CURVA TIPO DE AZUCARES REDUCTORES

LABORATORIO DE BIOQUIMICA GENERAL

PADILLA NAVARRTE CLAUDIA ALITZEL
SANTANA REYNA DANIEL

PRÁCTICA NO. 7
CURVA TIPO DE AZUCARES REDUCTORES
BIOQUÍMICA 3FV1, Profesor: CHARMINA AGUIRRE
Química Farmacéutica Industrial, Escuela Nacional de Ciencias Biológicas Instituto
Politécnico Nacional

INTRODUCCIÓN.
OBJETIVO.
Los azúcares reductores son aquellos que
poseen su grupo carbonilo (grupo funcional) -Establecer una relación entre la absorbancia y
intacto entre estos tenemos glucosa, lactosa, μ moles de azucares reductores.
fructosa, maltosa, galactosa, manosa, y que a
través del mismo pueden reaccionar con otras -Obtener la curva tipo de azucares reductores
moléculas. Se sabe que la forma abierta o para así calcular la velocidad de reacción en
extendida de los azúcares no es muy estable, cada tubo presentado en el experimento.
a tal punto que, por ejemplo, en la glucosa
representa sólo el 0,002 %. Las moléculas de
azúcar consiguen estabilizarse a través de un
equilibrio entre dicha forma abierta y por lo
menos dos formas cerradas (anómeros
cíclicos) en las que el grupo carbonilo ha
desaparecido.

Para la determinación de azucares reductores,

se utiliza el método Ácido 3,5
dinitrosalicílico (DNS), que ha sido
modificado a través de los años para
adecuarse a los distintos análisis. Su principal
ventaja radica en su alta sensibilidad,
productividad y rapidez debido a que es un
método espectrofotométrico. El
procedimiento se basa en una reacción de
óxido reducción (redox) que ocurre entre el
DNS y los azúcares reductores presentes en la
muestra.
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RESULTADOS.

Cálculos para Glucosa-Fructosa.

 Tubo 1.
0.005n 1000 mL +4 μn moles de azucares reductores

0.5x10-7 0.1 mL  Tubo 4.

1n 1, 000, 000 μn 0.005n 1000 mL

0.5x10-7 n 0.5 μn 4x10-6 0.8 mL

+1 μn moles de azucares reductores 1n 1, 000, 000 μn

 Tubo 2. 4x10-6 n 4 μn

0.005n 1000 mL +8 μn moles de azucares reductores

1x10-6 0.2 mL  Tubo 5.

1n 1, 000, 000 μn 0.005n 1000 mL

1x10-6 n 1 μn 5x10-6 1 mL

+2 μn moles de azucares reductores 1n 1, 000, 000 μn

 Tubo 3. 5x10-6 n 5 μn

0.005n 1000 mL +10 μn moles de azucares reductores

2x10-6 0.4 mL
1n 1, 000, 000 μn
1210-6 n 2 μn
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Curva tipo de azucares reductores.

1
y = 0.0921x - 0.0089
0.9 R² = 0.9955
0.8

0.7
absorbancia

0.6

0.5

0.4

0.3 T
0.2

0.1

0
0 2 4 6 8 10 12
μ moles de azúcar reductor

Gráfica 1. Curva tipo de azucares reductores

DISCUSIÓN.
El valor que se obtuvo de manera practica
conforme a la absorbancia en las diferentes
pruebas, se llevo a cabo la calibración
metodológica dando una relación, La
bibliografía marca un valor para r igua o
mayor a 0.98 a 540 nm con lecturas de
absorbancia entre 0 y 1 (Bradford, M. M.,
1976). Lo que quiere decir que lo micro moles
de azúcar reductor en esta curva tipo son
adecuado y están dentro de los parámetros para
deducir que se llevo a cabo una practica de
manera adecuada.
En el desarrollo de esta práctica al utilizar la
técnica de 3,5 DNS para la hidrólisis de
polisacáridos presentes en una muestra, se
pudieron determinar las absorbancias se por
medio de un espectrofotómetro con una
longitud de onda de 540nm. Esta técnica sirve
para cuantificar los azucares reductores que
resultaron como productos de una reacción
enzimática. El DNS reacciona únicamente con
los azucares reductores, tras la hidrólisis en
medio acido de la sacarosa, se libera glucosa y
fructuosa que son azucares reductores y
reaccionan con el DNS formando un reactivo
coloreado.
Esta intensidad de color es proporcional a la
concentración de sacarosa y eso se puede
medir por medio de lecturas de absorbancia en
un espectrofotómetro.
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CONCLUSIÓN.
Los azúcares reductores son los más
comunes, tienen la capacidad de funcionar
como agentes reductores debido a que en su
molécula están presentes grupos aldehídos
libres, que son oxidados fácilmente a ácido
carboxílico en Ph neutro por enzimas y
agentes oxidantes
moderados. Esta propiedad se utiliza para .
detectar y cuantificar monosacáridos
especialmente glucosa.
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et/34731396/223120664006-
libre.pdf?1410733036=&response-
ANEXOS.
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tubo azucares
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reductores
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7MLPltzq6Yz8QDRS6JUCkKLMHvRgr4 Tabla 1. Valores de μ moles de azucares reductores y absorbancia
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http://bdigital.ula.ve/storage/pdftesi
s/pregrado/tde_arquivos/30/TDE-