Extracción MATERIALES - 3 tubos de

ADN bucal recolección - 1 columna -

Muestra de células de la
mucosa bucal - Tubo estéril
1) Descartar el sobrenadante y el sedimento con torunda para obtener la
es reconstituido con 100 microlitros de muestra - 1 tubo Eppendorf
Buffer de Resuspensión. 2) En un tubo Extrer ADN de 2mL - 1 punta amarilla
Eppendorf adicione 20 microlitros de genómica de células
para pipeta automática - 7
proteinasa K. 3) Adiciones todo el Objetivo bucales y cuantificar
puntas azules para pipeta
contendios de la muestra de fue la cantidad extraída
por espectrometría. automática - 1 punta blanca
reconstituido con el buffer de resuspensión para pipeta automática
del paso 1 en el tubo que contiene los 20
microlitros de proteinasa K y agitar el
vórtex. Extracción
de ADN de Preparación
OBTENCIÓN DE
células MUESTRA
de la
bucales columna

Extracción 1) Adicione nuevamente 500 ul de

1) Una vez terminada la incubación se debe de ADN Primer Segundo solución de lavado y centrifugue a
sacar la muestra del horno. 2) Adicione 200 ul Lisis lavado lavado 7000 (rpm) durante 6 minutos
de Etanol al 100% al lisado obtenido del tubo celular 2)Vaciar el contenido del tubo de
eppendorf y posteriormente, agite en Vortex 3) recolección en el paso anterior.
Transfiera el contenido anterior a la columna 3)Lleve la columna en su tubo de
previamente preparada, utilizando pipeta recolección a centrifugación a
automática y punta limpia y nueva 7000 (rpm) durante un minuto.
(aproximadamente 520 a 550 uL) 4) Centrifugue 4)Transfiera la columna a nuevo
esta columna con el contenido a 7000 (rpm) por tubo de recolección. 5)Adicione
un minuto 5) Descartamos el contenido del tubo 1) Adicione 500 ul de 100 ul de solución de elución. 6)
de recolección y mantenemos la columna en solución de lavado y Lleve la columna a centrifugación
ese mismo tubo de recolección 1) Adicione 200 a 7000 (rpm) durante 1 minuto 7)
centrifugue a 7000
microlitro de solución El ADN puro se encuentra en el
(rpm) durante un
de lisis C y agite el tubo de recolección. 8) Cuantificar
vórtex. 2) Lleve el minuto 2) Proceda a
descartar el material en NanoDrop. 9)Calcular la pureza
eppendorf a incubación del ADN 10) Calcular la
en el horno obtenido en el tubo de
concentración del ADN
precalentado a 55°C recolección, recuerde
durante 20 minutos. mantener la columna