven a través de un campo eléctrico.
Se genera un campo eléctrico, las proteínas presentan carga positiva, se ven atraídas por el polo
positivo, empiezan a desplazarse a lo largo del gel, por los poros van quedando retenidas, las más
pequeñas llegan más lejos.

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 Para conocer únicamente las proteínas que hay, es decir, no nos interesamos por su disposición
dentro de la membrana, bastaría trabajar con detergente para liberar a todas.

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6. Dominios de membrana:

Son regiones de la membrana que poseen una especialización y surgen por restricción de
movimientos de los componentes de la propia membrana.
Estos dominio crean ​células polarizadas con dos partes, una apical y otra basal. Estas
polarizaciones impiden que las proteínas se muevan ampliamente por la membrana, es una forma
de mantenerlas quietas.

7. Eritrocito:

Posee una red de proteínas fibrosas que se une a la superficie

citosólica de la membrana.

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El componente principal de la corteza del eritrocito es la
espectrina​, la proteína más abundante del eritrocito después de
la hemoglobina.

Es una proteína larga y flexible que sostiene la membrana

plasmática y preserva la forma celular. Le otorga esa flexibilidad
al eritrocito para que se pueda meter hasta en los capilares más
pequeños.
Para que pueda doblarse con facilidad y lo logra gracias a los
filamentos de miosina.

Con los eritrocitos pudimos conocer la estructura de la membrana plasmática de las células
(bicapa lipídica), también conocimos las proteínas y sus estructuras.

9. ¿Cómo bloquear la movilidad de las proteínas de membrana?

Es decir, detener la difusión lateral.

1. Autoensamblaje (A): sucede cuando las proteínas se pegan / unen entre sí y generan grandes
agregados, cuando esto sucede las proteínas no pueden moverse.

2. Interacción con elementos extracelulares (B): como ya dijimos, los receptores son proteínas,
los oligosacáridos de la capa externa. Cuando las proteínas interactúan con cuerpos externos, su
movilidad se detiene.

3. Interacción con elementos intracelulares (C): como

en el caso B, se detienen.

4. Interacción con proteínas de la superficie externa

de otra célula (D): sirve para la unión o interacción entre
células.

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 10. El glicocálix:

El glicocálix es la ​cubierta celular de la cara extracelular de la membrana. Se trata de una región

rica en carbohidratos, por ello encontramos a las glicoproteínas y los glicolípidos.

Básicamente, es una estructura rica

en azúcares que se encuentra
adherida a la cara externa.

Funciones:

- Participa en el reconocimiento celular.

- Participa en la adhesión celular (pegar unas células con otras).
- Protege la superficie celular.
- Crea barreras de permeabilidad.
- Retiene gran número de moléculas.
- Contiene muchas enzimas encargadas de catalizar reacciones que allí tienen lugar.

- Protección del glicocalix.

Actúa como barrera frente a microorganismos.
Protege la superficie celular del estrés físico y químico.

- Reconocimiento celular.
Dependiendo de las proporciones glúcidas que presente cada célula en su hemimembrana
externa, el glicocálix se presentará de una forma u otra. Por ejemplo, la envoltura glúcida de los
eritrocitos determina el grupo sanguíneo (A, B, 0), todo depende de las proporciones de
glicolípidos y glicoproteínas.
Por lo tanto, el glicocalix sirve como distintivo externo y permite que una célula sea reconocida por
otra. Los antígenos de la superficie del eritrocito son el glicocalix.

- Proceso inflamatorio.

El reconocimiento entre leucocitos y el epitelio sucede

gracias a una sustancia que se encuentra en el glicocálix
de los leucocitos.

Este reconocimiento permite la adhesión de los neutrófilos

(el leucocito) a las células endoteliales en zonas de
inflamación.

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 11. Renovación de la membrana:
Los lípidos se renuevan cada 3-5 días, las proteínas varían más, entre 2 y 13 días.

La gran mayoría de los ​lípidos se sintetizan en el REL y luego van hasta la membrana por
diferentes vías:
- Difusión de lípidos. Cuando se transfieren directamente los lípidos de orgánulo a
orgánulo. Se ha visto que el RE cede lípidos a la mitocondria a través de sus
membranas cuando estas se conectan.
- Mediante vesículas. Son aquellos lípidos que se sintetizan en el REL y viajan al AG en
vesículas y de este a la membrana (vía secretora) mediante vesículas.
- Mediante proteínas.​ Encargadas de transportar lípidos.

La gran mayoría de proteínas son sintetizadas en el RE y terminadas de empaquetar en el AG

desde donde se envían a la membrana, pero varía dependiendo del tipo de proteína:
- Proteínas internas​. Son aquellas que dan a la cara citosólica. Se sintetizan en el
citosol por radicales libres y ahí mismo son adheridas a la membrana.
- Proteínas transmembrana. Se sintetizan en el RE, en su membrana y quedan ahí
adheridas como proteínas integrales también. Viajan hasta la membrana celular en
vesículas desde el AG.
- Proteínas externas. Aquellas que dan a la cara externa celular. Se sintetizan en el RE,
dentro. Van al AG y de ahí a la membrana en vesículas.

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